HPLC法同时测定马兜铃中4种成分

目的建立同时测定马兜铃Aristolochia debilis Sieb.et Zucc.中马兜铃酸III、7-羟基马兜铃酸Ⅰ、马兜铃内酰胺Ⅰ、马兜铃酸Ⅰ的HPLC方法。方法马兜铃70%甲醇提取液的分析采用Agilent Extend C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相为乙腈（A）-0.1%甲酸水（B）,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃,检测波长254 nm。结合大鼠口服马兜铃酸I的半数致死量（LD50）及细辛药材中马兜铃酸I的限量,确定马兜铃中马兜铃酸的限量。结果马兜铃酸Ⅲ、7-羟基马兜铃酸Ⅰ、马兜铃内酰胺Ⅰ、马兜铃酸Ⅰ分别在0.34-31.90、0.32-30.20、0.12-28.10和0.21-41.30μg/mL范围内线性关系良好。马兜铃中马兜铃酸Ⅰ或马兜铃总酸的限量为0.000 3%。结论该方法准确可靠,可用于马兜铃中马兜铃酸的限量测定。

冠心苏合丸原方及改进方对心肌细胞过氧化氢损伤的影响

目的：观察冠心苏合丸中土木香代替青木香后药物血清对大鼠心肌细胞过氧化氢损伤的影响，阐明冠心苏合丸系列方抗氧化自由基损伤作用机制上的异同。方法：用体外细胞培养方法，培养乳鼠心肌细胞，复制心肌细胞过氧化氢损伤模型；运用血清药理学方法，将心肌细胞与含药血清共培养，测定培养上清液中肌酸激酶（CK）活性、乳酸脱氢酶（LDH）活性、丙二醛（MDA）含量以及细胞超氧化物歧化酶（SOD）活性、Na^＋ - K^＋ -ATP酶和Ca^2＋ - Mg^2＋ -ATP酶活性。结果：含青木香的冠心苏合丸（QG）、含土木香的冠心苏合丸（TG）以及不含木香的冠心苏合丸药后30—90min的含药血清均能不同程度地降低培养上清中CK、LDH活性以及MDA含量，增强细胞SOD活性；含土木香及不含木香的两种改进冠心苏合丸方在个别指标上的作用优于含青木香的冠心苏合丸原方。结论：冠心苏合丸组方对心肌细胞氧化自由基损伤均有明显保护作用，作用机制相似；原方中青木香被土木香替换或者去掉青木香，不影响其抗氧化自由基损伤的作用。

马兜铃酸所致中草药肾病的医学和药学进展及其引发的思索

通过对引起西方社会广泛关注的中草药肾病的病理学研究、分子作用机制、植物学和生药学研究各方面文献的归纳总结 ,分析了马兜铃酸所致中草药肾病的临床病理 ,深入地探讨了西方社会误用含马兜铃酸的中药材而造成的肾病的原因。并进一步指出了应如何解决当前发生的此类现象以及我国中医药事业发展所面临的几个问题。

马兜铃提取条件的优化以及炮制减毒的研究

采用单因素试验考察药材粒径、加水量、煎煮时间和煎煮次数4个因素对马兜铃中马兜铃酸A提取效果的影响。运用HPLC测定炒制马兜铃与蜜炙马兜铃中马兜铃酸A的含量。结果表明马兜铃的最佳提取条件为粒径1cm2,加水22倍量,煎煮2次,每次1.0h。马兜铃炒制和蜜炙均可降低毒性成分马兜铃酸A的含量,蜜炙使马兜铃酸A的含量降低了51.77%,减毒效果明显优于炒制。

HPLC法测定马兜铃蜜炙过程中马兜铃酸A的含量变化

目的采用高效液相色谱法测定马兜铃蜜炙过程中马兜铃酸A的含量变化。方法色谱柱:Hypersil ODS2C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:乙腈-0.05%H3PO4溶液(体积比40∶60),柱温:25℃,流速:1.0 mL.min-1;检测波长:260 nm。结果马兜铃酸A线性范围为0.021 2～0.424 0μg,r=0.999 9,平均加样回收率98.80%,RSD值为2.10%(n=6)。结论该含量测定方法简单、准确、可靠;马兜铃经蜜炙后马兜铃酸A的含量下降,说明蜜制马兜铃能起到降低毒性的作用。

高效液相色谱-电喷雾质谱法分析青木香及其发酵品中马兜铃酸类成分(英文)

目的:建立高效液相色谱-电喷雾高分辨质谱法(HPLC-ESI-TOF-MS),鉴定青木香及其灵芝菌发酵品中马兜铃酸类成分。方法:采用Hanbon Phecda C18柱(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈(A)和0.2%醋酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,0-25min(15%→30%A),25-45min(30%→50%A),45-55min(50%→60%A),55-75min(60%→80%A)75-80min(80%→15%A),流速:1.0mL·mL-1。利用样品的色谱保留时间及质谱数据进行分离和分析,对其中马兜铃酸类成分的结构进行了鉴定。结果:7种马兜铃酸类成分分别被鉴定为马兜铃酸I(6)、马兜铃酸II(4)、马兜铃酸III(5)、马兜铃酸Ia或IIIa(1)、马兜铃酸IVa、Va、VIIa或VIIIa(3)、马兜铃酸IV或VII(7)和马兜铃酸VIa(2)。与青木香原药材相比,发酵品中这7种马兜铃酸类成分峰面积均有所下降,其中化合物1、2、4-7的下降率分别为93.5%、87.2%、94.1%、42.2%、86.2%和69.5%;而化合物3未能检出。与此同时,发酵品在色谱保留时间0-20min的范围内,明显出现了大量新的色谱峰(可能为马兜铃酸类成分经发酵转化后产生的极性物质)。结论:本方法对青木香及其发酵品中马兜铃酸类成分的指认有很大帮助,提示青木香通过灵芝菌发酵,可大大降低其中导致肾毒性问题的马兜铃酸类成分的含量。