HPV-16E7、Rb、p16蛋白在宫颈鳞状细胞癌中的表达及其意义

目的：探讨HPV-16E7、Rb、p16蛋白在宫颈鳞状细胞癌中的表达及其相互关系。方法：利用过氧化酶标记的链霉卵白素（SP）染色法，检测58例宫颈鳞状细胞癌中的HPV-16E7、Rb、p16蛋白表达。结果：在58例宫颈鳞状细胞癌中，HPV－16E7、Rb和p16阳性表达率分别为879％（51／58）、34．5％（20／58）和81．0％（47／58）。在50例Rb蛋白阴性和弱阳性表达的宫颈鳞状细胞癌组织中，HPV－16E7和p16为过度表达，Rb与HPV－16E7、p16呈相关关系（P＜0.01）；HPV－16E7与p16呈正相关关系（P＜0，05）。Rb、p16表达与临床分期有关，Rb阳性表达随着临的升高而减弱，p16阳性表达随临床分期升高而增强。结论：宫颈鳞状细胞癌的发生与Rb阴性和弱表达，p16、HPV－16E7过度表达有关；检测Rb、p16、HPV-16E7表达水平，对于宫颈鳞状细胞癌的临床早期诊断具有一定的参考价值。

人胃癌细胞株Rb抗癌基因缺失的研究

以Ｒｂ基因ｃＤＮＡ３．８Ｋｂ片段做探针，经非放射性地高辛—ｄＵＴＰ及放射性同位素α－３２Ｐ－ｄｃＴＰ两种标记方法标记，对６株人胃癌细胞株的ＤＮＡ进行点杂交和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交，显示５株细胞Ｒｂ基因完全缺失，１株不全缺失伴突变。

9-顺维A酸诱导肺癌细胞L78凋亡及其与Rb和Cyclin D_1基因表达的关系

目的 研究 9-顺维 A酸 (9- cis- retinoic acid,9- cis RA)诱导肺鳞癌细胞株 L 78凋亡作用及其与 Rb、Cy-clin D1 基因表达的关系 ,初步探讨其作用机制。 方法 体外培养肺鳞癌细胞株 L78,随机分为两组 ,实验组 :加入浓度为 5 μmol/ L 的 9- cis RA;对照组 :加入浓度为 0 .1%二甲亚砜。两组均培养 4 8小时后用免疫组织化学法检测 L78细胞中 Rb基因表达率 ,用流式细胞仪技术分别检测 Rb、Cyclin D1 基因表达率和肿瘤细胞凋亡率 ,并研究三者之间的相关关系。 结果 实验组肺鳞癌细胞株 L78细胞 Rb基因表达明显增强 ,Cyclin D1 基因表达降低 ,细胞凋亡率增高(P<0 .0 1)。 Rb基因表达率与细胞凋亡发生率呈正相关 (r=0 .85 4 ,P<0 .0 5 ) ,Cyclin D1 基因表达率与细胞凋亡发生率呈负相关 (r=- 0 .812 ,P<0 .0 5 )。 结论 9- cis RA可能通过 Rb基因表达增强和 Cyclin D1 基因表达降低途径 ,使细胞明显阻滞在 G0 / G1 期 ,并诱导肺鳞癌细胞株 L 78细胞凋亡。

人喉鳞癌组织中HPV16E7、CyclinD1和Rb蛋白的表达

目的:探讨喉鳞癌组织中人乳头瘤病毒(HPV)16型E7、CyclinD1和Rb蛋白表达的变化。方法:采用免疫组织化学SABC法检测80例喉鳞癌、30例声带息肉组织中HPV16E7、CyclinD1和Rb蛋白的表达状况。结果:声带息肉组织中HPV16E7未见表达,喉鳞癌组织中的表达率为34/80(P<0.0001);声带息肉与喉鳞癌组织中Cy-clinD1的表达率分别为2/30和42/80(P<0.0001),Rb的表达率分别为25/30和42/80(P<0.05)。HPV16E7与CyclinD1的表达与临床分期、淋巴结转移情况和5a生存率有关(P<0.05或0.01)。喉鳞癌组织中HPV16E7与Rb的表达相关(P<0.01)。结论:HPV16感染和Rb、CyclinD1的异常表达与喉鳞癌发生、发展有关。HPV16E7与CyclinD1可作为判定喉鳞癌预后的指标。

大蒜素对人视网膜母细胞瘤细胞中PDCD5表达的影响

目的探讨大蒜素对人视网膜母细胞瘤(Rb)细胞的抑制作用及其对程序化细胞死亡因子5(PDCD5)表达的影响。方法分别用不同质量浓度的大蒜素、顺铂及大蒜素和顺铂联合处理人Rb细胞,在作用24、48、72h后观察Rb细胞的形态,并应用免疫细胞化学法检测不同处理条件下各时间点PDCD5的表达情况。结果人Rb细胞在不同质量浓度大蒜素、顺铂以及大蒜素和顺铂联合作用下,细胞生长受到抑制。不同质量浓度的大蒜素均可以上调人Rb细胞中PDCD5的表达,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。随着大蒜素作用时间的延长,PDCD5的表达依次上升。大蒜素(15μg/mL)和顺铂(3μg/mL)联合用药可增强对人Rb细胞的生长抑制,与单独用药比较,上调PDCD5表达的作用差异有统计学意义(P<0.05)。结论Rb细胞中存在与细胞凋亡有关的PDCD5蛋白低表达。大蒜素可抑制人Rb细胞的生长,且抑制作用具有时间和质量浓度依赖性。大蒜素和顺铂联合用药作用强于单独用药,可提高药物对肿瘤细胞的生长抑制。

人乳头瘤病毒感染与非小细胞肺癌发生的相关性

目的初步探讨人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)感染与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)发生的相关性.方法用通用型引物PCR检测60例NSCLC和30例肺良性病变组织中HPV的感染率;用分型引物对阳性标本进行HPV16,18分型.用免疫组化方法检测 P53及Rb蛋白在肺癌组织中的表达.结果 60例NSCLC及30例良性病变组织中HPV的检出率分别为21例(35.0%)和1例(3.3%),二者差异具有显著性意义 (P<0.05).肺鳞癌HPV感染率(48.6%)显著高于肺腺癌(13.0%)(P<0.05),早期(Ⅰ期)肺癌HPV感染率(48.6%)显著高于进展期(Ⅱ～Ⅲ期,18.5%)(P<0.05),吸烟组HPV感染率(47.4%)显著高于非吸烟组(13.6%)(P<0.05).60例肺癌组织中34例P53蛋白阳性(56.7%),42例Rb蛋白阳性(70%),二者的表达在HPV感染阳性组和阴性组无显著性差异.结论 HPV感染在NSCLC的发生中可能起到一定的作用.

人参皂苷Rg1诱导人红白血病K562细胞株衰老与p16-Rb信号通路的相关性

目的探讨人参皂苷Rg1(以下简称Rg1)诱导人红白血病K562细胞株衰老与p16-Rb信号通路的相关性。方法以不同浓度的Rg1(0、5、10、20、40和80μmol/L)作用于K562细胞不同时间(24、48、72 h),MTT法筛选Rg1抑制K562细胞增殖的最佳作用浓度及作用时间,以该浓度干预K562细胞不同时间,流式细胞术检测细胞的细胞周期;以最佳浓度Rg1干预K562细胞最佳时间,集落培养法检测细胞集落形成能力;衰老相关-β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测阳性细胞百分率;透射电镜观察细胞的超微结构;Southern blot检测细胞的端粒长度;Western blot检测细胞中P16和RB蛋白的表达。结果 Rg1在体外可明显抑制K562细胞增殖,其最佳作用浓度及作用时间分别为20μmol/L和48 h;经20μmol/L Rg1诱导48 h的K562细胞与常规培养对照组相比,细胞出现G2/M期阻滞(P<0.05),集落形成能力明显减弱(P<0.05),SA-β-Gal染色阳性率增加(P<0.01),细胞体积增大,且溶酶体,线粒体体积增大,数目增多,端粒缩短加速(P<0.05),P16和RB蛋白表达上调(P<0.05)。结论 Rg1能诱导人红白血病K562细胞株衰老,可能与Rg1激活了p16-Rb信号通路有关。