目的探讨苯并芘(Benzo[a]pyrene,BaP)作用下的人支气管上皮细胞(16HBE)热休克蛋白70(Heatshock protein 70,Hsp70)和着色性干皮病G蛋白(Xeroderma pigmentosum group G,XPG)表达的时间效应特征,并分析二者之间可能存在的关联性。方法用8...目的探讨苯并芘(Benzo[a]pyrene,BaP)作用下的人支气管上皮细胞(16HBE)热休克蛋白70(Heatshock protein 70,Hsp70)和着色性干皮病G蛋白(Xeroderma pigmentosum group G,XPG)表达的时间效应特征,并分析二者之间可能存在的关联性。方法用8μmol/L BaP处理16HBE细胞0、1、2、4、8、12、24和48 h,以彗星实验检测细胞DNA损伤并以Olive尾矩值(Olive Tail Moments,OTM)评价DNA损伤程度,以Western-blot检测Hsp70和XPG的表达水平,并以激光共聚焦法检测二者的共定位。结果染毒1～2h时OTM值变化率最大,与正常细胞相比,除染毒1h组外其余各组OTM值均显著性增高(P﹤0.01);Hsp70和XPG的表达随染毒时间逐渐增高,12 h时达到峰值,激光共聚焦结果显示BaP染毒细胞后Hsp70和XPG的结合在细胞核内增强。结论在该试验条件下,XPG在执行核苷酸切除修复作用时可能有Hsp70的参与,其具体机制还有待其他实验进一步加以证实。展开更多
[目的]观察苯并(a)芘(BaP)作用下人支气管上皮细胞(16HBE)蛋白表达谱的改变。[方法]以0、1、2、4、8、16、32、64μmol/L的BaP染毒细胞24h,应用双向凝胶电泳和ImageMaster软件分析BaP处理后细胞内蛋白质表达谱的改变,基质辅助激光解吸...[目的]观察苯并(a)芘(BaP)作用下人支气管上皮细胞(16HBE)蛋白表达谱的改变。[方法]以0、1、2、4、8、16、32、64μmol/L的BaP染毒细胞24h,应用双向凝胶电泳和ImageMaster软件分析BaP处理后细胞内蛋白质表达谱的改变,基质辅助激光解吸附电离-飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF)结合数据库检索鉴定差异表达蛋白质斑点。[结果]各浓度染毒组与对照组相比,成功鉴定了17个差异表达蛋白质斑点,其中表达上调的有9种,下调的有8种。这些蛋白质包括细胞骨架蛋白、与能量代谢有关的蛋白、与DNA损伤修复有关的蛋白、肿瘤标志物、伴侣蛋白、与信号转导有关的蛋白和与氧化应激有关的蛋白。[结论]BaP作用于16HBE后导致与细胞损伤、DNA修复、应激、细胞恶性转化等有关的蛋白质表达发生改变。展开更多
文摘[目的]观察苯并(a)芘(BaP)作用下人支气管上皮细胞(16HBE)蛋白表达谱的改变。[方法]以0、1、2、4、8、16、32、64μmol/L的BaP染毒细胞24h,应用双向凝胶电泳和ImageMaster软件分析BaP处理后细胞内蛋白质表达谱的改变,基质辅助激光解吸附电离-飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF)结合数据库检索鉴定差异表达蛋白质斑点。[结果]各浓度染毒组与对照组相比,成功鉴定了17个差异表达蛋白质斑点,其中表达上调的有9种,下调的有8种。这些蛋白质包括细胞骨架蛋白、与能量代谢有关的蛋白、与DNA损伤修复有关的蛋白、肿瘤标志物、伴侣蛋白、与信号转导有关的蛋白和与氧化应激有关的蛋白。[结论]BaP作用于16HBE后导致与细胞损伤、DNA修复、应激、细胞恶性转化等有关的蛋白质表达发生改变。
