ULTRASTRUCTURE OF THE VEGETATIVE CELLS OF NOSTOC FLAGELLIFORME PREPARED WITH HIGH PRESSURE FREEZING AND FREEZE SUBSTITUTION TECHNIQUE

The ultrastructure of the vegetative cells of Nostoc flagelliforme Born. et Flah. was investigated with high pressure freezing and freeze substitution technique and compared with the results obtained by using conventional preparation methods. During the processes of chemical fixation, dehydration and embedding, the cell structures might be more artificially modified than that obtained from high pressure freezing and freeze substitution. With the present method, the sheath of N. flagelliforme could be well penetrated and no extra big space could exist between the cell and the sheath. The cell protoplasm rarely shrinked. Some fine structures of cell inclusions and unit membranes became visualized. Many bacteria were harbored in the sheath. In addition, the presence of big vacuoles in the cell of N. flagelliforme as well as the presence of bacteria in the sheath shown in the present preparation for cyanobacteria has not been described so far in the literature.

藜麦蛋白Pickering乳液替代脂肪对牛肉丸冻融稳定性的影响

肉制品在冷冻储藏期间,其品质会受到一定影响,冻融循环会导致其持水力、pH值、色泽、质构等受到负面影响。基于藜麦蛋白Pickering乳液良好的冻融稳定性,该试验用藜麦蛋白Pickering乳液替代25%~100%的猪背膘,探究其在冻融循环过程中对牛肉丸品质的影响。结果表明,3次冻融循环后,对照组牛肉丸的持水力由85.70%降至80.42%,而用藜麦蛋白Pickering乳液替代脂肪后的持水力维持在85.32%~88.85%,其中乳液替代比例50%的稳定效果较好,此时解冻汁液流失率达到最低,为1.94%。同时,用藜麦蛋白Pickering乳液替代脂肪可以延缓牛肉丸冻融过程中pH值的降低以及色泽、硬度和咀嚼度的变化;冻融过程中,牛肉丸中的不易流动水逐渐向游离水转变,而以藜麦蛋白Pickering乳液替代脂肪可以抑制其转化程度。

高取代度羟丙基蜡质淀粉的工艺优化

羟丙基淀粉因其具有较好的亲水保水性、冻融稳定性、糊液透明和粘度高等特点,在食品行业中的应用颇为广泛。探讨羟丙基蜡质淀粉的工艺生产中各因素对取代度的影响,通过单因素分析,确定四因素三水平,利用正交实验得出最佳反应条件:pH为11.5、环氧丙烷加量8.0%、反应时间16 h、反应温度39℃,此条件下产品的羟丙基含量为5.21%,产品性能大辐提升,提高其在食品行业中的应用领域。

应用高压冷冻-冷冻替代技术研究Erastin对颗粒细胞超微结构的影响

为了探究铁死亡对颗粒细胞超微结构的影响,采用高压冷冻-冷冻替代法(high pressure freezing-freezing substitution,HPF-FS)和常规化学固定法(chemical fixation,CF)对Erastin诱导处理的牛颗粒细胞和猪颗粒细胞超微结构进行研究。结果发现,与对照组相比,经Erastin诱导处理48 h的牛颗粒细胞和猪颗粒细胞的增殖受到显著抑制,ATP含量显著降低,ROS水平显著升高,指示颗粒细胞出现了铁死亡;电镜观察发现两个处理组的细胞均出现空泡化,线粒体变小,嵴断裂甚至消失,且对照组猪颗粒细胞的内质网比处理组的结构更丰富。与CF处理相比,HPF-FS技术对细胞超微结构的保存具有显著优势,胞质均匀、细胞膜界限清晰,线粒体、高尔基复合体、自噬泡、细胞核等结构清晰完整,更加接近于细胞瞬时生理状态。结果表明,利用HPF-FS技术能更加真实、全面地展现细胞的超微结构,为进一步研究颗粒细胞的凋亡调控机制及介导卵泡发育等相关研究提供参考。

高压冷冻及冷冻替代样品制备方法在体扫描电镜中的应用

高压冷冻及冷冻替代技术是一种利用高压和低温对含水组织样品进行瞬间冷冻固定和低温脱水的电镜样品制备技术,它因可以保存更加真实的细胞超微结构而常应用于透射电镜观察和分析。本文利用模式动物小鼠为材料,将这种技术应用于体扫描电镜的样品制备,并与常规化学固定的样品制备进行比较。结果显示在小鼠心肌组织中,高压冷冻及冷冻替代技术可以有效避免常规制备样品中的细胞器膜结构皱缩、细胞质分布不均匀、细胞核膜收缩形成锯齿状、甚至局部断裂等现象,使细胞超微结构更接近其生活时的状态。

冻融稳定型羟丙基-磷酸单酯糯玉米淀粉的制备工艺研究

以糯玉米淀粉为原料,制备冻融稳定型羟丙基-磷酸单酯复合变性淀粉,并对磷酸盐浓度、羟丙基取代度、反应温度、反应时间、pH、尿素浓度、磷酸盐配比对羟丙基—磷酸糯玉米淀粉的冻融稳定性和磷酸分子取代度的影响进行了研究。通过单因素和正交实验,确定制备冻融稳定型羟丙基—磷酸单酯糯玉米淀粉的最佳工艺条件为:磷酸盐浓度30%、羟丙基取代度0.12、反应温度140℃、反应时间120min、pH5.5、尿素浓度4%、磷酸盐配比3∶1。

钕掺杂非晶态Ni(OH)_2的电化学性能

采用微乳液快速冷冻沉淀法制备出Nd掺杂非晶态氢氧化镍粉体材料,采用Raman,XRD,SEM和IR对其结构形态进行了表征分析,并对其交流阻抗谱(EIS)和充放电性能进行了测量。结果发现,Nd的掺入使非晶态氢氧化镍结构缺陷增多,无序性增强,电化学反应的电荷转移电阻降低,材料的电化学性能和结构稳定性提高。样品作为MH-Ni电池正极材料在恒流80 mA.g-1下充电5 h,40 mA.g-1放电,终止电压为1.0 V时,放电电压稳定于1.240 V,开路电位为1.474 V,放电容量高达348.89 mAh.g-1,并具有优良的电化学循环性能。

高压冷冻及低温替代技术制备的拟南芥花蜜腺超微结构的研究

采用高压冷冻和低温替代技术对不同时期泌蜜前、泌蜜早期和泌蜜晚期的拟南齐(Arabidopsisthaliana L.)成熟花蜜腺的超微结构进行了研究。着重对小泡运输过程中是否与细胞质膜发生融合以及蜜腺组织中深色细胞与伴胞的区别等问题进行了讨论。拟南芥花中有一对较大的侧蜜腺以及2～4枚中蜜腺。中蜜腺位于2枚长雄蕊基部或它们之间,而侧蜜腺则位于两花瓣之间的短雄蕊附近。泌蜜前和泌蜜期,液泡的大小、高尔基体及内质网的数量、线粒体的分布以及质体内淀粉粒的大小都会发生一定的变化。当高尔基小泡从细胞内运输至细胞外时,并没有发生与细胞质膜融合的过程,与经典的“胞吐”假说不同。深色细胞在泌蜜期大量出现与筛分子旁的伴胞明显不同,前者与蜜腺顶端的气孔器相连,形成“通道”从而使蜜汁从蜜腺排出。

咪唑-1-乙酸壳聚糖支架的制备及特性研究

以壳聚糖、咪唑-1-乙酸为原材料,1-乙基- （3-二甲基氨基丙基）碳酰二亚胺盐为引发剂、N-羟基丁二酰亚胺为偶联剂,在2-（N-吗啡啉）乙磺酸（MES）缓冲体系中将咪唑-1-乙酸接枝到壳聚糖中,冷冻干燥得到具有pH 值响应性的咪唑-1-乙酸聚糖（IACS）.用傅里叶变换红外光谱（FT-IR）、核磁共振（1 H-NMR）、元素分析（EA）、场发射扫描电镜（FESEM）等方法对产物进行表征.结果表明,咪唑-1-乙酸成功接枝到壳聚糖的氨基上;当壳聚糖分子量相同时,随着咪唑-1-乙酸/壳聚糖摩尔比的增加,取代度升高,取代度落在5.52%-7.76%,IACS支架孔径尺寸分布在50-150μm 之间,呈现三维状结构. 当咪唑-1-乙酸壳聚糖溶液pH 值从4.0增加大6.5时,体系的Zeta电位从＋64.2mV 降低到＋24.2mV.综上所述,咪唑-1-乙酸壳聚糖支架有望为生物矿化和骨组织生长提供良好的模板.

低温电镜技术及其在植物(动物)材料研究中的应用

通过一些实例介绍了高压冷冻 ,冷冻置换和冷冻超薄切片等低温电镜样品制备技术 ,并且与传统方法对照 ,说明低温电镜技术的优越性。其中 ,发菜 ( N ostoc flagelliforme)营养细胞的冷冻超薄切片 (未经化学固定 ,脱水 )所显示的超微结构更客观地反映了生物样品的自然生理状态。此外 ,应用高压冷冻和冷冻置换的免疫标记电镜技术 ,首次对发菜营养细胞中的DNA进行定位 。

冻融稳定型羟丙基淀粉制备及性质研究

用糯玉米淀粉制备冻融稳定型羟丙基淀粉。并对环氧丙烷浓度、反应温度、反应时间、淀粉浓度、氢氧化钠浓度、硫酸钠浓度对羟丙基淀粉的冻融稳定性和分子取代度的影响进行了研究。确定最佳工艺为:环氧丙烷质量分数12%,反应温度50℃,反应时间25 h,淀粉质量分数40%,氢氧化钠质量分数1.3%,硫酸钠质量分数14%。同时对羟丙基淀粉的透明度、黏度和老化性质进行了研究。随淀粉冻融稳定效果的增加,其淀粉的透明度和抗老化性均增加,但黏度下降。

冻融稳定型羟丙基糯玉米淀粉的制备及特性研究

以糯玉米淀粉为原料,制备冻融稳定型羟丙基淀粉。并对淀粉乳浓度、环氧丙烷浓度、反应温度、反应时间、氢氧化钠浓度、硫酸钠浓度对羟丙基淀粉的冻融稳定性和分子取代度的影响进行了研究。确定制备冻融稳定型羟丙基淀粉的最佳工艺参数为:淀粉乳浓度40%,环氧丙烷浓度12%,反应温度50℃,反应时间25h,氢氧化钠浓度1.3%,硫酸钠浓度14%。同时对羟丙基糯玉米淀粉的透明度和抗老化特性进行了研究。随淀粉冻融稳定效果的增加,其淀粉的透明度和抗老化性均增加。

土豆淀粉马来酸酐酯的合成、表征及性能研究

研究了以聚乙二醇、水、乙醇三种不同极性的物质为反应溶剂,土豆淀粉马来酸酐酯的合成过程控制、表征及透明度、冻融稳定性的研究。在聚乙二醇反应体系中,pH=8～8.5,温度为50℃、马来酸酐占淀粉量50%的时,酯化淀粉的取代度最高,可以达到1.8702;随着温度的升高,其取代度反而下降,这说明,在高温度下反应导致酯化过程发生逆反应,而使其取代度降低。通过FTIR、DSC和XRD等现代手段对酯化淀粉进行表征,可以得出其结晶度从59.2%下降到21.18%。而且,酯化淀粉的透明度有了一定的提高,冻融稳定性好。以上性能对成膜的质量有着决定性作用。

用于冷冻冷藏制冷系统的新型制冷剂的理论研究

综述在冷冻冷藏系统中制冷剂替代研究的现状。在此基础上,提出一种新的混合制冷剂(HFC-161/HFC-125/HFC-143a,15/45/40)用于替代HFC-404A,该新型制冷剂的ODP为零,GWP比HFC-404A和R507A要小,其基本热力学性能与HFC-404A相近。对新型混合制冷剂和HFC-404A的循环性能进行理论分析与比较。结果表明,新型混合制冷剂的性能要比HFC-404A优越,环境性能更好,是HFC-404A潜有力的替代制冷剂。

一种用于免疫组织化学检验的骨髓活检标本保存的新方法(英文)

为进行骨髓活检标本免疫组织化学检验,研究了冰冻置换低温塑料包埋技术处理骨髓活检标本的新方法。结果表明:此技术能良好地保持骨髓组织细胞形态,各种血液细胞抗原成分,尤其是敏感的淋巴细胞抗原保存良好,定位准确,没有弥散,没有背景染色。此方法适用于骨髓活检标本塑料切片的免疫组织化学检验,另外,也可用于处理其它穿刺和内镜活检标本的处理。

低温电镜技术制备的树脂道细胞的超微结构

应用高压冷冻 冷冻替代技术研究欧洲赤松 (Pinussylvestris)树脂道细胞的超微结构并与传统方法进行比较 ,结果证明高压冷冻 冷冻替代技术不仅可提高树脂道细胞超微结构的保存 ,同时可减少树脂成分的损失 .具体表现为 ,细胞膜光滑平直 ,紧贴细胞壁 ,细胞器饱满 ,细胞质和细胞器基质更加浓厚均匀 ,高尔基体具有明显极性分化 ,潴泡间膜清晰 .树脂道细胞中树脂未形成浓密的黑色嗜锇滴 ,而是以浅灰色绒毛状结构存在 .上述特征表明经高压冷冻 冷冻替代制备的样品 ,其超微结构和组成成分的保存更接近于细胞的自然状态 .

活体冷冻固定及冷冻置换的小鼠睾丸组织内血清白蛋白和IgG的免疫组织化学定位

目的了解小鼠睾丸组织内血清白蛋白和IgG渗透性的时相性变化,揭示支持细胞间紧密连接的屏障功能。方法运用活体内冷冻固定技术对小鼠睾丸进行快速冷冻固定和冷冻置换,并作石蜡包埋。5μm厚连续切片用于抗鼠血清白蛋白和IgG的免疫组化染色和H.E染色。结果H.E染色切片显示距冷冻组织表面300-400μm深度范围内的精曲小管结构保存完好,无明显冰晶形成所致的人工损伤。血清白蛋白和IgG免疫反应产物主要定位于精曲小管管周肌样细胞周围,以及间质细胞之间和毛细血管内,部分免疫反应产物呈拱型出现在精曲小管上皮内,并严格限定在基底室,沿精原细胞表面分布。拱型免疫反应产物的数量与精曲小管上皮周期的发育时相密切相关。结论活体内快速冷冻固定和冷冻置换结合血清白蛋白和IgG的免疫组化方法,可很好地保存精曲小管组织结构并清楚地揭示支持细胞间紧密连接结构的时相变化。

透射电镜生物样品冷冻置换技术的方法

本文介绍了制备透射电镜生物样品冷冻置换技术的基本方法及其优点。

高压冷冻-冷冻替代技术在神经组织超微结构中的应用

采用高压冷冻-冷冻替代技术对小鼠和线虫这两种模式生物的神经组织进行了样品制备、超薄切片和电镜观察,并在取材方式上进行了摸索,旨在比较化学固定法(CF)、高压冷冻固定法(HPF)和化学-高压冷冻联合固定法(CF+HPF)三种不同方式对神经组织超微结构的影响,促进高压冷冻-冷冻替代技术在神经生物学中的应用。透射电镜观察结果显示:与传统的化学固定相比,高压冷冻固定对神经组织样品具有较好的优势,能够减少化学处理所产生的人工假象;另一方面,对于不同动物的神经组织而言,所适用的固定方式也不相同,鼠脑适用于活检枪(biopsy gun)取样后直接进行HPF固定,所得结构比较完整,神经组织微观结构清晰。而在高压冷冻之前选用CF进行预固定,能加大样品结构保存的完整性,但在膜的细腻程度上不如直接进行高压冷冻制样的结果。线虫样品由于存在较厚的体壁保护,它更适于直接进行HPF处理,从而缩短了固定前的滞留时间,可有效保留腹部神经元超微结构。

高压冷冻技术在拟南芥细胞微结构研究中的应用

高压冷冻技术是指以高压冷冻固定为主要内容的一种电镜技术。该技术可以充分、快速固定样品的同时,避免引入操作干扰,使得电镜结构更接近样品生活状态。本文利用拟南芥为材料,比较了高压冷冻固定及冷冻替代制备的电镜样品同常规化学固定、室温梯度脱水方法所制备样品的差异。结果显示,在拟南芥根及叶片中,高压冷冻技术可以有效地避免常规制备样品中的细胞壁收缩,细胞质不均匀分布,高尔基体及质体收缩,细胞膜及液泡膜皱缩甚至断裂等现象,使细胞结构更接近其生活时的状态。