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Human Herpes Virus Type 2 ( HSV2 ), Human Cytomegalovirus (HCMV) in the Male Genital Tract and Fertilization
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作者 Courtot Anne Marie Pallier Coralie Testart Jacques 《Journal of Reproduction and Contraception》 CAS 2003年第2期67-79,共13页
The possibility of infection of the human male genital tract by human herpes virus type 2 (HSV2) or human cytomegalovirus (HCMV) is well established and their sexual transmission has been the object of many studies. M... The possibility of infection of the human male genital tract by human herpes virus type 2 (HSV2) or human cytomegalovirus (HCMV) is well established and their sexual transmission has been the object of many studies. Moreover, medically assisted procreation, which helps in numerous fertility problems, raises the question of new viral risks linked to the application of these new technologies. In this review, we shall consider current knowledge in terms of the presence of HSV 2 and HCMV in the different parts of the genital tract of immunocompetent or immunodepressed men. We shall also consider the possibility of viral transmission by the sexual act or by the various techniques used in medically assisted procreation. We shall describe studies in human beings and in animals. 展开更多
关键词 FERTILIZATION human herpes virus type 2 (HSV2) human cytomegalovirus (hcmv) male genital tract medically assisted procreation (MAP)
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HCMV Infection Depress NGF Expression in Human Glioma Cells
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作者 Hai-tao WANG Bin WANG +5 位作者 Zhi-jun LIU Zhi-qiang BAI Ling LI Dong-meng QIAN Zhi-yong YAN Xu-xia SONG 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2009年第3期209-214,共6页
Human cytomegalovirus (HCMV) is the most common cause of congenital infection, resulting in birth defects such as microcephaly. In this study, RT-PCR and Western Blotting were performed to quantify the regulation of... Human cytomegalovirus (HCMV) is the most common cause of congenital infection, resulting in birth defects such as microcephaly. In this study, RT-PCR and Western Blotting were performed to quantify the regulation of endogenic nerve growth factor expression in neuroglia ceils by HCMV infection. The results showed that basal, endogenous NGF expression in U251 was unchanged during early HCMV infection. NGF expression is strongly down-regulated during the latent phase of infection. These results suggest that HCMV can depress the NGF expression in U251 cells. 展开更多
关键词 human cytomegalovirus (hcmv U251 cell Nerve growth factor (NGF)
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重组人巨细胞病毒(HCMV)嵌合肽在毕赤酵母中的表达 被引量:3
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作者 董鲁 谢琪璇 +2 位作者 潘善培 肖銮娟 刘红军 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 2003年第1期73-78,共6页
 目的:在巴斯德毕赤酵母中表达人巨细胞病毒gp52C末端和pp150C末端串联片段的嵌合肽.方法:用SacⅠ和BglⅡ分别酶切CMVp-pPIC9K重组质粒,电打孔法导入毕赤酵母GS115后,在缺组氨酸的MD板上筛选出转化子,然后根据甲醇利用快速型(Mut+)和...  目的:在巴斯德毕赤酵母中表达人巨细胞病毒gp52C末端和pp150C末端串联片段的嵌合肽.方法:用SacⅠ和BglⅡ分别酶切CMVp-pPIC9K重组质粒,电打孔法导入毕赤酵母GS115后,在缺组氨酸的MD板上筛选出转化子,然后根据甲醇利用快速型(Mut+)和甲醇利用缓慢型(Muts)菌株的不同生长特点,筛选出Mut+和Muts型转化子,用PCR法进一步鉴定阳性克隆.分别用甲醇诱导Mut+和Muts型转化子表达目的蛋白4d,取培养产物冻干浓缩,进行SDS-PAGE和Westernblotting,筛选出能特异表达目的蛋白的菌株,分析蛋白的含量及纯度.结果:重组人巨细胞病毒可在甲醇利用快速型毕赤酵母中有效表达,其表达量约占培养上清分泌蛋白的76 5%.结论:重组人巨细胞病毒(HCMV)嵌合肽可在真核细胞毕赤酵母中成功表达. 展开更多
关键词 重组人巨细胞病毒 hcmv 嵌合肽 毕赤酵母 基因表达 基因工程 病毒检测
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孕妇围生期HCMV感染与婴儿先天性疾病关系 被引量:7
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作者 李芬 张剑萍 +3 位作者 李琦 于学文 李学成 任永惠 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1183-1184,共2页
目的探讨孕妇人巨细胞病毒(HCMV)活动性感染对婴儿的近期影响。方法采用ELISA和PCR相结合的方法,采集74例HCMV活动性感染孕妇及50例无HCMV活动性感染孕妇的婴儿血进行HCMV-IgM及HCMV-DNA检测,并对感染婴儿定期随访至生后6个月,追踪其近... 目的探讨孕妇人巨细胞病毒(HCMV)活动性感染对婴儿的近期影响。方法采用ELISA和PCR相结合的方法,采集74例HCMV活动性感染孕妇及50例无HCMV活动性感染孕妇的婴儿血进行HCMV-IgM及HCMV-DNA检测,并对感染婴儿定期随访至生后6个月,追踪其近期预后。结果孕期HCMV活动性感染组的婴儿先天性感染率为36.49%,围产期感染率为45.95%,显著高于孕期无HCMV活动性感染组(P<0.005);HCMV活动性感染孕妇的婴儿中,先天性感染组症状性感染发病率高于围生期感染组(P<0.025);神经系统异常、先天畸形及全身性感染发病例数多于围生期感染组(P<0.05);先天性感染组中,症状性感染婴儿治疗后肝功能恢复、HCMVHCMV-IgM和/或HCMV-DNA转阴率及近期预后比围生期感染组差(P<0.05)。结论孕期HCMV活动性感染与婴儿先天性感染及围生期感染显著相关。孕期HCMV活动性感染引起的先天性感染较围生期感染严重,预后差,故应重视孕期HCMV感染的检测,预防和阻断HCMV先天性感染的发生。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒(hcmv) 先天性疾病 围生期感染 垂直传播
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尿液HCMV DNA检测在儿童HCMV感染中的临床应用 被引量:4
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作者 张华 詹颉 +5 位作者 赵海 苏宝凤 苍金荣 宫艳艳 刘培培 杨瑞雪 《现代检验医学杂志》 CAS 2016年第6期95-97,共3页
目的:对患儿尿液进行 HCMV DNA荧光定量检测并对检测结果进行统计学分析,以了解 HCMV在患儿各年龄段及各种疾病中的感染情况。方法采用荧光定量PCR技术对2014年1月~2015年12月收集的1492份尿液标本进行 HCMV DNA荧光定量分析。结果... 目的:对患儿尿液进行 HCMV DNA荧光定量检测并对检测结果进行统计学分析,以了解 HCMV在患儿各年龄段及各种疾病中的感染情况。方法采用荧光定量PCR技术对2014年1月~2015年12月收集的1492份尿液标本进行 HCMV DNA荧光定量分析。结果新生儿组、婴幼儿组、学龄前组和学龄期组之间的 HCMV DNA检测结果比较差异有统计学意义(χ2=9.253~23.452,P 均<0.01);学龄期组与新生儿组比较差异有非常显著性统计学意义(χ2=23.452,P<0.001)。患儿常见几种疾病组中,肝功能异常组、支气管肺炎组和发热组之间差异无统计学意义(χ2=0.356~0.865,P均>0.05)。肝功能异常组、支气管肺炎组和发热组三组与早产儿组和高胆红素血症组比较差异有统计学意义(χ2=13.231,P均<0.01)。结论新生儿和婴幼儿是人巨细胞病毒感染的高发人群,其中的早产儿和高胆红素血症患儿的 HCMV DNA检出率较高应引起重视;尿液 HCMV DNA检测简便快速,标本留取方便,在婴幼儿 CMV感染的诊断和治疗中具有重要意义。 展开更多
关键词 hcmv DNA 尿液
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对HCMVUL54 mRNA片段特异性切割的M1GS构建 被引量:4
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作者 吕静竹 李弘剑 +4 位作者 陈浩军 李月琴 周天鸿 唐冬生 张欣 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期83-86,共4页
人巨细胞病毒是一种DNA病毒,在人群中一般呈亚临床感染和潜伏感染。为研究病毒基因沉默工具和抗病毒制剂,以人巨细胞病毒UL54基因mRNA序列设计互补的外部引导序列,共价结合到大肠杆菌来源RNaseP催化核心M1RNA上,从而构建成M1GS-T6核酶... 人巨细胞病毒是一种DNA病毒,在人群中一般呈亚临床感染和潜伏感染。为研究病毒基因沉默工具和抗病毒制剂,以人巨细胞病毒UL54基因mRNA序列设计互补的外部引导序列,共价结合到大肠杆菌来源RNaseP催化核心M1RNA上,从而构建成M1GS-T6核酶。通过对DNA聚合酶UL54基因亚克隆片段转录产物体外切割研究,证实该核酶具备对UL54mRNA片段的特异切割能力。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒 UL54基因 RNASE P 外部引导序列
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核酶M1GS-T6对HCMV UL97基因RNA片段体外切割作用 被引量:2
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作者 张欣 李弘剑 +3 位作者 李月琴 何华坤 邹奕 周天鸿 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期327-331,共5页
目的:研究M1GS核酶对HCMV UL97 mRNA的体外切割作用。方法:针对HCMV UL97 mRNA T6位点设计与之互补的引导序列(Guide Sequence,GS),将其共价结合至大肠杆菌核酶P催化亚基(M1 RNA)的3′末端,构建M1GS-T6核酶,并用其对UL97基因亚克隆片段... 目的:研究M1GS核酶对HCMV UL97 mRNA的体外切割作用。方法:针对HCMV UL97 mRNA T6位点设计与之互补的引导序列(Guide Sequence,GS),将其共价结合至大肠杆菌核酶P催化亚基(M1 RNA)的3′末端,构建M1GS-T6核酶,并用其对UL97基因亚克隆片段转录产物进行体外靶向切割实验。结果:核酶M1GS-T6具备特异性切割靶分子UL97mRNA的能力。结论:核酶M1GS-T6具备特异性切割活性,为进一步研究HCMV病毒基因功能和治疗提供了新的途径。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒(hcmv) UL97 核酶P M1GS-T6
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肝炎综合征婴儿HCMV-IgM定量检测的临床价值 被引量:7
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作者 吴冬生 王三男 +1 位作者 王榴红 吴元健 《放射免疫学杂志》 CAS 2010年第5期552-553,共2页
目的:探讨检测肝炎综合征婴儿血清中人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)IgM含量在诊断和动态监测婴儿HCMV感染中的临床意义。方法:ELISA检测了97例肝炎综合征婴儿(婴肝患儿)血清HCMV-IgM含量,并对其中48例HCMV-IgM阳性患儿在治... 目的:探讨检测肝炎综合征婴儿血清中人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)IgM含量在诊断和动态监测婴儿HCMV感染中的临床意义。方法:ELISA检测了97例肝炎综合征婴儿(婴肝患儿)血清HCMV-IgM含量,并对其中48例HCMV-IgM阳性患儿在治疗过程中进行了血清HCMV-IgM定量和肝功能的动态监测。结果:97例婴肝患儿血清HCMV-IgM阳性率为49.48%(48/97),HCMV肝炎患儿治疗前后血清HCMV-IgM定量检测均值分别为(27.7±3.92)、(12.84±2.87)IU/ml,HCMV肝炎患儿治疗后血清HCMV-IgM定量检测值显著下降(t=19.35,P<0.05),并与肝脏转氨酶及总胆红素的下降同步。结论:HCMV感染为婴肝患儿的主要病因,血清HCMV-IgM定量检测有助于婴肝患儿的诊断和婴儿巨细胞病毒性肝炎疗效观察。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒 婴儿 肝炎综合征 酶联免疫吸附试验
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HCMV截短UL83基因真核表达重组体的构建、转染及其免疫效力研究 被引量:2
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作者 高荣保 李艳秋 王明丽 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期451-455,T0001,共6页
为了构建人巨细胞病毒(HCMV)截短UL83基因真核表达重组体,实现其在Hep-2细胞中的稳定表达,研究该截短UL83基因真核表达重组体免疫效力,采用基因重组的方法,将HCMVAD169株截短UL83基因定向克隆到带有绿色荧光蛋白(GFP)作为报告... 为了构建人巨细胞病毒(HCMV)截短UL83基因真核表达重组体,实现其在Hep-2细胞中的稳定表达,研究该截短UL83基因真核表达重组体免疫效力,采用基因重组的方法,将HCMVAD169株截短UL83基因定向克隆到带有绿色荧光蛋白(GFP)作为报告基因的真核表达载体pEGFP-C1上,构建真核重组表达质粒pEGFP-C1-UL83;脂质体转染至Hep-2细胞中,G418筛选获得稳定表达pp65细胞表达系。经基因测序屁示,重组体中截短UL83基因完全正确。RT-PCR和Westem blot检测证实其可在Hep-2细胞中稳定表达。用该重组体和其表达产物在HCMV先天性感染小鼠模型上进行免疫保护试验显示,母鼠血清可检测到特异性抗HCMVpp65抗体,效价为:1:2.51~1:50.79;子鼠脑组织内未分离出病毒,亦未检测出病毒pp65蛋白抗原表达。初步结果表明,pEGFP-C1-UL83具有较好的免疫原性,可作为DNA疫苗刺激机体产生有效抗体。并具有阻止病毒垂直传播的保护性作用。 展开更多
关键词 hcmv截短uL83基因 绿色荧光蛋白 转染 HEP-2细胞 DNA疫苗
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IgG抗体亲和力指数在HCMV感染的SLE患者中的临床评估 被引量:1
10
作者 张园 潘阳 +2 位作者 李文丽 张括 王露楠 《医学研究杂志》 2012年第11期40-43,共4页
目的用外周血人巨细胞病毒(HCMV)IgG抗体亲和力指数判断人巨细胞病毒在系统性红斑狼疮患者中感染的情况。方法间接酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)检测122例系统性红斑狼疮患者,85例非系统性红斑狼疮的自身免疫病患者,137例正常人血清中人... 目的用外周血人巨细胞病毒(HCMV)IgG抗体亲和力指数判断人巨细胞病毒在系统性红斑狼疮患者中感染的情况。方法间接酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)检测122例系统性红斑狼疮患者,85例非系统性红斑狼疮的自身免疫病患者,137例正常人血清中人巨细胞病毒特异性抗体IgM和IgG,并对人巨细胞病毒IgG阳性的血清样本进行IgG抗体亲和力指数(a-vidity index,AI)的检测。结果系统性红斑狼疮患者人巨细胞病毒IgM抗体阳性率为11.48%;IgG抗体阳性率95.08%,其中低亲和力样本占8.62%。非系统性红斑狼疮自身免疫病患者血清中IgM抗体阳性率为1.18%;人巨细胞病毒IgG抗体阳性率95.29%且均为高亲和力抗体。而在137例正常样本中未检测到人巨细胞病毒IgM抗体阳性的样本;IgG抗体阳性率93.43%全部为高亲和力抗体。SLE患者相比非系统性红斑狼疮的自身免疫患者和正常人,其人巨细胞病毒IgM阳性率显著升高,且人巨细胞病毒IgG抗体低亲和力样本在IgG阳性样本中的比例也显著升高。因此,系统性红斑狼疮中的人巨细胞病毒初次感染后期[IgM(-)/IgG(+);AI<45%](10例)和再次或复发感染[IgM(+)/IgG(+);AI>55%](14例)的比例比非系统性红斑狼疮的自身免疫病患者和正常人都显著增多。结论综合HCMV IgG亲和力指数与HCMV IgM的检查结果发现,SLE患者相比正常人或非SLE自身免疫患者,表现出显著上升的原发性HCMV活化感染率与继发性HCMV活化感染率。因此,SLE的罹患与HC-MV感染有密切关联。 展开更多
关键词 巨细胞病毒 亲和力指数 系统红斑狼疮 自身免疫病
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模拟人类巨细胞病毒(HCMV)先天性中枢神经系统感染小鼠模型的建立 被引量:3
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作者 王明丽 唐久来 +4 位作者 胡闻 史百芬 胡勇 毕克菊 李京培 《热带病与寄生虫学》 1999年第3期151-154,共4页
目的寻找适合的研究 HCMV 先天性 CNS 感染是过程的动物模型。方法将人巨细胞病毒(HCMV)接种至6~8周龄 Balb/c 雌雄小鼠腹腔后,交配。待雌鼠临产时剖腹取出胎鼠脑双侧大脑皮层,进行病毒分离,病理学检测及用地高辛标记的 HCMV 寡核苷酸... 目的寻找适合的研究 HCMV 先天性 CNS 感染是过程的动物模型。方法将人巨细胞病毒(HCMV)接种至6~8周龄 Balb/c 雌雄小鼠腹腔后,交配。待雌鼠临产时剖腹取出胎鼠脑双侧大脑皮层,进行病毒分离,病理学检测及用地高辛标记的 HCMV 寡核苷酸探针对大脑皮层细胞压印片进行原位分子杂交检测。结果病理学结果证实,鼠脑为侵袭性脑膜脑炎性病理改变,并在神经细咆内发现病毒特征性的大的核内嗜碱性包涵体;原位杂交结果显示,病毒核酸存在于受染神经细胞及神经胶质细胞核内及胞浆内;在鼠脑组织上清液中分离出 HCMV。且感染雌鼠所生子鼠死胎率及出生后一周内病死率明显高于正常对照组(P<0.005)。证明该病毒能侵袭Balb/c 小鼠,并通过胎盘感染其子代的中枢神经系统(CNS)。结论这种模拟人类 HCMV 先天性 CNS 感染的小鼠模型的建立所显示的许多相似的感染和病理过程,为进一步研究 HCMV 先天性 CNS 感染的病理过程和疫苗的应用提供了可能。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒 小鼠先天性感染模型 大脑皮层 胎鼠
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秦巴山区HCMV先天性感染更昔洛韦治疗效果探讨 被引量:1
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作者 李琦 李芬 《中国妇幼健康研究》 2012年第3期352-354,共3页
目的探讨秦巴山区人巨细胞病毒(HCMV)先天性感染对婴儿的影响及更昔洛韦对症状性患儿干预性治疗的效果。方法采用ELISA法检测孕妇和其所生子女血清中HCMV—IgM,PCR法检测新生儿生后2周内血清中HCMV—DNA。收集病例组中婴儿临床及实... 目的探讨秦巴山区人巨细胞病毒(HCMV)先天性感染对婴儿的影响及更昔洛韦对症状性患儿干预性治疗的效果。方法采用ELISA法检测孕妇和其所生子女血清中HCMV—IgM,PCR法检测新生儿生后2周内血清中HCMV—DNA。收集病例组中婴儿临床及实验室资料,患儿给予更昔洛韦治疗2周,追踪其疾病变化及转归。结果秦巴山区孕期HCMV宫内传播率为36.49%(27/74);孕期HCMV活动性感染与婴儿先天性感染之间关系密切(Х^2=17.58,P〈0.001)。HCMV先天性感染可对新生儿各系统器官造成损害。有症状患儿经更昔洛韦治疗2周后HCMV转阴率为64.29%(9/14),患儿总胆红素、直接胆红素、谷氨酰转移酶、谷丙转氨酶等肝功指标明显降低。结论HCMV先天性感染对婴儿损害严重,更昔洛韦对有症状患儿有一定的治疗作用。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒 先天性感染 活动性感染 更昔洛韦
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秦巴山区孕产期HCMV感染状况调查 被引量:1
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作者 许静 李芬 +1 位作者 宋晖 HUANG Hui 《中国妇幼健康研究》 2013年第6期810-813,842,共5页
目的研究贫困山区人巨细胞病毒(HCMV)的感染状况以及导致HCMV感染的危险因素。方法选择陕南贫困地区4个县434名中、晚期妊娠妇女,对其进行一般情况及孕期情况的问卷调查,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)及PCR技术检测孕妇外周血抗HCMV-IgG... 目的研究贫困山区人巨细胞病毒(HCMV)的感染状况以及导致HCMV感染的危险因素。方法选择陕南贫困地区4个县434名中、晚期妊娠妇女,对其进行一般情况及孕期情况的问卷调查,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)及PCR技术检测孕妇外周血抗HCMV-IgG、IgM抗体及HCMV DNA片段随访至其生产后(所有随访者均为足月生产),分别于产后2周内、3~14周内对随访产妇采集其乳汁及所生婴儿的尿液,继续进行HCMV的相关检查,区分先天性感染和围生期感染,并结合问卷分析HCMV感染的危险因素。结果①贫困山区妊娠妇女HCMV感染率为85.48%(371/434),活动性感染率为8.06%(35/434);总宫内传播率为4.58%(17/371),其中活动性感染者宫内感染率为31.43%(11/35),潜伏性感染者为1.79%(6/336),两组间宫内传播率有显著性差异(x^2=63.704,P<0.05);②产妇乳汁HCMV阳性率11.86%(44/371),其中活动性感染者乳汁排毒率为85.71%(30/35),潜伏性感染者乳汁排毒率为4.17%(14/336),两组间有显著性差异(确切概率0.000,P<0.05)。乳汁排毒组中继续母乳喂养者中有14.28%(1/7)发生围生期感染,乳汁无排毒组中无围产期感染,两组间围生期感染率有显著性差异(确切概率0.021,P<0.05);③年龄、文化程度、家庭经济状况在活动性、潜伏性感染与正常对照组间均无显著性差异(x^2值分别为4.088、5.610、5.380,均P>0.05)。孕产次、分娩方式在活动性、潜伏性感染与正常对照组间均有显著性差异(x^2值分别为9.383、17.746,均P<0.05)。结论秦巴山区妊娠妇女HCMV活动性感染率、宫内传播率较课题组之前的研究有所下降,但仍高于其他地区感染水平。妊娠期HCMV活动性感染是导致宫内传播和产后乳汁排毒的重要因素产后乳汁排毒可造成围生期HCMV感染。 展开更多
关键词 巨细胞病毒 先天性感染 围生期感染 现况调查
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荧光定量聚合酶链反应检测献血员HCMV-DNA
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作者 叶冬青 郝加虎 +3 位作者 黄芬 胡兆平 蒋作君 余新炳 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第5期57-60,共4页
目的 了解献血员血清中HCMV核酸含量。方法 采用FQ -PCR法定量检测 36 3例献血员的血清标本。结果 经FQ -PCR检测 ,血清标本HCMVDNA平均拷贝数为 1 2× 10 5基因拷贝 /μl。献血员的血清HCMV含量在不同性别及职业、文化程度、经... 目的 了解献血员血清中HCMV核酸含量。方法 采用FQ -PCR法定量检测 36 3例献血员的血清标本。结果 经FQ -PCR检测 ,血清标本HCMVDNA平均拷贝数为 1 2× 10 5基因拷贝 /μl。献血员的血清HCMV含量在不同性别及职业、文化程度、经济水平、献血次数、献血年限、ALT水平、是否定期献血组间均差异无显著性 ,只是在不同年龄段之间有差别。以FQ -PCR为“金标准” ,发现ELISA法灵敏度为 6 7 89% ,特异度为 93 16 % ,阳性预测值为 95 4 3%。结论 FQ -PCR能够避免PCR后处理导致的假阳性污染 。 展开更多
关键词 hcmv-DNA 荧光定量聚合酶链反应 人巨细胞病毒 献血员 FQ-PCR法
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HCMV基因在人和小鼠胚胎成纤维细胞中表达的差异性研究
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作者 杨瑞 王斌 +6 位作者 钱冬萌 李玲 周雯 王桐梅 胡明 陈豪 宋旭霞 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2013年第5期25-31,共7页
人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)种属特异性机制尚不清楚。研究通过检测HCMV AD169体外感染人胚胎成纤维细胞(Human embryo fibroblast,HEF)和小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryo fibroblast,MEF)后病毒基因的表达情况,探讨HCM... 人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)种属特异性机制尚不清楚。研究通过检测HCMV AD169体外感染人胚胎成纤维细胞(Human embryo fibroblast,HEF)和小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryo fibroblast,MEF)后病毒基因的表达情况,探讨HCMV种属特异性的可能分子机制。首先用HCMV AD169(MOI=5)分别感染HEF和MEF,相差显微镜逐日观察细胞的形态学变化;RT-PCR检测HCMV即刻早期(IE1、IE2)、早期(UL84)和晚期基因(UL83)的表达情况;Western-blot和免疫荧光检测病毒基因编码蛋白表达的情况。形态学观察发现HEF感染HCMV后逐渐变大变圆并相互融合,第4天可见典型的HCMV特征性病变效应,而MEF则未出现上述的变化;RT-PCR和Western-blot表明HEF组表达即刻早期基因IE1和IE2、早期基因UL84和晚期基因UL83 mRNA以及各基因所编码的蛋白,且相对表达量显著高于模拟感染组(P﹤0.01);而MEF组仅IE1和IE2 mRNA和蛋白相对表达量显著低于HEF组(P﹤0.05),而高于模拟感染组(P﹤0.01)。免疫荧光检测发现HEF感染72 h表达IE和UL83蛋白,而MEF则无明显表达。以上结果表明,HCMV不能在MEF中复制并产生完整子代病毒颗粒,且病毒基因表达阻止在IE2基因表达之后和UL84基因表达之前,其种属特异性可能与即刻早期蛋白低水平的表达量有关。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒 人胚胎成纤维细胞 鼠胚胎成纤维细胞 即刻早期基因
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HPV和HCMV在慢性宫颈炎病人中的分布及相关性研究
16
作者 孙汭 孟祥金 +4 位作者 崔正言 孙玉玲 李文 朱长义 邓文 《中国病毒学》 CSCD 1991年第3期193-196,共4页
本文采用DNA-DNA分子杂交技术对病理组织学确诊的87例慢性宫颈炎患者和25例健康宫颈的宫颈活检组织DNA进行了HPV 6、11、16、18型DNA及HCMV HindⅢE片段检测。结果表明,对照宫颈检出率全部为0,慢性宫颈炎检出率HPV 6为16%,HPVll为12.6... 本文采用DNA-DNA分子杂交技术对病理组织学确诊的87例慢性宫颈炎患者和25例健康宫颈的宫颈活检组织DNA进行了HPV 6、11、16、18型DNA及HCMV HindⅢE片段检测。结果表明,对照宫颈检出率全部为0,慢性宫颈炎检出率HPV 6为16%,HPVll为12.6%,HPV16为11.5%,HPVl8为5%,总的HPV DNA相关序列为29.0%,HCMV为12.64%。经显著性检验,HPV DNA相关序列检出率在慢性宫颈炎与对照组间具显著性差异,HPV DNA相关序列阳性者患慢性宫颈炎的危险性为HPV DNA相关序列阴性者20.81的倍。本实验结果还表明HCMV阳性患者中72.7%的病人同时有HPV感染,提示HCMV感染与HPV感染有关。 展开更多
关键词 宫颈炎 HPV hcmv 分子杂交
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重组hcmvIL-10的表达纯化及免疫抑制活性研究 被引量:2
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作者 曾智 高艳 +4 位作者 冯晶晶 田可港 浮苗 彭颖 郑晓群 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期968-973,共6页
目的:探讨重组人巨细胞病毒白细胞介素10(hcmvIL-10)对单核细胞的免疫抑制活性及分化相关基因表达的影响。方法:将重组的原核表达质粒pMal-c2X-hcmvIL-10和pMal-c2X-hIL-10转化受体菌E.coli BL21(DE3)进行诱导表达,采用Amylose-resin亲... 目的:探讨重组人巨细胞病毒白细胞介素10(hcmvIL-10)对单核细胞的免疫抑制活性及分化相关基因表达的影响。方法:将重组的原核表达质粒pMal-c2X-hcmvIL-10和pMal-c2X-hIL-10转化受体菌E.coli BL21(DE3)进行诱导表达,采用Amylose-resin亲和层析纯化重组蛋白,并用葡聚糖凝胶(Sephadex G-75)进行二次纯化。纯化的重组蛋白hcmvIL-10和人白细胞介素10(hIL-10)分别与THP-1细胞作用后,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养细胞上清液TNF-α水平;实时荧光定量PCR与流式细胞术分别检测THP-1细胞HLA-DR mRNA及HLA-DR分子的表达;采用功能分类Th1-Th2-Th3 PCRARRAY检测分化相关基因表达谱。结果:重组蛋白hcmvIL-10和hIL-10经SDS-PAGE及Western blot鉴定与目的相符;不同浓度(2、10和50 ng/ml)重组hcmvIL-10和hIL-10分别与经PHA诱导的THP-1细胞作用48小时后,培养上清液中TNF-α的浓度分别为:(3.8±0.96)pg/ml、(1.95±0.51)pg/ml、(1.6±0.45)pg/ml和(2.49±0.43)pg/ml、(1.77±0.38)pg/ml、(0.98±0.16)pg/ml,除2 ng/ml重组hcmvIL-10处理组外,其它处理组与对照组比较均明显降低(P<0.01);不同浓度重组hcmvIL-10和hIL-10分别与THP-1细胞作用48小时后,HLA-DR mRNA相对表达量分别为:0.86±0.025、0.76±0.023、0.75±0.017和0.73±0.017、0.61±0.017、0.55±0.015,HLA-DR分子的表达分别为:(11.5±0.44)%、(10.1±0.30)%、(9.1±0.38)%和(10.9±0.10)%、(9.7±0.50)%、(7.5±0.32)%,除2 ng/ml重组hcmvIL-10处理组外,其它处理组与对照组比较均明显降低(P<0.01);功能分类Th1-Th2-Th3 PCR ARRAY共检测84个分化相关基因,hcmvIL-10处理组共有8个基因差异表达,上调基因为IL-12RB2、NFATC2、SOCS2、TYK2、GFI1和CEBPB,下调基因为CD80和CTLA4;hIL-10处理组共有5个基因差异表达,上调基因为SOCS2,下调基因为CD80、CD28、CTLA4和IL-6。结论:重组蛋白hcmvIL-10可抑制THP-1细胞分泌TNF-α,下调THP-1细胞HLA-DR分子的表达,类似hIL-10的免疫抑制功能;重组蛋白hcmvIL-10可影响THP-1细胞相关基因的表达,其差异表达基因与hIL-10不同。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒 巨细胞病毒白细胞介素10 白细胞介素10 免疫抑制
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HCMV感染对恶性胶质瘤U87细胞增殖及ATF5表达的影响 被引量:2
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作者 王桐梅 钱冬萌 +5 位作者 胡明 李玲 张丽 陈豪 杨瑞 王斌 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2014年第1期17-21,共5页
人巨细胞病毒(HCMV)能够诱导肿瘤细胞的恶性转化,但其分子机制尚有待进一步探索。探讨HCMV是否通过调控转录激活因子5(ATF5)的表达变化促进胶质瘤细胞的增殖。采用HCMV AD169株(MOI=5)感染神经胶质瘤U87细胞株,MTT方法观察HCMV感染0、12... 人巨细胞病毒(HCMV)能够诱导肿瘤细胞的恶性转化,但其分子机制尚有待进一步探索。探讨HCMV是否通过调控转录激活因子5(ATF5)的表达变化促进胶质瘤细胞的增殖。采用HCMV AD169株(MOI=5)感染神经胶质瘤U87细胞株,MTT方法观察HCMV感染0、12、24、48 h后细胞的增殖活性。Real-time PCR及Western-blot检测HCMV感染U87细胞后ATF5基因及蛋白的表达水平变化。以慢病毒为载体的靶向ATF5小干扰RNA构建载体,敲低ATF5表达水平后感染HCMV,MTT检测病毒感染细胞的增殖活性变化。HCMV感染神经胶质瘤U87细胞后,与未感染组比较,增值活性明显升高(P<0.05),ATF5表达水平上升,表明HCMV感染使胶质瘤细胞增殖活性提高,细胞抗凋亡能力增强。成功构建沉默ATF5细胞系siATF5 U87,HCMV感染siATF5 U87细胞后使细胞增殖活性减弱,抗凋亡能力下降。以上实验结果表明,HCMV感染上调胶质瘤U87细胞ATF5的表达水平,促进细胞的增殖。因此HCMV感染可能通过调控ATF5信号通路增加细胞恶性性状,为治疗胶质瘤提供一个新的思路。 展开更多
关键词 胶质瘤细胞U87 人巨细胞病毒 细胞增殖 转录激活因子5
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HCMV宫内感染对婴幼儿智力和听觉发育的影响 被引量:2
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作者 郝海燕 邓东锐 +6 位作者 闻良珍 陈素华 熬黎明 刘兰清 左伟 李静 凌霞珍 《中国妇幼健康研究》 2010年第6期717-718,726,共3页
目的 探讨人巨细胞病毒宫内感染儿的脑发育状况、认知能力及听觉发育状况.方法 采用酶联免疫吸附试验法检测4 412例孕妇外周血中HCMV IgM,对HCMV IgM阳性孕妇进一步应用逆转录-聚合酶链反应检测胎儿附属物中人巨细胞病毒晚期mRNA,其中1... 目的 探讨人巨细胞病毒宫内感染儿的脑发育状况、认知能力及听觉发育状况.方法 采用酶联免疫吸附试验法检测4 412例孕妇外周血中HCMV IgM,对HCMV IgM阳性孕妇进一步应用逆转录-聚合酶链反应检测胎儿附属物中人巨细胞病毒晚期mRNA,其中1项阳性者为宫内感染组(92例),2项均为阴性者为对照组(88例),联合应用头颅超声、Bayley婴幼儿发育量表、脑干听觉诱发电位检测人巨细胞病毒宫内感染儿出生时及婴幼儿期的听力、智力发育状况.结果 宫内感染儿在出生和出生3个月时头颅超声异常率皆高于对照组(P=0.011;P=0.032);宫内感染儿出生后4个月脑干听觉诱发电位的异常率高于对照组(χ^2=12.515,P〈0.001).宫内感染儿智力发育指数显著落后于对照组(t=4.637,P〈0.01);应用韦氏学龄前及幼儿智力量表(WPPSI)追踪测试患儿,其智能迟缓率仍高达20.00%.结论 人巨细胞病毒宫内感染可引起婴幼儿神经系统病变、智力发育迟缓及听力障碍. 展开更多
关键词 人巨细胞病毒 宫内感染 智力 听觉发育
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慢性牙周炎龈下HCMV和EBV感染及其混合感染率与牙周病变程度的关系 被引量:1
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作者 林海燕 傅柏平 陈莉丽 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期269-273,共5页
目的了解慢性牙周炎(CP)龈下标本中人巨细胞病毒(HCMV)、Epstein-Barr病毒(EBV)感染和混合感染率及其与CP病变程度的关系。方法分别以HCMV糖蛋白B(gB)基因和EBV核抗原2(EBNA2)为靶基因,采用套式PCR(nPCR)检测130例CP患者、65例牙龈炎患... 目的了解慢性牙周炎(CP)龈下标本中人巨细胞病毒(HCMV)、Epstein-Barr病毒(EBV)感染和混合感染率及其与CP病变程度的关系。方法分别以HCMV糖蛋白B(gB)基因和EBV核抗原2(EBNA2)为靶基因,采用套式PCR(nPCR)检测130例CP患者、65例牙龈炎患者和35例牙周健康者共920份龈下标本中的HCMV及EBV-1和EBV-2。以牙龈指数(GI)、牙周附着丧失(AL)和牙周袋深度(PD)为观察指标,了解HCMV和EBV-1或EBV-2感染及其混合感染与CP牙周炎症和牙周破坏程度的关系。结果CP标本HCMV阳性率(63.5%)、EBV-1(27.9%)和EBV-2(9.8%)阳性率均显著高于牙龈炎(49.2%,16.9%,3.1%)和健康牙周标本(40.0%,13.6%,0.07%)。CP标本HCMV和EBV-1(18.5%)、HC-MV和EBV-2(7.5%)混合感染阳性率均显著高于牙龈炎标本(4.2%,0.08%)和健康牙周标本(2.1%,0.07%)。牙龈炎和健康牙周标本上述检测阳性率之间均无统计学差异。EBV-1或EBV-2感染与GI、AL、PD均无关。HCMV感染、HCMV和EBV-1及HCMV和EBV-2混合感染虽与GI均无关,但与AL和PD密切相关。结论HCMV或EBV-1、EBV-2感染可能参与CP发病。HCMV感染与CP牙周破坏中有重要作用,EBV-1与HCMV混合感染时可加重CP病变程度。 展开更多
关键词 人慢性牙周炎 人巨细胞病毒 EPSTEIN-BARR病毒 感染 牙周病变
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