转hrap基因马铃薯获得晚疫病抗性研究

马铃薯晚疫病(Phytopthora infestans)是制约马铃薯生产的主要病害之一。为了扩大马铃薯抗病基因源,提高栽培马铃薯的抗病能力,本试验利用根癌农杆菌介导的方法,将由harpinPss引起过敏反应的甜椒中分离出来的一种过敏反应促进蛋白hrap基因导入马铃薯品种"Burbank"中。结果表明,获得的转化植株经PCR检测其阳性率为61.15%;Southern杂交有53.85%的植株表现阳性;对转化材料进行RT-PCR检测结果,表明导入的hrap基因已整合到马铃薯DNA中;从转化植株中分离hrap基因与GenBank中的hrap cDNA(GenBank:AF168415)进行DNA测序结果比较,两者的相似度达99.3%。通过对转基因植株进行活体接种抗病性检测,转hrap基因的马铃薯获得了抗晚疫病(Phytopthora infestans)植株。

HRAP基因诱导型植物表达载体的构建及烟草转化

系统获得性抗性是植物抵御病菌侵染的一种独特的防御机制。HRAP基因是一种从甜胡椒中克隆的蛋白质激发子,可以有效引发植物系统性抗性。SAR8.2b基因是烟草系统获得性抗性信号传导途径中下游响应基因,受病原物和水杨酸诱导。本试验根据Genebank发布SAR8.2b基因的启动子序列,利用PCR技术,克隆了SAR8.2b基因的完整启动子,命名为SAR8.2bP,然后将SAR8.2bP构建到pUC18-HRAP载体中命名为pUC18-SAR8.2bP-HRAP,然后用SAR8.2bP-HRAP替换p2300-121载体中的35S启动子和GUS基因,重组子命名p2300-SAR8.2bP-HRAP。将构建的植物表达载体转化农杆菌GV3101,利用叶盘法转化烟草,通过PCR筛选,获得了转基因植株。为进一步验证转基因烟草的抗病效果奠定了基础。

过敏反应促进蛋白基因hrap转马铃薯的研究

利用根癌农杆菌介导法,将由甜椒中分离出的一种过敏反应促进蛋白hrap基因导入马铃薯品种"Russet Burbank"和"大西洋"中。转化再生植株经过含卡那霉素培养基的生根筛选、PCR检测、Southern杂交鉴定表明目的基因已导入马铃薯品种中,RT-PCR检测结果表明目的基因已整合到马铃薯DNA中并表达。通过对转基因植株进行活体接种抗病性检测,获得了抗晚疫病和抗青枯病的植株。

实时定量PCR检测TRF1、TRF2和hRAP1基因在急性髓细胞性白血病中mRNA表达

目的:建立一种实时荧光RT-PCR方法,定量检测急性髓细胞性白血病(AML)患者外周血白细胞细胞TRF1、TRF2和hRAP1mRNA的表达水平及相互关系。方法:选取48例初治AML患者和21例健康志愿者,采用实时荧光RT-PCR与Lightcyeler荧光PCR仪定量检测TRF1、TRF2和hRAP1mRNA的表达水平;采用2-△△Ct法处理实时荧光定量RT-PCR数据。结果:AML首治患者TRF1、TRF2和hRAP1mRNA表达水平较对照组健康志愿者分别下降了2.9倍,2.2倍和16.6倍,且差异有统计学意义;AML患者组TRF1和TRF2mR-NA的表达改变具有一定的相关性(r=0.57,P<0.01)。结论:成功利用患者外周血检测出端粒结合蛋白TRF1,TRF2在白血病细胞中mRNA的表达水平下降,并首次检测发现hRAP1在AML患者细胞中存在表达下降,间接说明了hRAP1的表达下降也是白血病的发病原因之一。

高效藻类氧化塘处理有机废水的研究和应用

在普通氧化塘(SP)的基础上,发展起来的高效藻类氧化塘(HRAP)具有停留时间短、水深浅、连续搅拌等特点,在氮、磷的去除上具有明显的优势。通过比较高效藻类氧化塘与传统氧化塘的不同特点,详细叙述了高效藻类氧化塘对有机碳、N、P和病原体的去除机制,以及阳光、温度、pH等因素对COD、NH4-N、P、病原体的去除和对藻类生长的影响,并展望了研究前景。

甜椒抗菌蛋白基因(harp)转化桉树的研究

用不同浓度的2,4-D与IAA对桉树叶盘进行了愈伤组织的诱导及植株再生的试验,建立了新的桉树再生体系.进一步用含甜椒抗菌基因(hrap)的农杆菌侵染桉树叶盘,发现侵染后对愈伤组织诱导率无明显影响,却抑制了桉树的植株再生.对再生苗的PCR和Sou thern杂交检测证实已将hrap基因已转入桉树植株的基因组中.

植物细菌诱导型表达载体的构建

根据GenBank中细菌诱导型启动子的碱基序列设计一对引物,通过PCR扩增出启动子PPP3(AF469483,220bp).经分子操作将启动子和质粒pUC18连接后转化E.coliDH5α,经蓝白筛选和PCR检测筛选阳性菌落,测序结果与Genebank中的碱基序列完全相同.对扩增到的PPP3片段和含目的基因(hrap或pflp)的pBI121质粒进行双酶切,分别回收PPP3片段和含目的基因的pBI121大片段,连接后转化E.coliDH5α,通过卡那霉素抗性筛选和PCR检测,表明细菌诱导型启动子和目的基因已正确连接.用重组质粒转化农杆菌,经卡那霉素抗性筛选和PCR检测,证明植物细菌诱导型表达载体构建成功.

Geodesics算法在雷达投影转换中的应用检验

基于上海市气象局布设于临港的X波段移动式双线偏振雷达观测资料,利用反射率因子、差分反射率和相关系数等变量识别出东海大桥固定地物回波位置,进而采用Geodesics和HRAP(Hydrologic Rainfall Analysis Project)投影转换算法将雷达回波的极坐标位置转换至地理坐标。以国家测绘局利用GPS技术测量的沪芦高速(东海大桥段)地理坐标作为真值,将环境大气分为晴空回波-低湿度情况和降水回波-高湿度情况分类检验两种算法的效果。检验算法包含经投影转换后地物回波样本位于桥面主体内部的数目(多边形检验)和样本偏离桥体中心线的距离(中心线检验)。其结果表明:Geodesics算法在多边形和中心线检验方面表现均优于HRAP算法,其在雷达投影转换的实际业务中具备一定的应用价值。

螺旋藻培养技术在糖蜜酒精废液处理中应用的初步探讨

通过分析糖厂中糖蜜酒精废液的化学成分，并根据螺旋藻的混合营养特性，阐述了螺旋藻的生长条件及这类酒精废液的改性途径，论述了高效混合营养型螺旋藻藻种驯化与筛选问题，提出利用螺旋藻高达藻泡（HRAP）培养系统处理这类酒精废液的工艺路线。

微藻生物能源及废水处理

微藻被认为是最有希望的生物质能源生产原料之一。微藻利用CO2合成油脂的产率大大超过农业油料作物,同时不竞争耕地。但是由于生产成本高,微藻能源仍然没有实现规模化生产。高效藻类塘技术利用微藻生长速度快、营养吸收能力强的特点,实现废水的高效处理。因此,将微藻生物能源生产和废水处理进行有效结合,能够降低生产成本,对实现微藻能源规模化生产具有重要意义。

低温下光照对高效藻塘去除重金属的影响

高效藻塘藻菌共生系统已成为低成本水处理技术的重要选择之一。由于多数地区年内季节温度存在差异,研究高效藻塘越冬期间的处理效果及影响因素对于其全年稳定运行具有重要意义。通过分析高效藻塘中藻菌生长状况研究低温下光照对Zn2＋、Pb2＋、Cr6＋去除效果的影响。结果表明：光照度对藻类的生长具有显著性影响,光照度与光照时间对细菌生长的影响随温度的变化而变化。在昼夜温度4~14℃条件下,增加6 000 lx光照度和16 h光照时间,相比于增加3 000 lx光照度和12 h光照时间,Zn2＋、Pb2＋、Cr6＋的去除率分别提高了34.4%、43.1%、25.7%。在昼夜温度3~8℃条件下,其去除率则分别提高了24.9%、25.5%、19.8%。重金属去除率与藻浓度呈一定程度的正相关性,光照通过影响高效藻塘中藻类与细菌的生长,间接的影响重金属的去除。

高效藻类塘处理农村面源污水的试验研究

目前我国农村生活污水排放量不断增加,但处理情况却不容乐观,96%的村庄未建设排水渠道和污水处理系统,造成了农村环境的严重污染。以模拟农村面源生活污水(简称污水)为研究对象,利用高效藻类塘小试装置对污水处理的最佳工艺条件、影响因素及处理机理开展了系统的试验研究。研究结果表明:在确定藻类最佳培养基的基础上,藻类塘脱氮除磷的最佳条件为全曝气、温度为24~35℃、光照强度为4 000 Lux、p H为7.5,藻类浓度为8×105个/m L,此时藻类塘对污水中NH+4-N去除率高达95%以上,TP去除率达60%以上,COD去除率高达90%以上。