Inhibitory effects of dobutamine on human gastric adenocarcinoma

AIM: To explore the inhibitory effects of dobutamine on gastric adenocarcinoma cells.

封闭内源性miR-23a对人胃腺癌细胞系MGC803增殖及侵袭的影响

目的设计并合成miR-23aASO(ASO-23a),封闭内源性miR-23a的功能后,检测人胃腺癌细胞系MGC803增殖及侵袭能力的改变。方法首先设计并合成ASO-23a,经脂质体方法转染MGC803细胞,实时定量PCR检测转染细胞MGC803中miR-23a的表达水平;经MTT实验、平板克隆形成实验、软琼脂克隆形成实验、TUNEL实验及transwell实验-观察细胞内源性miR-23a功能被封闭后对MGC803细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。结果实时定量PCR结果表明ASO-23a能够有效封闭细胞中内源性miR-23a;MTT、平板克隆形成及软琼脂克隆形成实验结果显示,封闭内源性miR-23a后可抑制MGC803细胞活性;TUNEL实验结果显示,ASO-23a可以促进MGC803细胞凋亡的发生;Transwell实验结果显示,ASO-23a可以抑制MGC803细胞的侵袭能力。结论设计并合成的.ASO-23a在人胃腺癌细胞系MGC803中有效封闭内源性miR-23a,能够抑制细胞活性及侵袭能力,并能促进细胞凋亡的发生。

菠菜粉脂溶性粗提物对人胃癌细胞的体外抑制作用

目的：以体外培养的人胃腺癌细胞株ＳＧＣ－７９０１为材料，观察菠菜粉脂溶性粗提物（ＳＰＦＥ）对人胃癌细胞体外增殖和功能的影响。方法：在３Ｈ－ＴｄＲ掺入实验中ＳＰＦＥ的剂量（以培养液中β－胡萝卜素浓度计）为４×１０－８、４×１０－７、４×１０－６ｍｏｌ／Ｌ；在其它三个实验中为２×１０－８、２×１０－７、２×１０－６ｍｏｌ／Ｌ。结果：１．生长曲线实验中，ＳＰＦＥ在中、高剂量组对人胃癌细胞的增殖有显著的抑制作用，且随剂量增加，抑制作用有增强趋势；２．集落形成实验中，ＳＰＦＥ各剂量组均抑制了胃癌细胞的集落形成（Ｐ＜０．０１），抑制作用呈剂量－反应关系；３．甲基噻唑基四唑（ＭＴＴ）实验中，ＳＰＦＥ各剂量组在抑制胃癌细胞活性和功能的同时，对正常人外周血淋巴细胞却没有影响（Ｐ＞０．０５）；４．对３Ｈ－ＴｄＲ掺入胃癌细胞量的测定表明，ＳＰＦＥ各剂量组和同剂量的β－胡萝卜素对胃癌细胞的ＤＮＡ合成均有抑制作用（Ｐ＜０．０５），但菠菜ＳＰＦＥ的抑制作用显著较β－胡萝卜素强（Ｐ＜０．０５）。

TGF-β1对AGS细胞上皮-间充质转化及体外侵袭的影响

目的观察转化生长因子-β1(TGF-β1)对人胃癌细胞株AGS发生上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及体外侵袭的影响。方法将体外培养的AGS用TGF-β1干预后,倒置显微镜下观察细胞形态学的变化,MTT比色法检测TGF-β1对AGS增殖的影响,细胞划痕试验和Transwell侵袭试验检测细胞运动和侵袭力的改变;免疫荧光和Western blot检测snail、E-cadherin(上皮钙粘蛋白)、和N-cadherin(神经钙粘蛋白)表达的变化。结果TGF-β1诱导AGS向间充质细胞形态转化,低浓度促进细胞增殖,而高浓度时细胞增殖率逐步降低,且snail和间充质细胞表型N-cadherin表达上调,而上皮细胞表型E-cadherin表达下调,同时细胞运动和侵袭能力大大增强。结论TGF-β1可诱导AGS发生EMT,从而增加其侵袭、转移的能力。

八种蔬菜粉脂溶性粗提物对人胃腺癌细胞增殖的影响

本实验以体外培养的人胃腺癌细胞株SGC－7901为材料，研究了八种蔬菜粉脂溶性粗提物（VPFE）对人胃癌细胞体外增殖的影响。VPEE的剂量（以培养液中卜胡萝卜素浓度计）为2×10^(－8)、2×10^(-7)、2×10^(-6)mol／L。结果：（1）生长曲线实验中，八种菜粉VPFE对胃癌细胞的增殖均有抑制作用。在VPFE高剂量组，各种菜粉的抑制作用均有显著性意义（P＜0.05），而中剂量组的作用在不同菜粉有一些差异；（2）集落形成实验中，冬寒菜、菠菜和紫油菜粉VPFE各剂量组均抑制了胃癌细胞的集落形成（P＜0．01），抑制作用呈剂量一反应关系。本次研究的结果为蔬菜防癌抗癌的实际运用积累资料。

青蒿琥酯对人胃腺癌MKN45细胞株增殖抑制和诱导凋亡作用

目的研究青蒿琥酯(ART)对人胃腺癌MKN45细胞株的体外增殖抑制和诱导凋亡作用,并探讨其作用机制。方法以不同浓度的ART作用于体外培养的人胃腺癌MKN45细胞株,采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞生长抑制率;应用流式细胞仪检测细胞凋亡情况;用Western Blotting法检测不同浓度的ART作用于MKN45细胞株时凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱天冬蛋白酶9(caspase-9)和半胱天冬蛋白酶3(caspase-3)等表达情况。结果 MTT实验显示,ART作用48 h后对MKN45细胞增殖有显著抑制作用,抑制作用随着药物浓度的增加而递增(P<0.05),IC50值为13.41μmol.L-1。13.41μmol.L-1ART对MKN45细胞增殖存活有明显的抑制作用,且对细胞抑制作用与药物作用时间和浓度呈正相关(P<0.05)。随着ART浓度的增加,ART对MKN45细胞凋亡率逐渐升高(P<0.05)。ART使MKN45细胞Bcl-2蛋白表达明显降低,Bax、caspase-9及caspase-3蛋白表达明显增高,并随药物浓度的增加,其对凋亡相关蛋白表达的调控作用也明显增强。结论 ART能体外抑制人胃腺癌MKN45细胞株的生长并诱导细胞发生凋亡。

雌激素受体在胃腺癌细胞株和胃癌高侵袭转移细胞系中的表达

目的测定雌激素受体(ER)在人胃腺癌细胞系SGC-7901以及高转移株OCUM-2MD3上的表达。方法用免疫细胞化学方法、RT-PCR和免疫印迹方法检测ER在人胃腺癌细胞上的表达,并对其表达量进行相对定量分析。结果ER在人胃腺癌细胞上有表达;ERα在OCUM-2MD3细胞系的表达强于SGC-7901;而ERβ表达在SGC-7901和OCUM-2MD3中相同,并且ERα/ERβ比值在胃癌高侵袭转移细胞系OCUM-2MD3中升高。结论雌激素有可能通过它的受体对人胃腺癌细胞产生一定的影响,ERα/ERβ比值的改变在胃腺癌发生和转移过程中可能起一定作用。

羟基红花黄色素A对裸鼠人胃腺癌BGC-823移植瘤抑制作用的研究

目的从整体水平研究羟基红花黄色素A(HSYA)对抗人胃腺癌细胞株BGC-823裸鼠皮下移植瘤的作用机制。方法培养人胃腺癌细胞株BGC-823,细胞活力和数量符合接种要求时,接种至30只裸鼠右前肢腋部皮下,建立裸鼠人癌移植瘤模型。随机分为模型组,环磷酰胺对照组,HSYA大、中、小剂量组(1.40、0.70、0.35mg/kg)。给药20d剥离肿瘤,光镜及透射电镜观察瘤组织的病理及超微结构改变,流式细胞术检测瘤细胞的凋亡及细胞周期。结果模型组移植瘤生长明显较HSYA小剂量组、环磷酰胺对照组快;模型组瘤重亦明显高于此2组(P<0.05);HSYA小剂量组可导致瘤细胞凋亡,其凋亡率与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.01),但对细胞周期无明显影响;HSYA小剂量组光镜下可见瘤组织病理恶化程度低于模型组,电镜下可观察到瘤细胞出现凋亡小体。结论适当浓度的HSYA对肿瘤有一定的抑制作用,诱导肿瘤细胞的凋亡可能是其抗肿瘤作用的机制之一。

吴茱萸碱对人胃腺癌细胞SGC-7901作用的研究

目的研究吴茱萸碱(Evo)对人胃腺癌(SGC-7901)细胞的作用,并初步探讨其作用机制。方法 MTT法测定Evo的抗肿瘤活性;电镜观察Evo对细胞形态学的影响;琼脂糖凝胶电泳检测Evo对细胞DNA电泳行为的影响;流式细胞技术检测Evo对SGC-7901细胞的抑制作用和细胞周期的影响。结果一定浓度范围内Evo对SGC-7901细胞的增殖有剂量、时间依赖性抑制作用;透射电镜下可见细胞核染色质边集、核碎裂及凋亡小体;一定浓度的Evo可使细胞基因组DNA电泳出现阶梯状条带;流式细胞仪检测Evo作用后,G0/G1期和S期细胞减少,大量细胞停滞在G2/M期,凋亡细胞增多。结论 Evo对SGC-7901细胞的抑制作用与诱导其凋亡使细胞停滞于G2/M期密切相关。