丹酚酸B抑制HuH-7细胞的Hippo/YAP通路机制研究

目的 探讨丹酚酸B(salvianolic acid B,Sal B)对人肝癌HuH-7细胞是否具有抑制作用,并探讨其是否通过Hippo/YAP信号通路发挥作用。方法 采用TGF-β1 (9 pmol·L^(-1))或MST1/2抑制剂XMU-MP-1 (5、10μmol·L^(-1))刺激HuH-7细胞,用Sal B(50μmol·L^(-1))处理HuH-7细胞。用CCK-8和EdU检测细胞增殖情况,用细胞划痕实验检测细胞迁移情况,用免疫荧光染色法检测YAP和TAZ的表达和分布,用Western blot检测p-MST1、MST1、p-YAP、YAP、p-TAZ、TAZ和CTGF的蛋白表达水平。结果 Sal B抑制了TGF-β1或XMU-MP-1刺激的HuH-7细胞的增殖。同时,Sal B抑制了TGF-β1刺激的HuH-7细胞的迁移。值得注意的是,与XMU-MP-1对HepG2细胞迁移能力的促进作用不同,XMU-MP-1在本实验中不能明显促进HuH-7细胞的迁移。此外,Sal B可上调p-MST1、MST1、p-YAP、p-TAZ的蛋白表达,降低YAP、TAZ、CTGF的表达。结论 Sal B抑制HuH-7细胞的作用可能与激活Hippo/YAP信号通路有关。

miR-144-3p通过靶向FZD4阻断Wnt/β-catenin通路抑制肝癌Huh-7细胞的恶性生物学行为

目的:探讨miR-144-3p通过阻断卷曲受体4(FZD4)/Wnt/β-catenin信号通路对肝癌Huh-7细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其作用机制。方法:收集2012年3月至2017年7月在柳州市工人医院手术切除的18例肝癌患者的癌组织及相应的癌旁组织标本,以及肝癌细胞系Huh-7、SMMC7721和MHCC97和人正常肝上皮细胞株THLE-3,用qPCR检测肝癌组织及细胞系中miR-144-3p的表达水平。将miR-144-3p mimics/inhibitor和FZD4敲降载体转染至Huh-7细胞中,用CCK-8、Transwell、划痕愈合实验和Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测Huh-7细胞的增殖、迁移和凋亡水平。用双荧光素酶报告基因验证miR-144-3p和FZD4的靶向关系。结果:在肝癌组织和细胞系中miR-144-3p均呈低表达(P<0.05或P<0.01)。过表达miR-144-3p可显著抑制Huh-7细胞增殖、迁移并诱导细胞凋亡(均P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证明miR-144-3p靶向作用FZD4并下调其表达水平。体外实验进一步证实,过表达miR-144-3p靶向FZD4并阻断Wnt/β-catenin通路,进而抑制Huh-7细胞增殖、迁移和促进细胞凋亡(均P<0.01)。结论:miR-144-3p通过阻断FZD4/Wnt/β-catenin通路抑制肝癌Huh-7细胞的恶性生物学行为,为肝癌诊断或治疗提供了潜在分子靶点。

肝癌特异性靶标致敏DC诱导CIK细胞对肝癌HuH-7细胞及移植瘤的抑制

目的:观察负载肝癌特异性DC靶标的树突状细胞(dendritic cell,DC)与细胞因子诱导的杀伤(cytokine-induced killer cell,CIK)细胞共培养后对肝癌细胞HuH-7的杀伤作用以及对裸鼠肝癌移植瘤的治疗效果。方法:外周血单个核细胞经不同细胞因子作用后培养成DC和CIK细胞。分别利用肝癌特异性DC靶标和肝癌HuH-7细胞冻融抗原刺激DC,ELISA法测定其对DC IL-12分泌的影响。DCHuH-7、DCtarget分别与CIK细胞共培养后,ELISA法检测其对CIK细胞IFN-γ分泌的影响,CCK-8法检测效靶比为10∶1、20∶1、40∶1、100∶1时DCHuH-7-CIK和DCtarget-CIK细胞对HuH-7细胞的杀伤作用。构建HuH-7细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为对照组、CIK组、DCHuH-7-CIK组和DCtarget-CIK组,尾静脉注射细胞悬液,观察效应细胞的抑瘤效果。结果:DCHuH-7与DCtarget的IL-12 p70分泌水平较DC显著升高[(179.33±14.04)、(173.33±6.66)vs(59.33±11.84)pg/ml,均P<0.01];与CIK细胞共培养后,DCHuH-7-CIK与DCtarget-CIK细胞分泌IFN-γ的能力也显著高于DC-CIK细胞(均P<0.01),且DCHuH-7-CIK与DCtarget-CIK细胞之间无显著差异(P>0.05)。在相同效靶比时,DCHuH-7-CIK细胞以及DCtarget-CIK细胞对HuH-7细胞的杀伤活性明显高于单纯CIK细胞(P<0.05),且DCHuH-7-CIK与DCtarget-CIK组之间无显著差异(P>0.05)。DCtarget-CIK细胞对裸鼠肝癌移植瘤的抑制作用与DCHuH-7-CIK细胞相仿,且均显著高于单纯CIK细胞[(78.48±14.58)%、(85.78±15.69)%vs(54.69±28.07)%,均P<0.05],无明显不良反应。结论:肝癌特异性DC靶标能够显著提高CIK细胞对HuH-7细胞及其裸鼠移植瘤的杀伤活性,可替代肝癌组织抗原负载DC。

毛花苷C促进肝癌细胞Huh-7凋亡并增强caspase-7的活化

目的研究毛花苷C对肝癌Huh-7细胞增殖的影响及其对caspase-7的活化作用。方法以不同浓度的毛花苷C作用于Huh-7细胞,通过细胞增殖抑制实验及克隆形成实验,检测毛花苷C对Huh-7细胞增殖的抑制作用;采用流式细胞仪检测其对Huh-7细胞凋亡的影响,并用激光共聚焦显微镜采集细胞凋亡染色图像;通过Western blot分析细胞凋亡蛋白caspase-7的活化水平。结果毛花苷C能明显抑制Huh-7细胞的增殖,实验组与对照组间的差异具有统计学意义(P<0.05),并呈量效依赖关系;通过流式细胞仪与激光共聚焦显微镜,观察到毛花苷C诱导凋亡细胞数增加;Western blot检测结果显示,毛花苷C可增强凋亡相关酶caspase-7的活化水平。结论毛花苷C明显促进肝癌Huh-7细胞凋亡并增强凋亡相关酶caspase-7的活化水平。

抑制素在人肝癌细胞SMMC-7721和Huh-7中的表达及其编码序列扩增

目的检测抑制素在人肝癌细胞SMMC-7721及Huh-7中的基因表达,扩增抑制素全长编码序列。方法分别提取肝癌细胞SMMC-7721及Huh-7细胞总RNA,逆转录合成cDNA。使用Real time PCR,以GAPDH为内参检测抑制素的mRNA表达情况。采用RT-PCR方法扩增抑制素全长编码序列。结果 Real time PCR结果显示,SMMC-7721和Huh-7肝癌细胞株中均有抑制素的表达,且SMMC-7721细胞中抑制素表达量是Huh-7细胞中的6.652倍。RT-PCR方法扩增得到约835 bp的抑制素全长编码序列,条带特异,无非特异性扩增。结论人肝癌细胞株SMMC-7721中抑制素的表达量较高。

稳定抑制PAK2蛋白表达的HUH-7细胞株的建立

目的为研究细胞周期相关因子PAK2在原发性肝癌中的作用,拟用shRNA干扰技术建立稳定抑制PAK2蛋白表达的HUH-7肝癌细胞系。方法用基因转染技术将人PAK2的3个shRNA片段分别克隆至慢病毒载体pHBLV-U6-ZsGreen-Puro,包装成病毒后利用脂质体将载体病毒转染至HUH-7细胞,利用G418筛选稳定表达shRNA的细胞。利用Real-time PCR和Western blotting方法分别鉴定转染细胞内PAK2的RNA及蛋白表达水平。结果sh1-PAK2 HUH-7、sh2-PAK2 HUH-7和sh3-PAK2病毒载体均可转染至HUH-7细胞系,且转染效率较高(>80%)。Real time-PCR结果显示,与对照组sh-cont比较,转染sh1-PAK2、sh2-PAK2和sh3-PAK可明显抑制HUH-7细胞内PAK2-mRNA的表达,差异均有统计学意义(均P<0.05),其中sh2-PAK2和sh3-PAK2的干扰效果尤为明显,下调效率分别达68%和89%。Western blotting结果显示,转染sh3-PKA2细胞内PAK2的蛋白表达量较对照组sh-cont明显下调,其表达量为对照组sh-cont的14.4%。结论稳定抑制PAK2基因表达的肝癌细胞系shPAK2 HUH-7的建立为PAK2在肝癌细胞中的作用机制研究奠定细胞基础。

CCR7对Huh-7肝癌细胞系增殖和侵袭的影响

目的探讨CCR7对肝细胞肝癌转移的影响。方法构建siRNA-CCR7载体,稳定转染表达CCR7的肿瘤细胞株Huh-7,用MTT法检测沉默CCR7基因对Huh-7肝癌细胞系增殖的影响,通过趋化侵袭实验检测其对肿瘤细胞株Huh-7趋化、侵袭能力的影响。结果通过抑制Huh-7细胞CCR7的表达,稳定转染siRNACCR7能有效抑制Huh-7细胞的增殖,并能抑制CCL21刺激的趋化和侵袭能力。结论沉默CCR7基因能有效抑制肝癌细胞增殖和侵袭性。

靶向CD24分子3E10增强肝癌HuH-7细胞的化疗敏感度

目的探讨靶向分子CD24单克隆抗体3E10调节肝癌HuH-7细胞对化疗药顺铂敏感度的作用及其分子机制。方法 Western blot和流式细胞术检测抗CD24抗体3E10的特异性;Annexin V-FITC/PI双染色检测细胞凋亡;Real-time PCR和Western blot检测耐药基因和肿瘤干细胞特性基因的表达水平;Western blot检测JAK/STAT3和PI3K/AKT信号通路的活性水平。结果 3E10可有效识别CD24蛋白及HuH-7细胞。3E10显著增强HuH-7细胞对顺铂的敏感度(P<0.05),抑制率由(10.3±3.0)%提高至(34.4±10.8)%。3E10显著降低HuH-7细胞耐药基因ABCB1、ABCB5、ABCC1和肿瘤干性基因NANOG、CD24的表达水平及干性基因β-catenin的磷酸化水平(P<0.05)。3E10显著降低STAT3和AKT的磷酸化水平(P<0.05)。结论靶向CD24分子3E10通过降低HuH-7细胞的耐药性、肿瘤干性和JAK/STAT3、PI3K/AKT信号通路活性来增强HuH-7细胞对化疗药顺铂的敏感度。

HSV-tk联合GCV自杀系统对肝癌细胞株Huh-7杀伤作用的研究

单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpessi mplex virus-thymidine kinase,HSV-tk)基因,是目前研究比较多的自杀基因,其与前体药物丙氧鸟苷(ganciclovir,GCV)构成HSV-tk/GCV自杀基因系统。本实验将携带HSV-tk基因的慢病毒转染Huh-7细胞,通过报告基因反映慢病毒的转染效率;基因组PCR及RT-PCR检测转染Huh-7细胞中的HSV-tk基因的整合及表达;MTT检测不同浓度药物处理后的细胞存活率;最后HSV-tk+与HSV-tk-的Huh-7细胞以不同比例混合,MTT测定GCV作用后细胞的存活率。结果表明,HSV-tk/GCV系统作用于Huh-7细胞后,细胞出现明显的凋亡现象,旁观者效应比较明显。

Mithramycin A对肝癌细胞Huh-7增殖的影响

目的研究抗肿瘤抗生素光辉霉素(Mithramycin A,MIT)对人肝癌细胞Huh-7的作用。方法CCK-8比色法观察MIT对Huh-7细胞的生长抑制作用,Hoechst 33342/PI双荧光染色分析细胞凋亡,流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡率。结果MIT可抑制Huh-7细胞的生长,半数抑制浓度(IC50)为60.12 nmol.L-1。荧光显微镜观察可见细胞凋亡特征性改变;浓度为5×10-2μmol.L-1的MIT作用72 h后,可明显诱导Huh-7细胞凋亡,流式细胞仪检测肿瘤细胞出现典型亚二倍体凋亡小峰。结论MIT对Huh-7细胞有明显的诱导凋亡和生长抑制作用,具有浓度、时间依赖性。

GPC3-siRNA真核质粒载体的构建及Huh-7细胞转染

目的探讨GPC3-siRNA真核质粒载体构建并转染Huh-7细胞的可行性。方法构建真核质粒载体pcDNA3.1+GPC3和GPC3-siRNA-1633,采用脂质体法瞬时转染至Huh-7细胞中。MTT法检测转染后Huh-7细胞的细胞活性,荧光定量PCR、Western blot分别检测GPC3 mRNA和蛋白表达。结果 GPC3-siRNA-1633基因和GPC3真核质粒载体转染Huh-7细胞后细胞存活率高,转染GPC3-siRNA-1633的Huh-7细胞出现GPC3 mRNA和蛋白表达下调。结论 GPC3-siRNA-1633可成功转染至Huh-7细胞,并抑制GPC3表达。

HIV-1 Tat真核表达载体的构建及在Huh-7细胞中表达

目的构建1型人类免疫缺陷病毒(HIV-1)反式激活因子(Tat)基因真核表达质粒,并研究该质粒在真核细胞中的有效表达。方法以含有HIV-1全长基因的质粒pNL4-3为模板,通过PCR扩增HIV-1tat第一外显子,应用基因工程技术将扩增的基因片段插入真核表达质粒pCDNA3.1(+),构建重组真核表达质粒pCDNA3.1-tat,经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,应用脂质体转染技术转染入人体肝癌细胞系Huh-7细胞。RT-PCR检测其基因转录情况,Westernblot鉴定其是否能够表达相应的目的蛋白质。结果成功扩增了Tat基因,酶切和测序证明正确构建了重组真核表达质粒pCDNA3.1-tat,RT-PCR和Westernblot方法证实该质粒能在Huh-7真核细胞中有效表达HIV-1Tat目的蛋白质。结论成功构建了HIV-1Tat基因的真核表达质粒载体,并在Huh-7细胞中表达,为在Huh-7细胞模型中研究Tat的功能奠定了基础。

虎杖苷上调miR-877-5p抑制肝癌Huh-7细胞增殖、迁移及侵袭

目的探讨虎杖苷对肝癌Huh-7细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其可能作用机制。方法体外培养人肝癌细胞Huh-7,随机分组:对照组、低剂量虎杖苷组、中剂量虎杖苷组、高剂量虎杖苷组;应用克隆形成实验、CCK-8法、划痕实验与Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移及侵袭;q RT-PCR法检测肝癌组织、癌旁组织与Huh-7细胞中miR-877-5p的表达量;E-cadherin、N-cadherin蛋白含量由Western blot法检测。结果相较于对照组,虎杖苷剂量依赖性的抑制细胞克隆形成数(分别为103.58±9.23、50.89±4.08,F=103.107,P=0.000),并通过促进E-cadherin蛋白表达(分别为0.16±0.02、0.55±0.05,F=187.778,P=0.000)抑制N-cadherin蛋白表达(分别为0.67±0.05、0.23±0.02,F=203.048,P=0.000)抑制细胞迁移(分别为71.96±5.94、28.12±2.54,F=164.192,P=0.000)和侵袭(分别为123.45±12.11、59.56±5.35,F=97.705,P=0.000);此外,虎杖苷刺激组细胞高表达miR-877-5p(分别为1.00±0.00、2.96±0.24,F=250.276,P=0.000),且成剂量依赖性。肝癌组织中miR-877-5p的表达量相较于癌旁组织显著降低(分别为1.00±0.08、0.32±0.03,t=55.712,P=0.000);miR-877-5p过表达相较于对照组被证实抑制肝癌细胞细胞克隆形成数(分别为108.41±11.37、59.33±5.12,t=11.808,P=0.000)、侵袭(分别为122.77±10.81、64.46±5.94,t=14.182,P=0.000)及迁移能力(分别为72.12±5.58、34.56±3.17,t=17.558,P=0.000);相较于虎杖苷+anti-miR-NC组,敲低虎杖苷刺激的肝癌细胞中miR-877-5p的表达可以逆转虎杖苷诱导的细胞克隆形成数(分别为48.52±4.50、89.23±7.88,t=13.459,P=0.000)、迁徙(分别为26.88±2.54、59.43±5.17,t=16.952,P=0.000)和侵袭抑制(分别为55.07±4.58、104.03±10.15,t=13.190,P=0.000)。结论虎杖苷可通过上调miR-877-5p表达而破坏肝癌细胞增殖、迁移及侵袭能力。

外源抗病毒基因沉默补偿性提高Huh-7细胞克隆HCV复制容许性

HCV在野生型人肝细胞瘤Huh-7细胞中复制效率低，但能在某些Huh-7细胞亚克隆中大量复制。我们在前面的研究中证明抑制HCV复制的细胞转录因子cAMP应答原件结合蛋白3样因子1的沉默允许HCV在Huh7细胞亚克隆HRP1细胞中的复制。

白英生物碱对人肝癌Huh-7细胞p38和Caspase-3表达的影响

目的探讨白英生物碱对人肝癌Huh-7细胞增殖和凋亡的影响。方法 MTT法检测白英生物碱对Huh-7细胞增殖的影响,流式细胞术检测白英生物碱对人肝癌Huh-7细胞凋亡率的影响,蛋白印迹方法检测白英生物碱作用后细胞内凋亡相关蛋白的表达。结果白英生物碱能够抑制Huh-7细胞增殖,诱导Huh-7细胞凋亡,激活p38和Caspase-3蛋白。结论白英生物碱能诱导Huh-7细胞凋亡,其机制与调控p38和Caspase-3蛋白有关。

延龄草总皂苷通过促进人β防御素2(HBD-2)的表达抑制HuH-7细胞侵袭和迁移

目的探讨延龄草总皂苷调控人β防御素2(HBD-2)对HuH-7细胞侵袭和迁移的影响和机制。方法采用(0.5、1.0、2.0、4.0)mg/L延龄草总皂苷处理HuH-7细胞,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,TranswellTM小室测定细胞侵袭和迁移能力,Western blot法检测细胞中HBD-2、基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9的蛋白水平。将HBD-2小干扰RNA(siRNA)转染至HuH-7细胞中,用延龄草总皂苷处理,实时定量PCR和Western blot法验证干扰效果,TranswellTM法分别检测细胞侵袭和迁移能力。结果除0.5 mg/L延龄草总皂苷对HuH-7细胞增殖无影响外,其他各剂量延龄草总皂苷均可抑制HuH-7细胞增殖。(0.5、1.0)mg/L的延龄草总皂苷处理均可下调细胞MMP2、MMP9蛋白水平、增加HBD-2蛋白水平并抑制细胞侵袭和迁移。HBD-2 siRNA转染可明显降低HuH-7细胞HBD-2水平。下调HBD-2提高延龄草总皂苷处理的HuH-7细胞侵袭和迁移能力并增加细胞MMP2、MMP9蛋白水平。结论延龄草总皂苷通过促进HBD-2表达抑制HuH-7细胞侵袭和迁移。

右美托咪定对人肝癌Huh-7细胞增殖和迁移的影响

目的探讨右美托咪定对人肝癌Huh-7细胞增殖和迁移的影响及其潜在机制。方法实验分成细胞和动物两部分。首先,将人肝癌Huh-7细胞随机分为6组:对照组(CON组)、0.1 nmol/L右美托咪定组(D1组)、1 nmol/L右美托咪定组(D2组)、10 nmol/L右美托咪定组(D3组)、氧糖剥夺/复氧复糖组(OGD/R组)、右美托咪定+氧糖剥夺/复氧复糖组(D+OGD/R组)。采用MTT比色法检测细胞活性,Western blot测定SIRT1的蛋白表达量;采用Transwell法检测细胞迁移能力。其次,将SPF级BALB/c-nu雄鼠6只,随机分为对照组(CON组)和右美托咪定组(DEX组)。皮下种植Huh-7细胞,DEX组裸鼠注射右美托咪定(5 mg/kg),CON组注射相应体积的生理盐水,连续6 d,种瘤30 d后处死裸鼠,取出瘤体,计算肿瘤体积。结果右美托咪定可以促进Huh-7细胞的细胞活力及迁移能力,减轻因OGD/R造成的损伤,同时增加SIRT1的表达。而右美托咪定对裸鼠肿瘤的体积无明显影响。结论右美托咪定可以增强人肝癌Huh-7细胞株的增殖和迁移能力,这种作用可能是通过上调SIRT1表达来完成。

Cofilin-1慢病毒载体的构建及其在Huh-7中的过表达

目的构建Cofilin-1过表达的Huh-7细胞株。方法应用RT-PCR克隆出Cofilin-1的完整编码序列,将其亚克隆到慢病毒载体pWPT中,构建慢病毒载体表达质粒pWPT-Cofilin-1;将慢病毒表达质粒pWPT-Cofi-lin-1或pWPT-GFP与慢病毒包装质粒pMD2.G、psPAX2共转染293T细胞,获得携带Cofilin-1完整编码序列的慢病毒和携带GFP基因的慢病毒,将两种慢病毒分别感染Huh-7细胞;通过Real-TimePCR和Western blot检测Huh-7细胞中的Cofilin-1的过表达情况。结果测序结果显示成功构建重组慢病毒表达质粒pWPT-Cofilin-1;慢病毒有效感染Huh-7细胞,依据GFP绿色荧光可测定感染有效率超过95%;Cofilin-1在Huh-7细胞中的mRNA量和蛋白水平都成功的过表达。结论本实验的完成,为进一步研究Cofilin-1基因在肝癌中的生物功能和作用机制奠定了基础。

ATRA联合奈达铂对人肝癌细胞株Huh-7增殖与凋亡的影响

目的:探讨化疗药物全反式维甲酸(ATRA)与奈达铂(nedaplatin)单独及联合应用对人肝癌细胞株Huh-7增殖与凋亡的影响.方法:选取不同浓度的ATRA(1×10-4、1×10-5、1×10-6mol/L)、奈达铂(1、2、5mg/L)并选用ATRA1×10-5mol/L联合不同浓度奈达铂(1、2、5mg/L)分别作用于肝癌细胞24、48、72h;另外,通过预实验筛选有效终浓度的ATRA(1×10-5mol/L)+奈达铂(1mg/L)作为联合处理组作用于肝癌细胞24、48、72h;采用倒置显微镜观察细胞形态学改变,MTT法观察ATRA、奈达铂及两药联合对Huh-7细胞增殖的影响;应用流式细胞仪分析其对细胞凋亡率的影响.结果:不同浓度的ATRA(1×10-4、1×10-5、1×10-6mol/L)和奈达铂(1、2、5mg/L)单独作用于Huh-7细胞均有明显的抑制作用,该作用随时间的延长、浓度的增加而逐渐增强(P<0.01);两药联合表现为协同作用,与单药相比具有显著性差异(P<0.01).Huh-7细胞经ATRA1×10-5mol/L、NDP1mg/L及两药联合作用48h后,流式细胞仪检测凋亡凋亡率分别为28.49%±0.6%,42.57%±1.03%,55.35%±1.30%,单药组与联合组比较具有显著性差异(均P<0.01).提示ATRA(1×10-5mol/L)+奈达铂(1mg/L)联合作用时具协同效应.结论:ATRA与奈达铂对人肝癌细胞株Huh-7均有抑制增殖和促进凋亡的作用,且与单药比较,ATRA联合奈达铂能够明显提高肝癌细胞对化疗的敏感性.

低浓度二甲双胍对肝癌细胞株Huh-7迁移、侵袭能力的影响及其机制

目的观察低浓度二甲双胍对肝癌(HCC)细胞株Huh-7细胞迁移、侵袭能力的影响,并探讨其机制。方法取对数生长期的Huh-7细胞,分别加入1、0 mmol/L二甲双胍干预(分别记为观察组和对照组),采用划痕实验评估二甲双胍对细胞迁移能力的影响,细胞侵袭实验评估二甲双胍对细胞侵袭能力的影响,葡萄糖代谢芯片评估二甲双胍对细胞PDK4 mRNA表达的影响,免疫印迹实验分析二甲双胍对细胞PDK4蛋白表达的影响。结果观察组干预24、48 h细胞迁移率分别为40.14%±2.40%、84.02%±3.85%,对照组分别为100.00%±0.00%、170.10±7.48%,两组比较,P均<0.05。观察组干预24 h细胞侵袭数为(183.20±17.13)个,对照组为(403.60±17.31)个,两组比较,P<0.05。观察组及对照组PDK4 mRNA相对表达量分别为1±0.01、1.84±0.01,两组比较,P<0.05。观察组及对照组PDK4蛋白相对表达量分别为0.53±0.01、0.44±0.01,两组比较,P<0.05。结论二甲双胍能抑制HCC Huh-7细胞的迁移和侵袭,机制可能与其可调控PDK4蛋白表达有关。