人血型B抗原模拟多肽P1/Fas-Mip3β双表达重组质粒的构建及鉴定

目的构建并鉴定人血型B抗原模拟多肽、巨噬细胞炎症蛋白3β(Mip3β)双表达重组质粒。方法抗血型B抗体筛选噬菌体随机12肽库,筛选阳性噬菌体克隆P1,设计特异性引物扩增P1噬菌体DNA,同样设计特异性引物扩增PBluscript-Fas基因的跨膜区及胞内段,与P1酶切连接,最后与质粒PORF5-mMip3βv21扩增巨噬细胞炎症蛋白3β基因酶切连接,获得血型B抗原模拟多肽、Mip3β双表达重组质粒并进行鉴定,并在人黑色素瘤细胞株B16中转染与表达。结果和结论成功制备了血型B抗原模拟多肽、Mip3β双表达重组质粒,并在黑色素瘤细胞株B16中成功表达。