IL13修饰雷公藤红素/人参总皂苷脂质体的制备及其抑制BT325细胞作用

目的制备白介素13(IL13)修饰雷公藤红素/人参总皂苷脂质体,并评价其对人脑胶质瘤细胞BT325的抑制作用。方法薄膜分散法制备脂质体,1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)/N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)水相缩合法将IL13锚定在粒子表面,考察其形态、粒径、Zeta电位、IL13修饰密度的质量分数、包封率、体外释放。以药脂比(雷公藤红素/卵磷脂)、胆脂比、水合时间、IL13投料比为影响因素,粒径、Zeta电位、聚合物分散性指数(PDI)为评价指标,正交试验优化制备工艺。荧光定性和胞内药物定量法评价BT325细胞摄取行为,MTT法和流式细胞仪法分别测定脂质体抗肿瘤和诱导细胞凋亡作用。结果最佳条件为药脂比1∶20,胆脂比1∶4,水合时间45 min,IL13投料比0.6%。所得脂质体均一圆整,粒径分布较窄,平均粒径(118.3±3.2)nm,Zeta电位(-38.3±3.4)m V,IL13修饰密度的质量分数0.3%,雷公藤红素和人参总皂苷包封率分别为(82.3±2.9)%和(71.2±3.2)%,24 h累计释放度分别为(42.5±4.9)%和(24.3±2.1)%。它可显著促进BT325细胞摄取,IC50为(2.8±0.3)μg/m L(以雷公藤红素计),低于IL13未修饰脂质体和物理混合物(雷公藤红素-人参总皂苷)。当雷公藤红素质量浓度为10μg/m L时,它还能诱导84.3%的BT325细胞发生凋亡。结论 IL13修饰雷公藤红素/人参总皂苷脂质体在体外表现出明显的人脑胶质瘤细胞BT325靶向性和体外抗肿瘤作用。

去水卫矛醇对人脑胶质瘤细胞BT325增殖、凋亡及线粒体膜电位的影响

目的观察去水卫矛醇(DAG)对人脑胶质瘤BT325细胞增殖、凋亡的影响,探讨其可能的作用机制。方法将BT325细胞分为对照组、不同浓度DAG组,作相应处理后培养,测算细胞存活率、单细胞克隆形成率、细胞凋亡率及线粒体膜电位。结果随DAG浓度的增加,BT325细胞的存活率逐渐下降(P<0.05),不同浓度DAG组随培养时间的延长BT325细胞的存活率逐渐下降(P均<0.05);培养24、48、72 h时,DAG对BT325细胞的IC50分别为108.81、26.61、11.38μg/m L。不同浓度DAG组BT325细胞克隆形成率均为0,与对照组的16.78%±1.50%相比,P均<0.01。5、10、20、40、80μg/m L的DAG组BT325细胞凋亡率分别为11.79%±2.91%、15.42%±3.06%、38.70%±1.12%、60.78%±1.30%、80.35%±3.22%,对照组为4.27%±1.72%;不同浓度DAG组BT325细胞凋亡率与对照组相比,P均<0.01,且呈浓度依赖性(P均<0.01)。5、10、20、40μg/m L的DAG组BT325细胞线粒体膜电位分别为0.174±0.038、0.142±0.037、0.138±0.033、0.119±0.013,对照组为0.193±0.014;20μg/m L的DAG组与对照组相比,P<0.05;40μg/m L的DAG组与对照组相比,P<0.01。结论 DAG抑制BT325细胞增殖,诱导细胞凋亡,作用呈浓度依赖性,其机制可能与降低细胞线粒体膜电位有关。