威廉环毛蚓提取物蛋白质含量测定方法研究

目的 建立威廉环毛蚓提取物蛋白质含量测定的最佳方法。方法 以氨基酸分析仪测定的威廉环毛蚓提取物中的氨基酸含量为指标,对蛋白质含量检测方法 Lowry法2、改良Lowry法、BCA法、Bradford法进行对比评价。结果 Lowry法2、改良Lowry法、BCA法、Bradford法测定威廉环毛蚓提取物蛋白质含量(上清液)结果分别为27.03%、45.85%、31.58%、11.11%,威廉环毛蚓提取物蛋白质含量(混悬液)的结果分别为38.44%、52.39%、44.06%、11.56%。采用氨基酸分析仪法测定得到威廉环毛蚓提取物中游离氨基酸含量为4.18%,将威廉环毛蚓提取物蛋白质酸水解之后测定总氨基酸含量为48.53%。结论 在威廉环毛蚓提取物样品溶液的处理方式上,与样品上清液相比,样品混悬液的测定结果更接近样品中蛋白质的真实含量。以牛血清白蛋白(BSA)为对照品,相较于Lowry法2、改良Lowry法和Bradford法,BCA法更适宜用于威廉环毛蚓提取物中的蛋白质含量测定。

磺基水杨酸提取鱼粉中生物胺条件优化研究

本实验旨在对磺基水杨酸提取鱼粉中3种生物胺的条件进行优化。通过单因素实验和正交实验考察提取溶液种类、称量质量、提取溶液浓度、超声时间4种因素对生物胺提取效果的影响,并对优化后的条件,进行加标回收率实验及质控样品实验,验证结果的准确性。结果表明:正交实验优选生物胺提取的最佳条件为:称量质量0.5~1.0 g、磺基水杨酸浓度1.0%、超声时间30 min。加标回收率101%~105%,组胺质控样品实测值458 mg/kg,指定值(452.8±64.9)mg/kg,结果可靠。通过磺基水杨酸提取鱼粉中的生物胺、茚三酮作为衍生试剂,氨基酸分析仪检测,达到很好的检测效果,提供了一种简单、快捷的检测方法。

氨基酸分析仪测定饲料中的含硫氨基酸

使用氨基酸分析仪建立了饲料中含硫氨基酸的分析方法,结果显示:磺基丙氨酸和蛋氨酸峰峰形良好,分离度满足GB/T 18246-2019要求;在10~200nmol/mL的浓度范围内,2种氨基酸的线性相关系数均为0.9999;精密度实验中,保留时间RSD分别为0.02%和0.28%,峰面积RSD分别为0.20%和0.44%;加标回收率分别为98.8%和100.4%,检测结果准确,可为相关从业人员提供参考。

不同方法测定口服五维赖氨酸葡萄糖中盐酸赖氨酸含量的研究

目的分别建立氨基酸分析仪测定法、高效液相色谱测定法测定口服五维赖氨酸葡萄糖中盐酸赖氨酸的含量,比较两种分析方法的适用性。方法氨基酸分析仪法:钠系统,程序洗脱,LCAK06/Na色谱柱分离,茚三酮溶液衍生显色,测定波长570nm;高效液相色谱法:以Alltima-C_(18)(250mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,以5mmol·L^(-1)庚烷磺酸钠溶液(用20%H_(3)PO_(4)溶液调节pH值为2.5)为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱,流速为1mL·min^(-1),柱温为40℃,检测波长200nm,进样量为20μL。结果两种方法测定96批口服五维赖氨酸葡萄糖中盐酸赖氨酸的含量,结果经T检验统计分析存在显著性差异(t=4.413,P<0.001)。结论氨基酸分析仪法与高效液相色谱法比较,更适用于口服五维葡萄糖赖氨酸颗粒中盐酸赖氨酸含量的测定,且所建立的方法简单、快捷、专属性好,可以用于本品的质量控制。

两种氨基酸分析仪测定饲料氨基酸含量差异的研究

【目的】比较两种氨基酸分析仪(百康30+;日立L-8900)测定饲料氨基酸含量的差异,为分析不同仪器间测定的饲料氨基酸含量的可加性提供参考。【方法】采用配对试验设计,比较两种氨基酸分析仪对能量饲料(玉米、糙米、小麦、大麦、稻谷)和蛋白质饲料(豆粕、棉籽粕、菜籽粕、玉米蛋白粉、酪蛋白)氨基酸含量测定的差异,以及两种氨基酸分析仪在玉米-豆粕饲粮氨基酸含量测定上的可加性。【结果】百康30+测定能量饲料的7种氨基酸(赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸、丝氨酸、谷氨酸、丙氨酸)含量低于日立L-8900(P<0.05),而测定蛋白质饲料的2种氨基酸(谷氨酸、半胱氨酸)含量高于日立L-8900(P<0.05)。但二者相对偏差均在3.0%以内。百康30+和日立L-8900测定能量饲料氨基酸含量的差异大于蛋白质饲料,二者能量饲料测定值的比值为94.3%~105.0%,蛋白质饲料测定值的比值为96.6%~102.4%;测定玉米-豆粕饲粮氨基酸含量的实测值分别为计算值的91.4%~107.8%和99.0%~104.3%,且前者对11种、后者对14种氨基酸含量实测值与计算值的相对偏差在4%以内。【结论】在前处理条件相同的情况下,两种氨基酸分析仪测定能量和蛋白质饲料具有满意的一致性,日立L-8900测定结果的可加性优于百康30+。

分散固相微萃取-氨基酸自动分析仪检测化妆品中20种游离氨基酸

本文建立了分散固相微萃取-氨基酸自动分析仪同时测定化妆品中20种游离氨基酸(包括常规18种氨基酸以及牛磺酸、5-氨基乙酰丙酸等非蛋白氨基酸)的方法。将样品加入硫酸铝等分散介质和样品稀释液,涡旋、分散、超声提取后测定,采用0.04mol/L柠檬酸钠缓冲液(pH 3.45)和0.07mol/L柠檬酸钠缓冲液(pH 10.85)为流动相梯度洗脱,经LCA K06/Na磺基强酸型阳离子交换树脂色谱柱(150mm×4.6mm×5μm)分离,茚三酮柱后衍生,检测波长440 nm和570 nm。该方法中20种氨基酸色谱分离良好,线性相关系数r>0.999,检出限0.1~3.7mg/kg,加标回收率80.7%~115%,相对标准偏差为0.1%~3.9%。该方法操作简便、重复性良好、结果准确可靠,适用于化妆品中20种游离氨基酸成分的测定。

不同品种核桃中水解氨基酸的测量与分析

比较分析不同品种核桃水解氨基酸组成的相同之处及各自特点,推荐营养价值高的核桃品种。利用全自动氨基酸测定仪,定量测定了中林1号、辽宁1号、香玲、清香、礼品2号5个品种的核桃中水解氨基酸的组分及含量。结果表明,5个品种的核桃均含有16种氨基酸,包含7种人体必需氨基酸,其中蛋氨酸均为第一限制性氨基酸。辽宁1号核桃中所含氨基酸从含量和营养组成上均优于其他4种,是5种核桃中最具营养价值的品种。

山西不同地域核桃中16种氨基酸比较分析

采用全自动氨基酸测定仪测定了吕梁市汾阳市、晋中市太谷区、运城市垣曲县3个地域15个核桃样品中氨基酸组分及含量。结果表明,3个地域的核桃均含有16种氨基酸,其中7种为人体必需氨基酸。氨基酸总含量为97.97 g/kg~159.92 g/kg,必需氨基酸含量为23.66 g/kg~43.41 g/kg,分析比较可知,汾阳市核桃样品中氨基酸总量、必需氨基酸含量及必需氨基酸与非必需氨基酸的比值均为最大,营养价值较高,因此,汾阳市所出产的核桃更适合用来补充必需氨基酸。

氨基酸分析仪检出限以及分离度不确定的评定

本文使用氨基酸混合标准物质,对氨基酸分析仪检出限以及分离度进行不确定度评定。结果表明:检出限扩展相对不确定度为9.6%,通过不确定度分析,基线噪声的波动性对仪器检出限的影响最大,降低基线噪声可有效改善仪器检出限;分离度的扩展相对不确定度为6.1%,通过不确定度分析发现,标准物质的不确定度以及待测物浓度对分离度的影响最大,在仪器的线性范围内适当增大待测物浓度可有效改善待测物的分离度。

引种水晶冰菜氨基酸种类及无机元素成分分析

为了解引种水晶冰菜中所含氨基酸种类和无机元素的分布情况,采用德国Sykam S-433D全自动氨基酸分析仪和电感耦合等离子体-质谱(ICP-MS)法对引种水晶冰菜中氨基酸和无机元素进行了分析研究.结果表明,云南引种冰菜氨基酸成分含量>0.090 mg/g,含有较为丰富的氨基酸成分.并且快速测定了24种无机元素成分含量为12.709 mg/g.有害重金属元素As、Pb、Hg、Cd含量均≤0.06 mg/kg.

口服五维赖氨酸葡萄糖中盐酸赖氨酸含量的研究

建立氨基酸分析仪测定口服五维赖氨酸葡萄糖中盐酸赖氨酸含量的分析方法。样品经0.1 mol/L盐酸溶液溶解,采用氨基酸分析仪钠系统进行程序洗脱,LCAK06/Na色谱柱分离,茚三酮溶液衍生显色,在570 nm波长下测定赖氨酸色谱峰,采用外标法峰面积定量,保留时间定性。表明,盐酸赖氨酸在1.15~34.62μg/mL有良好的线性关系(r=0.9999),回收率为96.9%,相对标准偏差为1.5%(n=6)。采用氨基酸分析仪测定口服五维赖氨酸葡萄糖中盐酸赖氨酸的含量方法简单、便捷、准确性高。

全自动氨基酸分析仪法测定4种贝类肌肉中谷胱甘肽和游离氨基酸含量

建立一种测定贝类肌肉中谷胱甘肽和游离氨基酸的全自动氨基酸分析仪法,以4种常见贝类为研究对象,采用0.02 mol/L盐酸溶液作为提取剂,体积分数5%磺基水杨酸溶液为蛋白沉淀剂,同时优化了缓冲溶液的组成及洗脱程序,并对该方法的线性范围、检出限、精密度以及回收率进行测定。结果表明:贝类肌肉中的谷胱甘肽和游离氨基酸有着较好的分离效果,线性关系良好,相关系数为0.999 1~0.999 9,检出限(RSN=3)为0.07~0.27μmol/L,加标平均回收率为86.40%~102.42%,日内和日间相对标准偏差分别为0.31%~0.73%和1.14%~2.60%。4种贝类肌肉组织中的游离氨基酸含量比较丰富,总游离氨基酸含量分别为1 396.39、1 016.04、911.15、287.01 mg/100 g,文蛤>青蛤>缢蛏>牡蛎,主要的游离氨基酸为牛磺酸(Tau)、谷氨酸(Glu)、丙氨酸(Ala)、精氨酸(Arg);谷胱甘肽含量分别为103.20、82.53、61.77、33.37 mg/100 g,青蛤>文蛤>缢蛏>牡蛎。该方法适用于贝类肌肉中谷胱甘肽和游离氨基酸含量的测定与分析。

氨基酸自动分析仪快速分析方法的研究

本文研究了适用于日立L8900氨基酸自动分析仪(L8800同样适用)的国产化缓冲溶液和茚三酮反应液配方,研究出了适用于日立L8900氨基酸自动分析仪的快速分析程序方法。结果表明:本文所研究的国产化试剂能够完全达到原装进口试剂的效果,并且相比原装试剂拥有更好的适应性,便于在国内推广使用。快速分析程序方法相比原装程序方法分析时间缩短至43 min,减少20%,具有分析时间短、检测成本更短,工作效率更高的优点,同时也减少了有机试剂的排放,降低了对实验人员和环境的伤害。

全自动氨基酸分析仪鉴别不同种类酱油中氨基酸的分析研究

采用全自动氨基酸分析仪对酱油中氨基酸的组成进行分析,结果表明酿造酱油和配制酱油中氨基酸的组成存在一定差异;不计谷氨酸含量时,酿造酱油和配制酱油中的天冬氨酸、丝氨酸、脯氨酸、甘氨酸的总量有明显的差异,酿造酱油中天冬氨酸、丝氨酸、脯氨酸、甘氨酸的总量约占总氨基酸的30%,配制酱油中天冬氨酸、丝氨酸、脯氨酸、甘氨酸的总量约占总氨基酸的50%;酿造酱油不含羟脯氨酸,而配制酱油可能含羟脯氨酸。经研究表明通过对酱油中氨基酸组成成分分析可以作为区分酿造酱油和配制酱油鉴别体系的指标之一。

烟草中游离氨基酸的自动分析仪测定

以茚三酮为显色剂(溶液流速:0.30mL/min),柠檬酸钠水溶液为缓冲液(流速:0.45/min),在柱温53℃、反应温度138℃及570nm和440nm检测波长下利用氨基酸自动分析仪测定了国产和进口18种白肋烟烟叶和11种混合型卷烟中的游离氨基酸含量。结果表明:①进口白肋烟烟叶的游离氨基酸总量明显高于国产烟叶;②进口白肋烟中的天冬氨酸、谷氨酸含量高于国产烟叶,而国产白肋烟中的脯氨酸含量高于进口烟叶;③进口混合型卷烟的游离氨基酸总量明显高于国产卷烟,尤其是天冬氨酸、白氨酸、酪氨酸和脯氨酸。

氨基酸自动分析仪快速测定γ-氨基丁酸

用氨基酸自动分析仪30min短程序快速测定植物产品中的γ-氨基丁酸，并与53min标准程序的测定值进行比较，试验表明两种程序测定结果一致。用γ-氨基丁酸标准品作精密度和回收率试验，结果表明：峰位置重现性变异系数为0．17％，峰面积重现性变异系数为0．23％，回收率为97．89％～101．2％。采用两种程序测定糙米和中药材中的γ-氨基丁酸，测定结果的相对误差小于3％。该改良方法稳定、快速、准确，适于γ-氨基丁酸的测定。

苜蓿不同部位的氨基酸组成及含量分析

[目的]为苜蓿的深度开发利用提供理论依据。[方法]利用氨基酸自动分析仪测定分析苜蓿的茎、叶和种子的氨基酸成分和含量。[结果]结果表明,苜蓿中氨基酸含量丰富,叶和茎中含有18种氨基酸,种子含有17种氨基酸。不同苜蓿品种间,同一品种不同部位间氨基酸含量差异较大。苜蓿叶片、茎和种子中氨基酸含量占干重比例分别为30.43%、24.44%和18.31%。必需氨基酸和非必需氨基酸比较分析结果表明,苜蓿叶片具有较高的营养价值。[结论]苜蓿具有更高的营养价值和开发利用价值。

烟草中游离氨基酸的测定

[目的]探讨用氨基酸自动分析仪建立一种测定烟草中游离氨基酸的方法。[方法]用氨基酸分析仪法测定烟叶中的游离氨基酸并对这些游离氨基酸分别定性定量检测。[结果]氨基酸分析仪法能够分离检测烟叶中的23种游离氨基酸（除了蛋氨酸），其回收率均在78．86％-101．46％，标准偏差均在8％以内，具有较好的重现性和回收率。最优的氨基酸提取方法是：样品过60目筛，用0．005mol／L的盐酸超声萃取30min。对不同的烟叶样品进行检测，发现不同种类烟叶所含有的氨基酸具有一定的规律性。烤烟和香料烟中所含的游离氨基酸以Pro为主，而白肋烟以Asn为主；只有白肋烟中含有氨基酸Tau，而烤烟和香料烟里面几乎检测不到。[结论]氨基酸分析仪法是测定烟叶中游离氨基酸较好的方法。

氨基酸分析仪法快速测定玉米籽粒中赖氨酸含量

以9个高赖氨酸玉米和2个普通玉米杂交种籽粒样品为材料,用日立L-8900型全自动氨基酸分析仪对高赖氨酸玉米和普通玉米籽粒中赖氨酸含量进行定量测定。了解全自动氨基酸分析仪的检测效果是否可以很好的比较普通玉米与高赖氨酸玉米籽粒中的赖氨酸含量。结果表明高赖氨酸玉米籽粒赖氨酸含量介于0.34%-0.42%之间,普通玉米赖氨酸含量介于0.24%~0.25%,存在显著差异。日立L-8900型全自动氨基酸分析仪法测定玉米籽粒中赖氨酸含量与其它传统方法相比较,该方法快速、简便、灵敏度高、重现性好、样品需求量少,可以较好的在玉米育种中应用。

血清游离羟脯氨酸的快速检测

采用6300黄金系统氨基酸分析仪,在锂柱140min程序生理体液分析方法基础上,建立了血清游离羟脯氨酸(HYP)快速测定方法 ,并用该法检测了正常人及肾病 (有或无肾小球硬化与肾间质纤维化 )病人血清中游离HYP的含量 ;用该法完成分析的时间为24min,比原方法缩短了116min ;该法重复性良好 ,日内RSD2.3 % ,日间RSD3.7 % ,回收率97 % ;纤维化组血清羟脯氨酸浓度显著高于无纤维化组 (P<0.001)和健康对照组 (P<0.001) ,用该指标显著增高判断肾纤维化 ,敏感性100 % ,特异性91 % ,假阳性9 % ;该法是一种快速、准确、可靠的血清或血浆羟脯氨酸定量检测方法 ,有利于大批量样品的快速测定 。