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Human cytomegalovirus induces alteration of β-actin mRNA and microfilaments in human embryo fibroblast cells 被引量:2
1
作者 林茂芳 魏国庆 +1 位作者 黄河 蔡真 《Journal of Zhejiang University Science》 CSCD 2004年第6期733-737,共5页
Objective: To investigate the infection of human embryo fibroblast cell line HF cells by CMV as well as the effects of CMV on β-actin mRNA and microfilaments. Methods: HF cells shape was observed after the infection ... Objective: To investigate the infection of human embryo fibroblast cell line HF cells by CMV as well as the effects of CMV on β-actin mRNA and microfilaments. Methods: HF cells shape was observed after the infection of CMV.RT-PCR assay was used to detect the mRNA expression of CMV immediate early (IE) gene, β-actin and GAPDH genes of HF cells infected by CMV. CMV particles and cell microfilaments were detected with electron microscope. Results: Shape of HF cell changed after the infection by CMV. HF cells infected by CMV could express IE mRNA and the expression of β-actin mRNA decreased in a time-and titer-dependent manner compared with the uninfected HF cells whose expression of GAPDH mRNA did not change much. CMV particles were found with electron microscope in the cells. Microfilaments were ruptured and shortened after the infection of CMV. Conclusion: CMV can not only infect human embryo fibroblast cells line HF cells and replicate in the cells, but can also affect the expression of β-actin mRNA and the microfilaments. 展开更多
关键词 CYTOMEGALOVIRUS human embryo fibroblast cells INFECTION Β-ACTIN MICROFILAMENT
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纳米二氧化钛对人皮肤基底细胞癌和胚胎皮肤成纤维细胞的生物学效应 被引量:10
2
作者 刘云波 孟金萍 +3 位作者 孙淑华 王艳蓉 胡季帆 吕素军 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期180-182,183,共4页
目的探讨纳米粒子二氧化钛(TiO2)对体外培养的人皮肤基底细胞癌A431和人胚胎皮肤成纤维细胞的生物学效应。方法TiO2处理体外培养的人皮肤基底细胞癌A431(human skin Basal cell carcinoma,A431)和人胚胎皮肤成纤维细胞(human embryo ski... 目的探讨纳米粒子二氧化钛(TiO2)对体外培养的人皮肤基底细胞癌A431和人胚胎皮肤成纤维细胞的生物学效应。方法TiO2处理体外培养的人皮肤基底细胞癌A431(human skin Basal cell carcinoma,A431)和人胚胎皮肤成纤维细胞(human embryo skin Fibroblast,ESF),MTT法测定细胞生长活性,计数集落形成和荧光染色检测细胞凋亡情况。结果纳米TiO2显著抑制体外培养的人皮肤基底细胞癌A431的集落形成,对其生长活性具有显著负相关性(P<0.05);能够抑制人胚胎皮肤成纤维细胞(ESF)的集落形成,但对其生长活性的抑制无相关性(P>0.05)。结论纳米TiO2可影响体外培养的人皮肤基底细胞癌A431的生长、集落形成,并可导致细胞凋亡。 展开更多
关键词 纳米TIO2 皮肤基底癌细胞A431 ESF细胞 生物学特性
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红景天素抗老化作用的实验研究 被引量:27
3
作者 王淑兰 王宜 +3 位作者 李淑连 何为惠 吴胜东 马兴元 《白求恩医科大学学报》 CSCD 1991年第6期542-544,共3页
本实验以体内、外相结合的研究方法,探讨了药用植物红景天提取物—红景天素对体外培养人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS)和大鼠肝脏的影响,观察了红景天素对2BS细胞生长和增殖的影响,以及对大鼠肝脏细胞形态和组化改变和肝组织中过氧化脂质(L... 本实验以体内、外相结合的研究方法,探讨了药用植物红景天提取物—红景天素对体外培养人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS)和大鼠肝脏的影响,观察了红景天素对2BS细胞生长和增殖的影响,以及对大鼠肝脏细胞形态和组化改变和肝组织中过氧化脂质(LPO)与肝血清超氧化物歧化酶(SOD)的变化。实验结果是红景天素能促进2BS细胞生长和增殖,降低大鼠肝组织LPO及肝细胞内脂褐素含量及酸性磷酸酶活性(ACPase)。结果证明红景天素有延缓细胞老化抗退变作用。 展开更多
关键词 红景天素 大鼠 抗老化
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人胚胎成纤维细胞对人胚胎干细胞生长的作用 被引量:9
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作者 徐令 黄绍良 +1 位作者 李树浓 吴旋 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期1-4,共4页
目的 :比较人和小鼠胚胎成纤维细胞对人胚胎干细胞生长的作用 ,为胚胎干细胞定向诱导各系统细胞应用于临床 ,消除异种蛋白污染打下基础。方法 :分别采用人胚胎成纤维细胞和小鼠胚胎成纤维细胞为饲养层细胞 ,支持人受精卵的培养 ,观察其... 目的 :比较人和小鼠胚胎成纤维细胞对人胚胎干细胞生长的作用 ,为胚胎干细胞定向诱导各系统细胞应用于临床 ,消除异种蛋白污染打下基础。方法 :分别采用人胚胎成纤维细胞和小鼠胚胎成纤维细胞为饲养层细胞 ,支持人受精卵的培养 ,观察其增殖和分化情况。结果 :人和小鼠胚胎成纤维细胞分别加入白血病抑制因子 (hLIF)均能很好支持人胚胎干细胞生长增殖 ,并保持未分化状态。结论 :完全可以使用人胚胎成纤维细胞支持人胚胎干细胞增殖 ,消除异种蛋白污染的可能性 ,为胚胎干细胞定向诱导分化发育应用于临床打下坚实基础。 展开更多
关键词 胚胎 干细胞 成纤维细胞 人类
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香烟烟雾对2种肺细胞的DNA损伤与修复 被引量:4
5
作者 李娜 张遵真 吴媚 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期142-145,共4页
目的探讨经香烟烟雾溶液染毒的人正常肺间质细胞和人肺腺癌细胞的DNA损伤及其修复效应。方法体外培养人胚肺成纤维细胞(HLF)和人肺腺癌A549细胞,以二甲基亚砜(DMSO)和磷酸缓冲液(PBS)作为吸收液,采集香烟主流烟雾。用四甲基偶氮唑盐(MTT... 目的探讨经香烟烟雾溶液染毒的人正常肺间质细胞和人肺腺癌细胞的DNA损伤及其修复效应。方法体外培养人胚肺成纤维细胞(HLF)和人肺腺癌A549细胞,以二甲基亚砜(DMSO)和磷酸缓冲液(PBS)作为吸收液,采集香烟主流烟雾。用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定香烟烟雾-DMSO吸收液和香烟烟雾-PBS吸收液(分别简称DMSO烟液和PBS烟液)的1/2、1/4、1/8和1/16倍稀释液和原液对HLF细胞和A549细胞的毒性(分别以DMSO和PBS为阴性对照),以无明显细胞毒性的浓度进行彗星实验(分别以DMSO和PBS为阴性对照,以重铬酸钾为阳性对照),测定细胞的DNA损伤及修复情况。结果DMSO烟液原液及其1/2稀释液染毒的细胞存活率低于80%,而PBS烟液染毒的细胞存活率均高于80%。DMSO烟液的1/4、1/8、1/16倍稀释液以及PBS烟液的1/2、1/4、1/8和1/16倍稀释液和原液对HLF细胞和A549细胞的DNA损伤与阴性对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.01),且存在明显的剂量-效应关系。DNA损伤在两种细胞间差异无统计学意义(P>0.05),但DMSO烟液所致的DNA损伤高于PBS烟液(P<0.01)。细胞在去除受试物后培养30min时开始修复,随着修复时间的延长,拖尾细胞数减少,DNA迁移长度缩短(P<0.05),且A549细胞修复得更快(P<0.05)。结论DMSO烟液的细胞毒性和遗传毒性均高于PBS烟液。香烟烟雾对HLF细胞和A549细胞的DNA损伤差异不明显,A549细胞的DNA损伤修复能力较HLF细胞强。 展开更多
关键词 烟草烟污染 DNA损伤 彗星实验 人胚肺成纤维细胞 人肺腺癌A549细胞
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人胚胎生殖细胞在人胚胎成纤维细胞饲养层上的生长 被引量:4
6
作者 刘永刚 韩兵 +3 位作者 陈地龙 李芳菲 王亚平 王莎莉 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期284-287,共4页
目的探讨以人胚胎成纤维细胞为饲养层分离、培养人胚胎生殖细胞的方法和条件。方法分离、培养3~4月胚胎成纤维细胞,取3~15代细胞经丝裂酶素处理后铺板备用;分离6~11周胚胎原始生殖细胞,将其置于人胚胎成纤维细胞饲养层上,在含生长因... 目的探讨以人胚胎成纤维细胞为饲养层分离、培养人胚胎生殖细胞的方法和条件。方法分离、培养3~4月胚胎成纤维细胞,取3~15代细胞经丝裂酶素处理后铺板备用;分离6~11周胚胎原始生殖细胞,将其置于人胚胎成纤维细胞饲养层上,在含生长因子、分化抑制因子的培养体系中培养胚胎生殖细胞;用免疫细胞化学方法检测胚胎生殖细胞表面标志SSEA1和SSEA4;钙钴法检测碱性磷酸酶活性;RT PCR检测转录因子Oct4的表达。结果人胚胎成纤维细胞可连续传代25代以上(6月),3~15代细胞可以用作饲养层细胞。分离的胚胎生殖细胞在饲养层上可增殖形成典型胚胎生殖细胞集落,并能连续在体外培养超过8代。集落未分化标志检测显示SSEA1、SSEA4呈阳性,碱性磷酸酶活性呈强阳性,Oct4表达阳性。结论用人胚胎成纤维细胞作为饲养层能获得可连续增殖的胚胎生殖细胞。 展开更多
关键词 胚胎生殖细胞 胚胎成纤维细胞 细胞培养 免疫细胞化学 逆转录聚合酶链反应 人胚
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人巨细胞病毒对细胞周期调控靶点-P^(53)的影响 被引量:1
7
作者 樊蓓 黄艳仪 陈敦金 《江西医药》 CAS 2004年第1期18-20,共3页
目的了解HCMV对细胞周期调控靶点P53的影响。方法建立体外HCMV感染人胚肺成纤维细胞(HEL)模型,(1)倒置显微镜观察不同时间下各组HEL的病变效应。(2)S-P免疫组化法检测P53蛋白的表达。(3)FQ-PCR法检测HEL细胞内HCMVDNA拷贝数。结果(1)HCM... 目的了解HCMV对细胞周期调控靶点P53的影响。方法建立体外HCMV感染人胚肺成纤维细胞(HEL)模型,(1)倒置显微镜观察不同时间下各组HEL的病变效应。(2)S-P免疫组化法检测P53蛋白的表达。(3)FQ-PCR法检测HEL细胞内HCMVDNA拷贝数。结果(1)HCMV感染使HEL细胞发生病变,细胞内HCMVDNA拷贝数随时间的延长逐渐增加。(2)S-P免疫组化结果提示HCMV感染使HEL细胞P53蛋白的水平升高。结论HCMV的感染改变了细胞内P53的水平,可能影响其在细胞周期中的正常功能,营造有利于病毒复制的环境。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒 细胞 周期调控靶点 P^53 疱疹病毒B属
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巨细胞病毒感染的细胞微丝骨架重组异常
8
作者 赵广圣 林茂芳 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第4期759-762,共4页
本研究探讨巨细胞病毒(CMV)感染对人胚成纤维细胞(HF)微丝骨架影响及与病毒复制状态的可能关系。用显微镜观察细胞形态,采用RT-PCR检测β-actin表达,Western-blot检测胞内肌动蛋白质含量,间接免疫荧光标记病毒即刻早期抗原(IE)与微丝骨... 本研究探讨巨细胞病毒(CMV)感染对人胚成纤维细胞(HF)微丝骨架影响及与病毒复制状态的可能关系。用显微镜观察细胞形态,采用RT-PCR检测β-actin表达,Western-blot检测胞内肌动蛋白质含量,间接免疫荧光标记病毒即刻早期抗原(IE)与微丝骨架探针观察HF细胞内感染状况及微丝骨架变化。结果表明CMV感染率大于95%,IE抗原主要位于胞核。受染细胞变粗、变圆,甚至脱壁,呈时间依赖性。感染后72、96小时,受染细胞内β-actin表达呈渐进性下调,差异显著(P<0.05);96小时后胞内β-actin含量则为未感染组的(74.2±13.4)%,差异显著(P<0.05)。受染细胞内微丝排列紊乱,极性消失;细胞融合,荧光强度明显减弱。结论CMV引起细胞内肌动蛋白质、微丝骨架形态及重组异常可能有助于其侵袭宿主细胞并进一步活化及复制。 展开更多
关键词 巨细胞病毒 人胚成纤维细胞 β肌动蛋白 微丝
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人巨细胞病毒对细胞周期调控靶点—p53的影响
9
作者 樊蓓 黄艳仪 陈敦金 《中国热带医学》 CAS 2004年第4期502-504,共3页
目的 了解HCMV对细胞周期调控靶点p5 3的影响。 方法 建立体外HCMV感染HEL模型 ,用倒置显微镜观察不同时间下各组HEL的病变效应和用S -P免组化法检测p5 3蛋白的表达并以FQ -PCR法检测HEL细胞内HCMVDNA拷贝数。 结果  ( 1)HCMV感染... 目的 了解HCMV对细胞周期调控靶点p5 3的影响。 方法 建立体外HCMV感染HEL模型 ,用倒置显微镜观察不同时间下各组HEL的病变效应和用S -P免组化法检测p5 3蛋白的表达并以FQ -PCR法检测HEL细胞内HCMVDNA拷贝数。 结果  ( 1)HCMV感染使HEL细胞发生病变 ,细胞内HCMVDNA拷贝数随时间的延长逐渐增加。 ( 2 )S -P免疫组化结果提示HCMV感染使HEL细胞p5 3蛋白的水平升高。 结论 HCMV的感染改变了细胞内p5 3的水平 ,可能影响其在细胞周期中的正常功能 。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒 细胞周期 P53 人胚肺成纤维细胞 病毒复制
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伊氏锥虫在人胚肺成纤维细胞和在新生鼠肾成纤维细胞型细胞中的体外培养 被引量:1
10
作者 伦照荣 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 1990年第3期299-305,共7页
在HEPES缓冲,含15—20%胎牛血清,100单位青霉素/ml,100微克链霉素/ml的RPMI-1640培养基中,用人胚肺成纤维细胞(KMB)和新生鼠肾成纤维细胞型细胞(ZUKF)作支持细胞,成功地使伊氏锥虫(Trypanosoma evansi)正常动基体株(kinetoplastic stra... 在HEPES缓冲,含15—20%胎牛血清,100单位青霉素/ml,100微克链霉素/ml的RPMI-1640培养基中,用人胚肺成纤维细胞(KMB)和新生鼠肾成纤维细胞型细胞(ZUKF)作支持细胞,成功地使伊氏锥虫(Trypanosoma evansi)正常动基体株(kinetoplastic strain)和异常动基体株(dyskinetoplastic strain)在37℃含5% CO_2的二氧化碳培养箱中连续培养达60天以上,并保持其对小鼠的高度感染力和致病力。这是迄今为止首次利用来源于人的细胞作支持细胞连续培养家畜非洲锥虫血液型成功的报告。实验结果表明伊氏锥虫体外培养成功与否对提供支持细胞的宿主是否有感染性无必然的联系。此外,利用Baltz氏等建立的无支持细胞培养系统,我们亦成功地使上述两伊氏锥虫株在体外连续繁殖,并保持对小鼠的高度感染力和致病力。 展开更多
关键词 伊氏锥虫 KMB ZUKF 体外培养
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Cyclin D1和CDK4正性调节苯并(a)芘所致人胚肺成纤维细胞周期改变
11
作者 杜宏举 刘秉慈 +6 位作者 汤宁 史香林 黄传书 高艾 沈福海 叶萌 尤宝荣 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期393-396,共4页
目的研究苯并(a)芘[B(a)P]对人胚肺成纤维细胞(HELF)的细胞周期分布及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和细胞周期蛋白依赖激酶4(CDK4)蛋白表达的影响,并探讨两种蛋白含量改变与细胞周期效应之间的关系。方法将反义cyclin D1质粒和反义CDK4质... 目的研究苯并(a)芘[B(a)P]对人胚肺成纤维细胞(HELF)的细胞周期分布及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和细胞周期蛋白依赖激酶4(CDK4)蛋白表达的影响,并探讨两种蛋白含量改变与细胞周期效应之间的关系。方法将反义cyclin D1质粒和反义CDK4质粒导入HELF细胞内,建立两种质粒稳定转染的细胞模型。用0.1、0.5、2.5和12.5μmol/L的B(a)P处理HELF细胞24h,用蛋白印迹方法检测cyclin D1和CDK4蛋白表达水平;利用流式细胞技术检测B(a)P处理对HELF细胞及两种稳定转染细胞系细胞周期的影响。结果成功建立了反义cyclin D1和反义CDK4稳定转染的细胞系。不同剂量B(a)P处理可引起cyclin D1蛋白表达的显著增加,但对CDK4蛋白表达无明显影响;2.5μmol/L的B(a)P处理HELF细胞24h后,引起其细胞周期G1期显著下降,S期显著增加;2.5μmol/L的B(a)P处理反义cyclin D1和反义CDK4稳定转染的HELF细胞24h后,对其细胞周期的分布无显著影响。结论Cyclin D1和CDK4基因均参与了B(a)P所致细胞周期改变过程,并发挥正性调节作用。 展开更多
关键词 苯并(A)芘 细胞周期 CYCLIN D1 CDK4
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人胚呼吸道上皮细胞非时序DNA合成
12
作者 文剑明 张萌 《中山医科大学学报》 CSCD 1992年第1期27-30,共4页
为研究和比较化学致癌物对人呼吸道上皮细胞和纤维母细胞的损伤及损伤后DNA修复合成的差异,作者用直接致癌物4-硝基喹啉-1-氧化物(4-NQO)和间接致癌物3,4-苯并芘(BaP)处理人胚鼻咽、气管上皮细胞和纤维母细胞,用放射自显影术测定这3种... 为研究和比较化学致癌物对人呼吸道上皮细胞和纤维母细胞的损伤及损伤后DNA修复合成的差异,作者用直接致癌物4-硝基喹啉-1-氧化物(4-NQO)和间接致癌物3,4-苯并芘(BaP)处理人胚鼻咽、气管上皮细胞和纤维母细胞,用放射自显影术测定这3种细胞的非时序脱氧核糖核酸合成(UDS)。用4-NQO处理后,这3种细胞的UDS均呈明显的剂量依赖(dose dePendency)关系,但气管和鼻咽上皮细胞UDS平均分别是纤维母细胞的3.0和2.4倍。用BaP处理后,气管和鼻咽上皮细胞UDS呈现明显的剂量依赖关系,而纤维母细胞未见这种关系。气管和鼻咽上皮细胞的UDS平均分别是纤维母细胞的8.6和3.0倍。 展开更多
关键词 上皮细胞 呼吸道 DNA合成 致癌物
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人巨细胞病毒感染人源细胞后的蛋白质检测
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作者 杨海青 朱剑梅 +3 位作者 邱发麒 邓成莲 何英 游传蓉 《实用医院临床杂志》 2012年第3期41-43,共3页
目的探讨人源细胞对人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)的易感性及其感染后蛋白质的表达。方法用HCMV感染3种人源细胞并检测其病毒蛋白质表达情况。结果 HCMV可成功感染3种细胞并表达病毒蛋白。结论 HCMV在体外有较大的细胞嗜性。
关键词 巨细胞病毒 病毒感染 蛋白质 人间充质干细胞 人胚成肌细胞 人皮肤成纤维细胞
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BthC2c1系统剪切基因的初步研究
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作者 吴丹 初文竹 +4 位作者 邱羽菲 潘宇 曹志琴 史嘉翊 《牡丹江医学院学报》 2022年第6期5-8,共4页
目的评估热噬淀粉芽孢杆菌(Bacillus thermoamylovorans C2c1,BthC2c1)系统的基因编辑能力。方法分别将BthC2c1、SpCas9与相应的sgRNA表达质粒转染人肾上皮细胞293T和鸡成纤维细胞DF-1;显微注射技术将制备的BthC2c1-sgRNA、SpyCas9-sgRN... 目的评估热噬淀粉芽孢杆菌(Bacillus thermoamylovorans C2c1,BthC2c1)系统的基因编辑能力。方法分别将BthC2c1、SpCas9与相应的sgRNA表达质粒转染人肾上皮细胞293T和鸡成纤维细胞DF-1;显微注射技术将制备的BthC2c1-sgRNA、SpyCas9-sgRNA复合物注射入小鼠胚胎内;T7E1实验检测基因剪切效率。结果293T和DF-1细胞中SpCas9可以剪切底物,BthC2c1剪切底物不明显;为小鼠胚胎设计的SpyCas9-sgRNA和BthC2c1-sgRNA在体外均可以剪切底物,在体内SpyCas9系统可以检测到剪切,BthC2c1剪切底物不明显。结论Cas9系统可以在293T和DF-1细胞和小鼠胚胎中剪切基因,BthC2c1的剪切能力较弱。 展开更多
关键词 基因编辑 C2c1 293T人肾上皮细胞 DF-1鸡成纤维细胞 小鼠胚胎
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400mL·L^(-1)氧气对体外培养的人胚肺成纤维细胞增殖的促进作用
15
作者 赵诗萌 程威 吴红敏 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第14期1105-1106,1130,共3页
目的探讨400 mL·L-1O2对体外培养的人胚肺成纤维细胞(HELFs)增殖的促进作用。方法将生长良好的HELFs按13传代后,用无血清培养基培养24 h,分别置于空气及400 mL·L-1O2的细胞培养箱中培养5 d,每天收集细胞并计数、绘制细胞生... 目的探讨400 mL·L-1O2对体外培养的人胚肺成纤维细胞(HELFs)增殖的促进作用。方法将生长良好的HELFs按13传代后,用无血清培养基培养24 h,分别置于空气及400 mL·L-1O2的细胞培养箱中培养5 d,每天收集细胞并计数、绘制细胞生长曲线;于培养后1 d、3 d及5 d,作Giemsa液染色,计算细胞分裂指数;培养后5 d收集细胞,流式细胞术检测细胞周期。结果细胞生长曲线显示400 mL·L-1O2较空气利于细胞生长;400 mL·L-1O2干预细胞3 d、5 d后细胞分裂指数分别为2.47%和2.03%,均明显高于空气组(1.90%和1.65%)(P<0.01,0.05);与空气组比较,400 mL·L-1O2干预细胞5 d后,HELFs处于G0/G1期细胞的比率明显减少(P<0.01),S期细胞比率显著增加(P<0.01),G2/M期细胞比率无明显差异(P>0.05)。结论 400 mL·L-1O2促进体外培养的HELFs的生长和增殖。 展开更多
关键词 400 mL·L-1氧 体外细胞培养 人胚肺成纤维细胞 细胞增殖
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云锡矿粉诱导成纤维细胞活化蛋白表达及与上皮细胞共培养对其表达的影响
16
作者 边莉 何永文 +3 位作者 阮永华 高倩 王春艳 金克炜 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2010年第1期1-3,7,共4页
目的研究云锡矿粉诱导成纤维细胞活化蛋白(FAP)表达及与上皮细胞共培养对其表达的影响。方法选用100 mg/L的云锡矿粉处理永生化人支气管上皮细胞(BEAS-2B)及人胚肺成纤维细胞(WI-38),每次处理72 h,隔代处理直至第9代。自第11代将上述细... 目的研究云锡矿粉诱导成纤维细胞活化蛋白(FAP)表达及与上皮细胞共培养对其表达的影响。方法选用100 mg/L的云锡矿粉处理永生化人支气管上皮细胞(BEAS-2B)及人胚肺成纤维细胞(WI-38),每次处理72 h,隔代处理直至第9代。自第11代将上述细胞分组共培养。分组如下:W组、W(B)组、W(B100)组、W100组、W100(B)组、W100(B100)组。应用免疫印迹检测第16代、26代及36代各组成纤维细胞中FAP的表达,以β-actin作为内参,结果通过Quantity One软件进行分析,FAP水平=样本FAP灰度值/同一样本β-actin灰度值。结果免疫印迹检测WI-38中无FAP表达;第16代各组WI-38均未检测到FAP表达;至第26代时,W(B)组及W(B100)组FAP仍呈阴性表达,而W100组、W100(B)组及W100(B100)组则可检测到FAP表达,但3组间表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。第36代时,W100组、W100(B)组及W100(B100)组FAP表达水平较第26代增强,但W100组和W100(B)组FAP表达水平无明显差异,惟W100(B100)组FAP表达水平明显强于前2组(P<0.05);且W(B100)组也出现了FAP表达。结论云锡矿粉能诱导WI-38表达FAP,矿粉诱导的上皮细胞可提高其表达水平。 展开更多
关键词 云锡矿粉 人胚肺成纤维细胞(WI-38) 成纤维细胞活化蛋白(FAP) 人支气管上皮细胞(BEAS-2B)
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亚砷酸钠对人胚肺成纤维细胞增殖活性及细胞周期的影响 被引量:2
17
作者 陈保林 孙高峰 谢惠芳 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期607-609,F0003,共4页
目的探讨亚砷酸钠对人胚肺成纤维细胞(HELF)增殖活性及细胞周期的影响。方法将体外培养的HELF细胞分别暴露于浓度为0(对照)、20、40、60μmol/L的亚砷酸钠培养基24、48和72 h。采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,采用流式细胞仪检测细胞周... 目的探讨亚砷酸钠对人胚肺成纤维细胞(HELF)增殖活性及细胞周期的影响。方法将体外培养的HELF细胞分别暴露于浓度为0(对照)、20、40、60μmol/L的亚砷酸钠培养基24、48和72 h。采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,采用流式细胞仪检测细胞周期分布。结果与对照组相比,各浓度亚砷酸钠染毒24、48、72 h后细胞抑制率均升高,差异有统计学意义(P<0.05);HELF细胞抑制率与亚砷酸钠浓度及作用时长均呈正相关(P<0.05)。HELF细胞G2+M期的比例仅在染毒24、48 h时均与亚砷酸钠染毒浓度呈正相关(P<0.05)。HELF细胞S期比例在染毒48 h时与亚砷酸钠染毒浓度呈负相关(P<0.05)。结论亚砷酸钠染毒可降低HELF细胞的增殖活性,并能够选择性地将细胞阻滞在合成末期及分裂期(G2+M期)。 展开更多
关键词 亚砷酸钠 人胚肺成纤维细胞 细胞活力 细胞周期
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