HPV新型夹心酶联免疫检测法的建立及验证

目的建立一个新型夹心酶联免疫检测系统,为宫颈涂片中高危HPV病毒的检测提供参考。方法使用兔抗HPV16/18/45 E7蛋白的兔单克隆抗体作为包被抗体,使用生物素化的多克隆山羊抗血清作为第二抗体,利用夹心ELISA分别对HPV 16/18/45 E7重组蛋白、宫颈癌细胞和宫颈涂片裂解液中的HPV进行检测。结果确定每孔0.5 pg的HPV 16/18/45 E7蛋白含量为检测限。宫颈涂片HPV检测结果显示,15个为阳性(HPV 16:12个;HPV 18:10个),35个为阴性,与其HPV DNA分型一致。结论本研究建立并验证的新型夹心ELISA法可用来检测3种最普遍的宫颈癌高危HPV类型中的E7蛋白,值得在临床检测中推广。