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Molecular cloning of promoter in human fibrinogenlike protein 2 (hfgl2) gene and functional analysis of its sequence
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作者 MEI FANG RAN YAO YONG ZHOU +3 位作者 DONG XI WEI MING YAN XIAO PING LUO QIN SING 《Journal of Microbiology and Immunology》 2006年第4期258-264,共7页
The aim of this study is to investigate the important regulative elements region which plays an important role on the activation of transcription exerted by the 5' noncoding region of hfgl2 gene in response to HBc... The aim of this study is to investigate the important regulative elements region which plays an important role on the activation of transcription exerted by the 5' noncoding region of hfgl2 gene in response to HBc and HBx. A series of promoter luciferase report plasmids, in which the hfgl2 gene has been deleted of the 5' and retained the common 3', were constructed. All the plasmids constructed were subjected to electrophoretic analysis and DNA sequencing. A eukaryotic construct expressing HBc or HBx, a luciferase reporter construct containing hfgl2 promoter and aβ-galactosidase (β-gal) plasmid were co-transfected into Chinese hamster ovary (CHO) cells and hepG2 cells, respectively. Luciferase report plasmids containing hfgl2 promoter were successfully constructed, and a serial assays of deletion of hfgl2 gene promoter showed that a strong regulatory region from -817 to -467 (relative to the transcription start site) was responsible for transcription and expression regulation of hfgl2 gene. The important regulative elements region in the promoter of hfgl2 gene was in response to HBc and HBx. which contributes to further pursuit of cis-acting elements and transcriptional factors involved in the transcription of hfgl2 gene. 展开更多
关键词 Fulminant hepatitis Fibrinogen-like protein 2 hfgl2)/fibroleukin Gene regulation Luciferase
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乙型肝炎病毒蛋白对纤维介素基因的激活作用 被引量:6
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作者 韩梅芳 习东 +1 位作者 罗小平 宁琴 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期49-54,共6页
纤维介素基因(fgl2)在人和小鼠的重型肝炎的发病机制中发挥重要作用.为探讨乙型肝炎病毒(HBV)编码蛋白对人纤维介素基因(hfgl2)的激活作用,构建了HBV编码蛋白C、S和X的真核表达质粒pcDNA-HBc、pcDNA-HBs和pcDNA-HBx,分别与hfgl2启动子... 纤维介素基因(fgl2)在人和小鼠的重型肝炎的发病机制中发挥重要作用.为探讨乙型肝炎病毒(HBV)编码蛋白对人纤维介素基因(hfgl2)的激活作用,构建了HBV编码蛋白C、S和X的真核表达质粒pcDNA-HBc、pcDNA-HBs和pcDNA-HBx,分别与hfgl2启动子荧光素酶报告基因质粒及β半乳糖苷酶基因质粒(-βGal)共转染到CHO细胞和HepG2细胞,采用免疫组织化学和免疫印记方法(Western blotting)鉴定病毒蛋白的表达.通过检测报告基因荧光素酶(LUC)及β半乳糖苷酶的表达活性,反映病毒蛋白对hfgl2启动子的转录激活作用.结果显示,转染了真核表达质粒的细胞均能瞬时表达相应的肝炎病毒蛋白,在CHO细胞,转染pcDNA-HBc组和pcDNA-HBx组相对荧光素酶的活性是对照组的5.4和6倍,在hepG2细胞,转染pcDNA-HBc组和pcDNA-HBx组相对荧光素酶的活性是对照组的8.7和11倍.研究表明,CHO和HepG2细胞中表达的HBV C蛋白和X蛋白均具有激活hfgl2的功能,而S蛋白则不能激活.进一步揭示了HBV病毒蛋白与宿主基因的相互作用机制. 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 核心(C)蛋白 X蛋白 人纤维介素基因(hfgl2) 基因调控
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重型肝炎相关的人纤维介素基因启动子的克隆及功能分析
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作者 韩梅芳 习东 +2 位作者 严伟明 罗小平 宁琴 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期197-201,共5页
目的明确在病毒蛋白HBc和HBx作用下,hfgl2基因5’端非编码区对转录激活起重要作用的转录调控序列。方法运用基因重组的方法,构建一系列5’端缺失而保留共同3’端的hfgl2基因启动子虫荧光素酶报告质粒,将其分别与病毒蛋白HBc和HBx真... 目的明确在病毒蛋白HBc和HBx作用下,hfgl2基因5’端非编码区对转录激活起重要作用的转录调控序列。方法运用基因重组的方法,构建一系列5’端缺失而保留共同3’端的hfgl2基因启动子虫荧光素酶报告质粒,将其分别与病毒蛋白HBc和HBx真核表达质粒共转染CHO细胞和HepG2细胞,检测各组细胞的相对荧光素酶活性。结果酶切鉴定以及DNA测序等证实一系列hfgl2基因启动子虫荧光素酶报告基因质粒构建成功,系列启动子缺失试验证实:在hfgl2基因启动子-817位至堋位(相对于转录起始点)之间存在着激活该基因的调控序列。结论在HBV病毒蛋白HBc及HBx作用下,hfgl2基因的启动子区存在一个与其转录表达有关的调控序列,探讨了重型肝炎相关的hfgl2基因高度表达的分子机制,为下一步研究相关的顺式作用元件及反式作用因子奠定了基础。 展开更多
关键词 重型肝炎 人纤维介素基因(hfgl2) 基因表达调控 荧光素酶
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