高血压相关基因hrg-1在血管平滑肌细胞再分化过程中的表达及功能

研究高血压相关基因hrg 1表达与血管平滑肌细胞 (VSMC)再分化的关系及其在细胞生物学行为调节方面的作用 .采用血清饥饿培养和全反式维甲酸诱导使处于增殖状态的去分化型VSMC再分化 ,观察细胞再分化过程中HRG 1表达变化 ,并探讨其功能 .在血清饥饿和维甲酸诱导VSMC再分化过程中 ,hrg 1基因表达显著上调 ,其表达活性在诱导 2 4h达高峰之后 ,一直维持在较高水平上 ,且其表达量和变化规律与细胞收缩蛋白SMα肌动蛋白和SM2 2α相类似 .免疫共沉淀和免疫双荧光染色结果证实 ,HRG 1抗体可与SMα肌动蛋白共沉淀 ,且两者在同一细胞共定位 .用HRG 1表达质粒转染去分化型VSMC可显著抑制其迁移能力 .结果提示 ,HRG 1在胞质中以与SMα肌动蛋白相互缔合的方式存在 ,其表达与VSMC分化有关 。

不同人群HRG-1基因单核苷酸多态性与高血压独立危险因素的关系

目的:通过研究不同人群中新发现的高血压相关基因HRG-1基因多态性,以揭示高血压相关基因多态性与高血压的关系。方法:选取74例正常对照,其中男38例,女36例,平均年龄(54.15±7.77)岁。原发性高血压患者51例,其中男27例,女24例,平均年龄(57.25±7.97)岁;高血压家族患者20例,其中女11例,男9例,平均年龄(37.97±21.93)岁。取外周静脉血并提取DNA,设计相应的引物,聚合酶链反应(PCR)扩增法获得相应的产物,应用DNA测序法直接得到PCR产物的核苷酸序列后比较不同人群的相同片段的碱基组成及其特征。结果:肌酐和尿素氮在高血压组明显高于正常血压组(F=17.25,2.99;P=0.000,0.060),而高血压组和高血压家族组的收缩压和舒张压均明显高于正常血压组(F=19.25,6.68;P=0.000,0.002)HRG-1基因第12位内含子的21位点(1q82153)的C-G单核苷酸变异在高血压组与正常人之间存在着明显的差别(P<0.05),高血压家族组与正常人也存在明显差别(P<0.01)。C/G等位基因在不同人群中存在着类似的差别。且在人群中以CC基因型分布较为常见(P<0.01)。结论:肾功能的指标(肌酐和尿素氮)可能可以较早地反映高血压的进展和靶器官损害状况。HRG-1基因第12位内含子的21位点,即1q82153的C-G单核苷酸变异及基因频率在中国汉族不同的人群中存在着明显的?

高血压相关基因hrg-1对血管平滑肌细胞周期蛋白E和P27蛋白表达及细胞增殖的影响

目的 研究hrg 1对血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖的抑制作用是否与调节细胞周期调节蛋白 (cyclin)表达活性有关。 方法 采用pcD2 hrg 1真核表达质粒转染体外培养的VSMCs,Westernblot、MTT法、流式细胞术观察该基因过表达对细胞周期蛋白E(cyclinE)、P2 7表达及细胞增殖和细胞周期的影响。结果 转染pcD2 hrg 1后 ,与对照组细胞相比 ,G1期细胞比例上升 ,S期细胞比例下降 ,细胞生长速率明显减慢 ;而转染hrg 1反义RNA表达载体的细胞生长速率明显加快。转染hrg 1 2 4h后cyclinE表达开始降低 ,之后呈持续下降趋势 ;至 72h ,其表达量约为对照组的 1 /2。P2 7的表达则呈上升趋势 ,转染hrg 1 2 4h后 ,其表达活性显著增加 (为对照组的 2 6倍 ) ;转染后 48h达高峰 ,为对照组的 3 3倍 ;在转染后72h仍维持在较高水平。结论 hrg 1通过上调P2

应用组织芯片研究HRG-1基因在前列腺癌和前列腺增生组织中的表达

目的观察HRG-1基因在前列腺增生和前列腺癌组织的表达,探讨HRG-1作为肿瘤标志物的可能性。方法应用原位杂交法,检测含有前列腺癌组织(83例)和前列腺增生组织(95例)的组织芯片上HRG-1 mRNA的表达。结果前列腺腺癌标本中有57例为HRG-1阳性表达,而且大部分为强阳性,阳性率为68.68%;前列腺增生组织中12例表达阳性,阳性率仅为12.63%。HRG-1 mRNA在前列腺癌组织和前列腺增生组织中的表达具有显著差异(P<0.01)。而在癌组织与癌旁组织的比较中,55例癌旁及正常前列腺组织均为阴性表达,HRG-1 mRNA在癌组织的表达明显高于癌旁及正常组织(P<0.01)。结论 HRG-1在前列腺癌组织表达水平的特异性升高,提示HRG-1基因有可能作为一种新的肿瘤标志物用于前列腺肿瘤的诊断。

HRG-1基因在膀胱癌和正常膀胱组织中的表达

目的观察HRG-1基因在膀胱正常组织和膀胱癌组织中的表达,探讨HRG-1基因表达与膀胱肿瘤病理分级和临床分期的关系。方法应用免疫组化SP法检测63例膀胱癌和28例膀胱正常组织石蜡标本中HRG-1表达情况,并进行相关临床病理分析。结果在正常膀胱组织和膀胱癌组织中HRG-1表达有显著性差异(P<0.05);HRG-1的阳性表达与膀胱癌病例分级、临床分期之间有显著性差异(P<0.05)。结论 HRG-1基因在膀胱癌组织中表达水平显著提高,提示该基因可能对膀胱肿瘤病理分级和临床分期有一定的指导意义。

高血压相关基因(HRG-1)在心血管病发病中的作用(英文)

目的 研究高血压相关基因 (HRG 1)在心血管病发病中的作用。方法 用RT PCR和Northernblot分析HRG 1的表达。用3 H TdR掺入和组织学方法检测血管平滑肌细胞 (VSMC)的增殖。结果 Northernblot分析显示 ,HRG 1mRNA不仅可在VSMC中表达 ,亦可在大鼠多种组织中表达 (心、脑、肺、肾和肝 )。此外 ,在SHR大鼠的心、脑、肾和肝组织的HRG 1基因表达均明显低于正常WKY大鼠。半定量RT PCR和组织学分析表明 ,ApoE敲除小鼠和再狭窄动物模型的HRG 1mRNA表达减少 ,并且均可见到新生内膜形成。刺激VSMC增殖的ET ,AII和IL 1可减少VSMCHRG 1mRNA的表达。ANF ,CGRP和Adm可抑制VSMC增殖 ,增加HRG 1mRNA表达。这些作用能被相应的阻断剂或抗体所阻断或抑制。结论 HRG 1是一种与VSMC增殖相关的基因 ,它在动脉粥样硬化 ,再狭窄和高血压等心血管疾病中可能具有重要作用。

降钙素基因相关肽对血管平滑肌表型转化和增殖的影响

目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化和增殖的影响以及它们之间的关系。方法取大鼠主动脉先体外培养8d后再贴块培养(VSMCs);对照组直接用贴块法培养细胞。实验分为CGRP作用组和无CGRP作用组。用5-BrdU标记平滑肌细胞增殖变化;RT-PCR检测HRG-1和SM22α表达变化。结果血管经体外培养8d后再贴壁培养的平滑肌细胞可见大量棕黄色标记增殖的细胞核,HRG-1和SM22αmRNA表达明显减少;而CGRP作用组标记的血管平滑肌增殖细胞明显减少,HRG-1和SM22αmRNA表达明显上调。结论CGRP对VSMCs增殖有抑制作用并同时可使VSMCs从合成型向收缩型转化。

大鼠血管平滑肌增殖器官模型的建立及其机制探讨

为更好地研究血管平滑肌细胞增生性疾病的机理及防治,建立一种体外VSMC增殖器官模型,并对其机制作初步探讨。HE染色和免疫组化染色显示,大鼠主动脉段在体外拉伤内皮并经20%血清培养后,会出现中膜VSMCs的增殖。体外培养5 d后血管壁VSMC就出现不同程度增生,其中13 d的血管有明显斑块形成;免疫组织化学染色见有标记的增生VSMCs;RT-PCR检测显示,Hrg-1和SM22αmRNA的表达随培养天数增多而减少,至13 d检测不出。而在同样体外培养10 d情况下,与对照组相比,内皮损伤组培养上清中ET-1明显增多,Hrg-1、SM22a mRNA表达下调,Brdu标记增殖细胞增多,当加入内皮素受体阻断剂BQ123后标记细胞明显减少,其中血清培养组与无血清培养组相比,以上检测变化有显著性差异。结果表明,大鼠主动脉经体外培养能诱导平滑肌细胞异常增生并且表型从收缩型向合成型转化,ET-1和血清作用是该模型平滑肌增殖的主要因素。本模型为研究血管平滑肌增殖性疾病的机理和防治提供了一个较好的实验平台。

人参皂苷结构修饰物HRG的体内抗肿瘤活性研究

目的探讨新化合物3β,12β,20(S)-三羟基达玛-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1-2)-β-D-吡喃葡萄糖苷[3β,12β,20(S)-trihy-droxy dammarane-3-O-β-D-glucopyranosyl(1-2)-β-D-glucopyranoside](HRG)即人参皂苷结构修饰物的体内抗肿瘤活性。方法建立肝癌H22鸡胚尿囊膜(CAM)移植瘤模型,观察药物对移植瘤生长、诱导血管生成数、生长抑制率等的影响;将移植瘤切片及HE染色进行光镜组织形态的观察和测定;运用免疫组织化学染色(S-P法)检测移植瘤微血管密度及血管内皮生长因子的表达情况。结果新化合物HRG 25、50、100μg.mL-13个剂量组对肝癌H22-CAM移植瘤生长均有抑制作用,其抑瘤率分别为27.73%、50.02%、64.21%;HRG可显著减少移植瘤诱导血管生成数,且光镜下观察发现各用药组移植瘤组织均存在不同程度坏死,坏死程度与移植瘤诱导血管生成数成反比例关系;HRG可降低移植瘤的微血管密度,并下调血管内皮生长因子的表达。结论 HRG具有体内抗肿瘤活性,能够显著抑制肝癌H22-CAM移植瘤的生长和其诱导的血管生成,其机制可能与降低移植瘤微血管密度和下调血管内皮生长因子表达有关。