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HPV L1共同保守序列多肽对多价性HPV阳性临床标本的检测 被引量:7
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作者 姜波玲 肖长义 叶红 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期864-868,共5页
目的:证实HPV16 L1 C-末端448-477氨基酸序列多肽所诱导的免疫抗血清能够与多种型别HPV L1发生反应。方法:人工合成HPV L1共同保守序列短肽,用该合成短肽免疫动物获得抗短肽多克隆抗血清。用PCR方法对宫颈癌、尖锐湿疣等临床标本进行HP... 目的:证实HPV16 L1 C-末端448-477氨基酸序列多肽所诱导的免疫抗血清能够与多种型别HPV L1发生反应。方法:人工合成HPV L1共同保守序列短肽,用该合成短肽免疫动物获得抗短肽多克隆抗血清。用PCR方法对宫颈癌、尖锐湿疣等临床标本进行HPV型别鉴定,然后用ELISA、Western印迹、免疫组织化学3种方法检验已获得的抗HPV短肽血清抗体能否与多型别HPV阳性临床标本进行反应。结果:在ELISA实验中,HPV6,11,16,18型及其他型阳性的临床标本的抗原抗体反应均为阳性;Western印迹实验中,HPV各型别阳性的临床标本均在56×103处出现显色条带,而阴性标本没有;免疫组织化学结果发现,不同病变性质的组织反应各有特征,阳性反应仅出现于上皮之内,呈区域性,有明显界限。结论:证实了本研究寻找到的HPV L1共同保守序列确实含有HPV L1 B-细胞共同表位,其免疫形成的抗血清能与多型别HPV L1发生反应。这一发现对今后研制广谱HPV L1疫苗或广谱检测试剂盒具有重要的启示作用。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 乳头瘤病毒 免疫血清 诊断试验 常规 表位
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利用ELISA技术评估尘螨变应原的稳定性 被引量:1
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作者 李文 赖荷 +2 位作者 赵绮华 王锡忠 刘永平 《广西医学》 CAS 2006年第5期634-635,共2页
目的检测尘螨变应原的稳定性。方法利用ELISA技术检测在37℃处理后尘螨变应原的稳定性。结果尘螨变应原溶液在37℃处理6d后,利用人抗血清可以检测到其活性下降,而使用兔抗血清时尘螨抗原生物活性的变化在37℃处理45d后仍未检测到。结论... 目的检测尘螨变应原的稳定性。方法利用ELISA技术检测在37℃处理后尘螨变应原的稳定性。结果尘螨变应原溶液在37℃处理6d后,利用人抗血清可以检测到其活性下降,而使用兔抗血清时尘螨抗原生物活性的变化在37℃处理45d后仍未检测到。结论尘螨变应原的稳定性应利用IgE抗体来检测,表明尘螨变应原的生物活性在37℃处理45d的过程中逐渐下降。 展开更多
关键词 尘螨 变应原 酶联免疫吸附试验 兔抗血清 人抗血清
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补阳还五汤含药血清对人脑微血管内皮细胞增殖和迁移的影响 被引量:3
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作者 叶淑静 孙斯琪 +3 位作者 李琳 方燕 杨琰 储利胜 《浙江中西医结合杂志》 2016年第10期887-889,F0003,共4页
目的观察不同浓度补阳还五汤(BYHWD)含药血清对人脑微血管内皮细胞(HBMECs)增殖和迁移影响。方法补阳还五汤灌胃SD大鼠后腹主动脉取血,制备含药血清;体外培养人脑微血管内皮细胞(HBMECs),随机分为空白组(正常大鼠血清)及补阳还五汤含药... 目的观察不同浓度补阳还五汤(BYHWD)含药血清对人脑微血管内皮细胞(HBMECs)增殖和迁移影响。方法补阳还五汤灌胃SD大鼠后腹主动脉取血,制备含药血清;体外培养人脑微血管内皮细胞(HBMECs),随机分为空白组(正常大鼠血清)及补阳还五汤含药血清组,血清浓度分为5%、10%和20%3个浓度,共6组;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测HBMECs增殖;细胞划痕法检测HBMECs迁移的相对距离。结果与空白组比较,5%、10%和20%含药血清均显著促进HBMECs增殖,差异有统计学意义(0.71±0.03比0.65±0.03、0.84±0.05比0.75±0.03、0.71±0.05比0.67±0.05,P<0.05);与10%含药血清组比较,5%含药血清组和20%含药血清组细胞增殖显著减少,差异有统计学意义(0.71±0.03、0.71±0.05比0.84±0.05,P<0.05)。与空白组比较,各含药血清组细胞迁移的相对距离均显著增加,差异有统计学意义(0.58±0.03比0.50±0.01、0.63±0.03比0.45±0.05、0.53±0.05比0.45±0.04,P<0.05);与10%含药血清组比较,5%含药血清组和20%含药血清组细胞迁移的相对距离显著减小,差异有统计学意义(0.58±0.03、0.53±0.05比0.63±0.03,P<0.05)。结论补阳还五汤含药血清可促进HBMECs增殖和迁移,10%含药血清作用最佳。 展开更多
关键词 人脑微血管内皮细胞 血清 补阳还五汤 增殖 迁移
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冠心合剂对人脐静脉内皮细胞分泌血管生长因子bFGF的影响 被引量:3
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作者 祝光礼 陈铁龙 +2 位作者 方晓江 彭哲 赵丽娟 《浙江中西医结合杂志》 2011年第9期596-598,590,共3页
目的:观察冠心合剂对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分泌血管新生因子bFGF的影响。方法:取SD大鼠40只,随机分为冠心合剂大、中、小剂量和空白组,每组10只,冠心合剂大、中、小剂量组以成人用药剂量的20、10、5倍剂量灌胃,共7天,末次灌胃后各组... 目的:观察冠心合剂对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分泌血管新生因子bFGF的影响。方法:取SD大鼠40只,随机分为冠心合剂大、中、小剂量和空白组,每组10只,冠心合剂大、中、小剂量组以成人用药剂量的20、10、5倍剂量灌胃,共7天,末次灌胃后各组大鼠下腔静脉取血制备含药血清。采用体外培养HUVEC的方法,将HUVEC随机分为冠心合剂大、中、小剂量组、空白对照组和bFGF对照组,加入含药血清24h后,通过MTT法、ELISA法和RT-PCR法观察冠心合剂对HUVEC的增殖率、bFGF含量及bFGF mRNA表达的影响。结果:冠心合剂大剂量组HUVEC增殖率、bFGF含量及bFGFmRNA表达量与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),但其作用不及bFGF对照组(P<0.05)。结论:冠心合剂能提高HUVEC增殖率,增加bFGF含量,促进bFGFmRNA表达,进而促进血管新生。 展开更多
关键词 冠心合剂 人脐静脉内皮细胞 含药血清 血管新生 BFGF
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孕妇血清和胚胎组织中微小病毒B_(19) DNA的检出 被引量:3
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作者 孟潞英 张文炳 彭华国 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第5期333-335,共3页
作者建立了检测人微小病毒B_(19)(HPV-B_(19))的PCR方法。两对引物(P_1P_2和P_3P_4)的设计均位于编码HPV-B_(19)衣壳蛋白VP_1基因区内,扩增产物分別为700 bp和104 bp。比较P_1P_2-PCR和P_3P_4-PCR,二者均具有高度特异性和敏感性,HPV-B_(... 作者建立了检测人微小病毒B_(19)(HPV-B_(19))的PCR方法。两对引物(P_1P_2和P_3P_4)的设计均位于编码HPV-B_(19)衣壳蛋白VP_1基因区内,扩增产物分別为700 bp和104 bp。比较P_1P_2-PCR和P_3P_4-PCR,二者均具有高度特异性和敏感性,HPV-B_(19) DNA最小检出量分別为5fg和25fg。应用P_1P_2-PCR对32份孕妇血清和21份胚胎组织标本进行了HPV-B_(19) DNA的检测,结果阳性率分別为9.4%和9.5%,首次从DNA水平证实HPV-B_(19)在国内的存在。 展开更多
关键词 微小病毒B19 聚合酶链反应 DNA
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抗人A型红细胞单克隆抗体的研究及其初步应用
6
作者 邹亚伟 郭景元 陈跃龙 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 1993年第1期35-38,共4页
在用人A型红细胞悬液免疫的Balb/c小鼠脾细胞与同系小鼠的骨髓瘤细胞进行融合屡遭失败的情况下,改用实体瘤分离出的骨髓瘤细胞进行融合,终获成功。融合后筛选出分泌盐水凝集抗体的杂交瘤细胞株,即为:3B_2、3H_2、8C_3细胞株。3株抗人A... 在用人A型红细胞悬液免疫的Balb/c小鼠脾细胞与同系小鼠的骨髓瘤细胞进行融合屡遭失败的情况下,改用实体瘤分离出的骨髓瘤细胞进行融合,终获成功。融合后筛选出分泌盐水凝集抗体的杂交瘤细胞株,即为:3B_2、3H_2、8C_3细胞株。3株抗人A型红细胞单克隆抗体3B_2、3H_2、8C_3血清学检验和应用结果表明:3株单抗均可作为血型诊断试剂,可用以取代人源标准血清。 展开更多
关键词 红细胞悬液 单克隆抗体 骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞株 血清学检验 脾细胞 凝集 取代 盐水 研究
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ELISA检测姜片虫病患者抗体的研究
7
作者 陈思礼 袁媛 +3 位作者 陈强 周雨丝 张喜红 刘辉 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期85-87,共3页
研究了姜片吸虫成虫冷浸抗原检测姜片吸虫病患者血清抗体的敏感性和特异性及其在流行病和临床上的应用价值.超声粉碎制备姜片吸虫成虫冷浸抗原.以评价ELISA法检测姜片虫病血清抗体的敏感性、特异性和交叉反应性.按常规ELISA方法操作,目... 研究了姜片吸虫成虫冷浸抗原检测姜片吸虫病患者血清抗体的敏感性和特异性及其在流行病和临床上的应用价值.超声粉碎制备姜片吸虫成虫冷浸抗原.以评价ELISA法检测姜片虫病血清抗体的敏感性、特异性和交叉反应性.按常规ELISA方法操作,目视与酶标仪判断结果.普查2189人中姜片吸虫卵阳性者168例;168例中165例ELISA阳性,ELISA与改良加藤法的阳性符合率98.21%;健康居民血清147份,阳性6份,阳性率4.08%;与血吸虫病交叉阳性为9.38%,肺吸虫病交叉阳性为5.36%.姜片吸虫成虫冷浸抗原1∶3500工作浓度包被酶标板,检测姜片虫病血清抗体具有敏感性高、特异强和交叉反应率低的特点. 展开更多
关键词 姜片吸虫 成虫抗原 酶联免疫吸附试验 血清抗体测定
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血清凝集肿瘤细胞活性及其意义的研究
8
作者 刘广超 翟庆云 +1 位作者 石渊渊 王玉兰 《河南医学研究》 CAS 2001年第2期105-108,共4页
目的 :探讨血清对肿瘤细胞凝集的影响以及血清凝集肿瘤细胞活性测定的意义。方法 :采用体外细胞凝集实验和实验性转移模型等 ,以及以热变性、酶消化和盐析等方法处理血清。结果 :血清诱导促进高转移潜能肿瘤细胞凝集 ,以恶性肿瘤患者血... 目的 :探讨血清对肿瘤细胞凝集的影响以及血清凝集肿瘤细胞活性测定的意义。方法 :采用体外细胞凝集实验和实验性转移模型等 ,以及以热变性、酶消化和盐析等方法处理血清。结果 :血清诱导促进高转移潜能肿瘤细胞凝集 ,以恶性肿瘤患者血清凝集肿瘤细胞活性最高 ,其对恶性肿瘤诊断的灵敏度为 90 6% ,特异性为92 1% ,准确性为 91 3%。糖肽能有效地抑制血清诱导的黑色素瘤B16 细胞凝集及其实验性肺转移。此外蛋白酶及高碘酸处理血清可使血清凝集肿瘤细胞活性极大的降低 ,正常人及良性瘤患者血清活性对热较稳定 ,而恶性肿瘤患者血清活性则比较敏感等。结论 :血清中存在肿瘤细胞凝集因子 ,正常人及良性瘤患者血清中因子可能主要是糖蛋白 ,恶性肿瘤患者血清中的则可能还有少量氨基多糖和凝集素类。血清可能通过诱导肿瘤细胞凝集促进肿瘤转移。此外 ,血清凝集肿瘤细胞活性与肿瘤转移相关 ,其在恶性肿瘤的临床诊断及预后方面可能具有重要的应用价值。 展开更多
关键词 人血清 肿瘤转移 肿瘤细胞凝集 凝集因子
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测定人血吲哚美辛的高效液相色谱法
9
作者 王基平 何小兵 +3 位作者 张蓉 陈西敬 杨劲 黄圣凯 《南京铁道医学院学报》 1993年第4期244-245,249,共3页
采用高效液相色谱法测定人血清中吲哚美辛浓度。色谱柱为SpherisorbC18(5μ,4.6×250mm),流动相为乙腈—水—冰乙酸(54.2V∶45.2V∶0.6V)。检测波长为258nm,用外标法峰高度定量(C=0.001 14H+0.00441,r=0.9993,线性范围:0.125~2.000... 采用高效液相色谱法测定人血清中吲哚美辛浓度。色谱柱为SpherisorbC18(5μ,4.6×250mm),流动相为乙腈—水—冰乙酸(54.2V∶45.2V∶0.6V)。检测波长为258nm,用外标法峰高度定量(C=0.001 14H+0.00441,r=0.9993,线性范围:0.125~2.000μg/ml)。回收率为96.5%~97.1%,日内及日间变异系数均小于6%。本法适用于药代动力学和临床研究。 展开更多
关键词 吲哚美辛 血药浓度 高效液相色谱
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Evaluation of novel decellularizing corneal stroma for cornea tissue engineering applications 被引量:15
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作者 Yi Shao, Lu Yang 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2012年第4期415-418,共4页
AIM:To develop a new decellularization method depended upon the natural corneal structure and to harvest an ideal scaffold with good biocompatibilities for corneal reconstruction.METHODS:The acellular cornea matrix (A... AIM:To develop a new decellularization method depended upon the natural corneal structure and to harvest an ideal scaffold with good biocompatibilities for corneal reconstruction.METHODS:The acellular cornea matrix (ACM) were prepared from de-epithelium fresh porcine corneas (DFPCs) by incubation with 100% fresh human sera and additional electrophoresis at 4℃. Human corneal epithelial cells (HCEs) were used for the cytotoxicity tests of ACM. ACM were implanted into the Enhanced Green Fluorecence Protein (eGFP) transgenic mouse anterior chamber for evaluation of histocompatibility.RESULTS:HE and GSIB4 results showed fresh porcine cornea matrix with 100% human sera and electrophoresis could entirely decellularize stromal cell without reducing its transparency. ACM has no cytotoxic effect ex vivo. Animal test showed there was no rejection for one month after surgery.CONCLUSION:These results provide a decellularizing approach for the study of corneal tissue engineering and had the broader implications for the field of biological tissue engineering in other engineered organ or tissue matrix. 展开更多
关键词 CORNEA human sera ELECTROPHORESIS tissue engineering DECELLULARIZATION BIOCOMPATIBILITY
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化学发光微粒子免疫检测法和实时荧光RT-PCR法检测甲型肝炎病毒的比较分析 被引量:1
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作者 麻丽丹 何平 +5 位作者 王青 李莉 郭雨时 高世光 卢福荣 于洋 《辽宁大学学报(自然科学版)》 CAS 2018年第1期64-70,共7页
目的:比较化学发光微粒子免疫检测法(CMIA)和实时荧光RT-PCR法对218份人血清中甲型肝炎病毒的检测结果.方法:选取2016年8月~2016年11月辽宁省丹东市传染病医院住院患者的血清样本218份,采用CMIA法和实时荧光RT-PCR法检测甲型肝炎病毒,... 目的:比较化学发光微粒子免疫检测法(CMIA)和实时荧光RT-PCR法对218份人血清中甲型肝炎病毒的检测结果.方法:选取2016年8月~2016年11月辽宁省丹东市传染病医院住院患者的血清样本218份,采用CMIA法和实时荧光RT-PCR法检测甲型肝炎病毒,同时对采用实时荧光RT-PCR法的ISO/TS15216-2、FDA-BAM、GB/T 22287-2008三个标准检测甲型肝炎病毒的引物和探针组合进行了比较分析.结果:化学发光微粒子免疫检测法的阳性检出例数为3例,其S/CO值分别为2.22、4.15、1.31.ISO/TS 15216-2、FDA-BAM、GB/T 22287-2008三种实时荧光RT-PCR法的阳性检出例数分别为7例、5例和4例.而CM IA法和实时荧光RT-PCR法有2个阳性样本的检测结果一致,测序的BLAST比对结果表明CM IA法1个阳性样本为假阳性结果,5个CMIA法阴性样本为假阴性结果.结论:ISO方法的实时荧光RT-PCR法用于人血清中甲型肝炎病毒的检测,准确度及灵敏度最佳. 展开更多
关键词 甲型肝炎病毒 人血清 实时荧光RT-PCR法 化学发光微粒子免疫检测法
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从海南省人血清中检出甲属虫媒病毒HYM_1抗体 被引量:1
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作者 徐春华 蒋廉华 +4 位作者 田小东 林立辉 陈唯军 赵春生 陈焕勇 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第5期69-70,共2页
 1995 年, 从海南省立才蚊虫标本中分离到1 株病毒, 编号为 H Y M1 。经理化、生物学性状及血清学鉴定表明 H Y M1 与 M A Y 病毒抗原性相近。应用间接免疫荧光法对海南省部分地区人血清标本共426 份, 进行了抗...  1995 年, 从海南省立才蚊虫标本中分离到1 株病毒, 编号为 H Y M1 。经理化、生物学性状及血清学鉴定表明 H Y M1 与 M A Y 病毒抗原性相近。应用间接免疫荧光法对海南省部分地区人血清标本共426 份, 进行了抗体检测。其中当地人血清标本226 份, 阳性17 份, 阳性率为708 % 。驻海南省部队人血清标本200 份, 阳性1 份, 阳性率为05 % 。 展开更多
关键词 甲病毒 虫媒病毒病 HYM1抗体 血清
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卵母细胞滑面内质网聚集的研究进展 被引量:2
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作者 陈攀宇 方丛 《中华生殖与避孕杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期515-518,共4页
在人类辅助生殖中,经促排卵体外获得的卵母细胞中,有滑面内质网聚集(smooth endoplasmic reticulum aggregate,SERa)形成者占有一定比例。既往研究显示,SERa对胚胎质量及妊娠结局会造成不良影响。但近年来研究显示:SERa卵母细胞可诞生... 在人类辅助生殖中,经促排卵体外获得的卵母细胞中,有滑面内质网聚集(smooth endoplasmic reticulum aggregate,SERa)形成者占有一定比例。既往研究显示,SERa对胚胎质量及妊娠结局会造成不良影响。但近年来研究显示:SERa卵母细胞可诞生完全健康的新生儿。卵母细胞胞质内SERa的形成可能与遗传因素、卵巢过度刺激、超促排卵方案及扳机日高雌二醇(E2)等多种因素相关。大多数学者认为卵母细胞SERa的形成会导致受精率、卵裂率和囊胚形成率降低及胚胎质量的下降,使得妊娠率显著降低;然而,也有多项报道已证实SERa的卵母细胞的胚胎质量与正常卵母细胞并无差异。因此对于那些临床助孕治疗中获得SERa胚胎或者胚胎数目不足的患者,可考虑移植SERa胚胎。未来,应多关注SERa对体外受精(IVF)结局的影响及着重阐明SERa形成机制,从而从根本上防止异常卵母细胞的出现。 展开更多
关键词 滑面内质网聚集(sera) 人卵母细胞 胚胎发育 妊娠结局 研究进展
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三色混合荧光HPV假病毒中和检测系统的建立及评价 被引量:4
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作者 魏双萍 范飞 +9 位作者 陈洁 柳欣林 杨与柔 王致萍 宋硕 李智海 魏旻希 王大宁 李少伟 夏宁邵 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1039-1044,共6页
目的建立三色混合荧光HPV假病毒中和检测系统,并评价其在检测HPV九价疫苗免疫血清免疫原性的应用。方法分别选取红色、绿色和蓝色荧光蛋白的质粒N31-MCHREEY、N31-EGFP和N31-mTagBFP构建HPV6/11/16/18/31/33/45/52/58假病毒,利用双抗... 目的建立三色混合荧光HPV假病毒中和检测系统,并评价其在检测HPV九价疫苗免疫血清免疫原性的应用。方法分别选取红色、绿色和蓝色荧光蛋白的质粒N31-MCHREEY、N31-EGFP和N31-mTagBFP构建HPV6/11/16/18/31/33/45/52/58假病毒,利用双抗夹心法和病毒半数组织培养感染剂量法检测HPV假病毒浓度和感染滴度;利用单色荧光与三色混合荧光HPV16/33/45假病毒,检测HPV九价疫苗免疫小鼠血清的中和滴度,以验证三色混合荧光HPV假病毒系统的准确性;采用单色荧光和三色混合荧光HPV6/11/16/18/31/33/45/52/58假病毒系统检测HPV九价疫苗免疫食蟹猴血清的中和滴度,判断其是否可应用于HPV九价疫苗免疫血清的免疫原性检测。结果含有绿色、红色和蓝色荧光质粒的HPV16型假病毒的浓度为5~6 μg/ml,HPV6/11/18/31/33/45/52/58的三色混合荧光假病毒浓度为1~3 μg/ml。获得了分别含有EGFP、Mcherry和mTagBFP报告基因的9个型别的HPV假病毒,且满足中和检测需要;9个型别单色荧光HPV假病毒的滴度值均在1×104~1×105之间,即它们具有相似的感染滴度。检测HPV九价疫苗免疫的小鼠血清时,单色荧光与三色混合荧光HPV16/33/45假病毒系统所得中和滴度值差异均无统计学意义(P值均〉0.05);检测HPV九价疫苗免疫的食蟹猴血清时,单色荧光与三色混合荧光A、B和C组HPV6/11/16/18/31/33/45/52/58假病毒所得中和滴度值差异均无统计学意义(P值均〉0.05)。结论成功地建立了三色混合荧光HPV假病毒中和检测系统;验证其与单色荧光HPV假病毒系统具有一致性;证实其可应用于检测HPV九价疫苗免疫血清的免疫原性检测中。 展开更多
关键词 疫苗 中和试验 免疫血清 人乳头瘤病毒 三色荧光假病毒
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