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Preparation of tanshinone Ⅱ_(A) self-soluble microneedles and its inhibition on proliferation of human skin fibroblasts
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作者 Yanshan Zhan Xiaoqi Xu +4 位作者 Xi Luo Ruiping Liu Yujian Lin Ping Zhao Jun Shi 《Chinese Herbal Medicines》 CAS 2023年第2期251-262,共12页
Objective:Hypertrophic scars(HS)are a variety of skin tissue fibrosis disease that occurs in human skin,the effective therapeutic method of which is still inaccessible up to now.As a bioactive constituent of a well-kn... Objective:Hypertrophic scars(HS)are a variety of skin tissue fibrosis disease that occurs in human skin,the effective therapeutic method of which is still inaccessible up to now.As a bioactive constituent of a well-known medical plant,Salvia miltiorrhiza(Danshen in Chinese),tanshinone Ⅱ_(A)(TSA)is reported to inhibit cell proliferation in HS.Therefore,the aim of this study was to prepare TSA self-soluble microneedles to strengthen its dermal retention and break through the difficulty of significantly thickening epidermal connective tissue and stratum corneum at the HS site.The possible mechanism of action in suppressing HS was studied using human skin fibroblasts(HSF).Methods:Tanshinone Ⅱ_(A) self-dissolving microneedles(TSA-MN)was prepared using a negative mold casting method.The prescription process of microneedle was optimized by Box-Behnken effect surface method.Different media were selected to investigate the ability of transdermal absorption and in vitro release.Furthermore,according to Cell Counting Kit-8(CCK8)method as well as the Western blot method,the effect of TSA-MN on the biological characteristics of HSF was investigated.Results:With remarkable slow release effect and dermal retention,the release and transdermal properties of TSA-MN in vitro were better than both TSA and ordinary dosage forms.Its effect of HSF confirmed the essential decrease in cell motility during cell proliferation and cell migration in vitro,which plays a significant role in down-regulating the secretion of transforming growth factor-β1(TGF-β1)in HSF and increasing the expression level of Smad7.Conclusion:The prepared TSA self-soluble microneedles is helpful in solving the problem of hypertrophic scars,with a stable dermal retention effect after process optimization. 展开更多
关键词 human skin fibroblasts hypertrophic scar tanshinoneⅡ_(A) tanshinoneⅡ_(A)self-dissolving microneedles TGF-β1
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A spectroscopic study on the effect of ultra-violet solar radiation in Antarctica on the human skin fbroblast cells
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作者 Tatsuyuki Yamamoto Hideo Akiyoshi +5 位作者 Keisuke Yoshikiyo Tetsuya Takahashi Yukiko Tanabe Sakae Kudoh Satoshi Imurad Naoyuki Yamamoto 《Geoscience Frontiers》 SCIE CAS CSCD 2013年第6期647-653,共7页
A study on the effect of the solar ultra-violet radiation on the human skin fibroblast cells revealed that the production of matrix metalloproteinase-2 was inhibited by the radiation.A CO2 incubator connected by optic... A study on the effect of the solar ultra-violet radiation on the human skin fibroblast cells revealed that the production of matrix metalloproteinase-2 was inhibited by the radiation.A CO2 incubator connected by optical fibers to a reflector telescope for collecting the solar light was built at Syowa station by the 49th Japanese Antarctica Research Expedition.The direction of the telescope was continuously controlled by a sun-tracker to follow the movement of the Sun automatically.The intensity of the collected light was monitored by a portable spectrophotometer housed inside.The human skin fibroblast cells were incubated in the CO2 chamber to investigate the effect of the solar radiation at Syowa station and were compared with those reference experiments at a laboratory in Japan.The results showed cell damage by strong UV radiation.The production of matrix metalloproteinase-2 was prompted by the moderate UV-B,but was inhibited by the strong UV-B radiation,as studied under laboratory conditions in Japan.The effect of strong solar radiation at Syowa station involving the radiation of UV-B region was estimated to be of the same extent of the radiation caused by an artificial UV-B light with the intensity more than 50 mJ/cm2. 展开更多
关键词 ANTARCTICA GEOBIOLOGY Ultra-violet radiation human skin fibroblast cells Matrix metalloproteinase
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圣草酚对TGF-β1诱导的人皮肤成纤维细胞增殖、氧化应激反应及TGF-β1/Smad信号通路活化的影响
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作者 张泆琳 武鹏 +3 位作者 尹建新 方经纬 张钰琴 吕军影 《广西医学》 CAS 2024年第6期873-881,共9页
目的 探讨圣草酚对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人皮肤成纤维细胞(HSF)的增殖、氧化应激反应及TGF-β1/Smad信号通路活化的影响。方法 将HSF分为对照组、模型组、圣草酚低剂量组、圣草酚中剂量组、圣草酚高剂量组、SB-431542组。对... 目的 探讨圣草酚对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人皮肤成纤维细胞(HSF)的增殖、氧化应激反应及TGF-β1/Smad信号通路活化的影响。方法 将HSF分为对照组、模型组、圣草酚低剂量组、圣草酚中剂量组、圣草酚高剂量组、SB-431542组。对照组不做任何处理,模型组用5.0 ng/mL TGF-β1干预24 h,圣草酚低剂量组、圣草酚中剂量组、圣草酚高剂量组分别用40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L圣草酚和5.0 ng/mL TGF-β1同时干预24 h,SB-431542组用10μmol/L SB-431542和5.0 ng/mL TGF-β1同时干预24 h。检测各组HSF细胞活力、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达水平、活性氧簇(ROS)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性,TGF-β1、α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(Co lⅢ)、基质金属蛋白酶2(MMP2)的mRNA表达量及TGF-β1的蛋白表达水平。检测对照组、模型组、圣草酚中剂量组HSF的Smad2、Smad3、磷酸化Smad2 (p-Smad2)、磷酸化Smad3 (p-Smad3)蛋白表达水平。结果 与对照组相比,模型组的HSF细胞活力及α-SMA蛋白表达水平增加,ROS含量增加而SOD活性降低,TGF-β1、α-SMA、ColⅠ、Co lⅢ和MMP2 mRNA表达量上调,TGF-β1、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3的蛋白表达量亦上调(P<0.05)。与模型组相比,圣草酚各剂量组和SB-431542组HSF细胞活力降低、ROS含量降低、SOD活性增强,且α-SMA、ColⅠ、Co lⅢ、MMP2的mRNA表达量和TGF-β1蛋白表达量下调,圣草酚中剂量组、圣草酚高剂量组和SB-431542组HSF细胞中α-SMA蛋白表达水平降低,圣草酚中剂量组及SB-431542组Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达量下调(P<0.05)。圣草酚低剂量组、圣草酚中剂量组、圣草酚高剂量组HSF细胞活力、α-SMA蛋白表达水平、ROS含量依次降低,SOD活性依次增强,α-SMA、ColⅠ、Co lⅢmRNA表达量依次降低(P<0.05)。结论 圣草酚可能通过抑制氧化应激反应及TGF-β1/Smad通路的活化,从而剂量依赖性地抑制TGF-β1诱导的HSF细胞纤维化。 展开更多
关键词 皮肤纤维化 圣草酚 人皮肤成纤维细胞 转化生长因子β1 氧化应激 转化生长因子β1/Smad信号通路
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基于光损伤皮肤成纤维细胞模型的鱼胶原蛋白肽修复性能研究
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作者 蒲春宏 王荣昌 +2 位作者 华中杰 张佳婵 陈朝 《日用化学工业(中英文)》 CAS 北大核心 2024年第11期1375-1381,共7页
鱼胶原蛋白肽(Fish collagen peptides,FCPs)是一类具备多种活性功能的多肽混合物。近几年研究表明,口服鱼胶原蛋白肽能够安全高效地作用于皮肤,发挥抗氧化、抑制黑色素形成、延缓衰老和抗光老化等功效。然而,现有鱼胶原蛋白肽的体外功... 鱼胶原蛋白肽(Fish collagen peptides,FCPs)是一类具备多种活性功能的多肽混合物。近几年研究表明,口服鱼胶原蛋白肽能够安全高效地作用于皮肤,发挥抗氧化、抑制黑色素形成、延缓衰老和抗光老化等功效。然而,现有鱼胶原蛋白肽的体外功效研究较少。该研究利用人皮肤成纤维细胞建立UVA诱导的光损伤模型,从细胞形态和细胞存活率两个方面研究鱼胶原蛋白肽对人皮肤成纤维细胞增殖能力的影响。通过测定鱼胶原蛋白肽处理细胞后,其中透明质酸、Ⅰ型胶原、弹性蛋白含量以及总抗氧化能力的变化来研究其抗氧化功效。另外对比分析细胞形态、细胞活力和关键代谢产物等的具体变化来研究鱼胶原蛋白肽对UVA诱导的光损伤细胞的修复作用。该研究为鱼胶原蛋白肽在皮肤光损伤修复领域提供了理论依据,为新型功能食品和胶原蛋白产品的开发与应用奠定了基础。 展开更多
关键词 鱼胶原蛋白肽 光损伤 人皮肤成纤维细胞 修复 抗氧化
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氧化三甲胺对皮肤成纤维细胞氧化损伤作用的影响及VC对其干预作用
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作者 孙斌 肖瀛 +4 位作者 俞苓 许豪杰 潘亮 周一鸣 刘小杰 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第11期152-162,共11页
本实验利用氧化三甲胺(trimethylamine oxide,TMAO)处理人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblasts,HSF),通过分析抗氧化性指标、炎症因子分泌水平、细胞胶原蛋白和基质金属蛋白酶水平以及相关基因在mRNA水平的变化规律,研究TMAO对HSF细... 本实验利用氧化三甲胺(trimethylamine oxide,TMAO)处理人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblasts,HSF),通过分析抗氧化性指标、炎症因子分泌水平、细胞胶原蛋白和基质金属蛋白酶水平以及相关基因在mRNA水平的变化规律,研究TMAO对HSF细胞氧化损伤的影响,阐释其对皮肤细胞衰老的作用。结果表明,TMAO处理能够显著升高HSF细胞内活性氧和丙二醛水平(P<0.05),并显著降低还原型谷胱甘肽含量、超氧化物歧化酶活力和总抗氧化能力(P<0.05)。通过逆转录实时荧光定量聚合酶链反应和酶联免疫吸附检测发现,TMAO处理能显著升高炎症因子肿瘤坏死因子-α、白介素-6、基质金属蛋白酶-1的mRNA水平,并降低胶原合成基因和诱导型一氧化氮氧合酶的mRNA转录水平,同时蛋白质免疫印迹分析结果表明p-p65蛋白的表达水平显著增加(P<0.05)。而VC能够干预TMAO诱导的HSF细胞氧化应激,减轻炎症和减少胶原流失。综上,TMAO对HSF细胞产生氧化应激,可能介导激活核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路,促进HSF细胞NF-κB磷酸化,诱导炎症反应,并降低胶原合成和加速胶原降解,从而可能促进皮肤细胞衰老。 展开更多
关键词 氧化三甲胺 人皮肤成纤维细胞 炎症因子 氧化损伤 细胞凋亡 VC
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静电纺纳米纤维纱线及其对细胞迁移和血管化的调控
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作者 王雅文 刘娜 +1 位作者 王元非 吴桐 《纺织学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第12期25-32,共8页
为探究纳米纤维纱线网格支架培养脂肪干细胞收集的条件培养基对创面修复过程中成纤维细胞和内皮细胞迁移以及血管化的调控作用,通过静电纺丝技术和光焊技术制备了大、中、小3种不同尺寸的纳米纤维纱线网格支架,并将其与脂肪干细胞共培... 为探究纳米纤维纱线网格支架培养脂肪干细胞收集的条件培养基对创面修复过程中成纤维细胞和内皮细胞迁移以及血管化的调控作用,通过静电纺丝技术和光焊技术制备了大、中、小3种不同尺寸的纳米纤维纱线网格支架,并将其与脂肪干细胞共培养提取条件培养基,用于培养内皮细胞和成纤维细胞。使用扫描电子显微镜、数码相机和红外热像仪观察网格支架的微观、宏观结构和焊接温度,并通过细胞迁移实验和体外成血管实验评价3种条件培养基对细胞行为的调控作用。结果表明:制备的3种纳米纤维纱线网格支架微观形貌一致,纳米纤维纱线直径为(257.69±36.87)μm,焊接温度为(39.83±3.07)℃;通过支架提取的条件培养基可促进成纤维细胞和内皮细胞的迁移及血管化,其中通过小网格支架提取的条件培养基对细胞迁移的促进效果更为明显,通过小网格和中网格支架提取的条件培养基对血管化的促进效果更明显。 展开更多
关键词 支架材料 静电纺丝 创面修复 内皮细胞 成纤维细胞 脂肪干细胞 细胞迁移 血管化
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小球藻生长因子对UVA诱导人皮肤成纤维细胞紫外损伤的保护作用研究
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作者 何亚玲 苏桂惠 +1 位作者 唐振洲 苏志维 《中国食品添加剂》 CAS 2024年第6期86-92,共7页
本研究通过苯酚-硫酸法、考马斯亮蓝法、紫外分光光度法对小球藻生长因子(Chlorella growth factor,CGF)中各营养成分进行含量测定;采用MTT法和酶联免疫吸附(ELISA)法分别测定CGF对紫外损伤的人皮肤成纤维细胞(HSF)的保护作用和胶原蛋... 本研究通过苯酚-硫酸法、考马斯亮蓝法、紫外分光光度法对小球藻生长因子(Chlorella growth factor,CGF)中各营养成分进行含量测定;采用MTT法和酶联免疫吸附(ELISA)法分别测定CGF对紫外损伤的人皮肤成纤维细胞(HSF)的保护作用和胶原蛋白相关因子的表达。结果表明核苷酸在CGF中占比为84.40%±0.73%。CGF预处理能显著减轻UVA对HSF细胞的增殖抑制作用,与模型组相比以50μg/mL浓度CGF处理可使HSF细胞活力提高75.05%,且在5~50μg/mL内存在一定的剂量依赖关系。ELISA实验结果发现CGF可提高HSF细胞中基质金属蛋白酶抑制酶-1(TIMP-1)、I型胶原蛋白(COL-I)的表达,降低基质金属蛋白酶-1(MMP-1)的表达。CGF是优异的外源性核苷酸营养物质,能有效减轻UVA引起的HSF细胞损伤,其作用可能与促进胶原蛋白的合成有关。 展开更多
关键词 小球藻生长因子 核苷酸含量 人皮肤成纤维细胞 紫外损伤模型 Ⅰ型胶原蛋白
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多技术联合治疗糖尿病足溃疡的疗效分析
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作者 卜伟冥 苏日跃 韦昌延 《糖尿病新世界》 2024年第18期171-173,177,共4页
目的探讨分析封闭式负压吸引+水胶体硫酸银敷料+外用重组人酸性成纤维细胞生长因子(recombinant human acidic fibroblast growth factor,Rb-FGF)+植皮术治疗糖尿病足溃疡的临床疗效。方法回顾性选取2020年1月—2023年10月钦州市第一人... 目的探讨分析封闭式负压吸引+水胶体硫酸银敷料+外用重组人酸性成纤维细胞生长因子(recombinant human acidic fibroblast growth factor,Rb-FGF)+植皮术治疗糖尿病足溃疡的临床疗效。方法回顾性选取2020年1月—2023年10月钦州市第一人民医院收治的96例糖尿病足溃疡患者的临床资料,按照不同治疗方案分为研究组(49例)与对照组(47例),研究组采用封闭式负压吸引+水胶体硫酸银敷料+Rb-FGF冲洗+植皮术,对照组采用封闭式负压吸引+水胶体硫酸银敷料+生理盐水冲洗+植皮术,分析比较两组患者住院时间、创面愈合时间、出院时愈合率及在治疗后的第3个月和第6个月的瘢痕评分。结果研究组住院时间、创面愈合时间均少于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。研究组出院时愈合率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后第3个月和第6个月,研究组的瘢痕评分均低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论封闭式负压吸引+水胶体硫酸银敷料+Rb-FGF+植皮术治疗可促进糖尿病足溃疡愈合、缩短创面愈合时间及住院时间。 展开更多
关键词 糖尿病足溃疡 负压吸引 水胶体硫酸银敷料 重组人酸性成纤维细胞生长因子 植皮术
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芦荟胶屏障修护功效研究
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作者 李腾基 杨洋 +3 位作者 郁晓艺 高业成 陈晶 丰时运 《广东化工》 CAS 2024年第18期51-55,共5页
初步探究芦荟胶的皮肤屏障修护功效和作用机制。通过体外细胞实验,研究芦荟胶对人永生化角质细胞和真皮成纤维细胞的细胞增殖和细胞迁移率的影响,并采用UVA紫外辐照损伤细胞模型,对活性氧自由基含量、皮肤屏障相关基因表达水平以及I型... 初步探究芦荟胶的皮肤屏障修护功效和作用机制。通过体外细胞实验,研究芦荟胶对人永生化角质细胞和真皮成纤维细胞的细胞增殖和细胞迁移率的影响,并采用UVA紫外辐照损伤细胞模型,对活性氧自由基含量、皮肤屏障相关基因表达水平以及I型胶原蛋白分泌进行检测;采用人体临床测试,基于仪器测量和受试者自评等方面对其进行功效评估。结果显示,添加1 mg/mL~4 mg/mL芦荟胶能促进角质细胞和成纤维细胞的细胞增殖和迁移(P<0.01),能显著提高经紫外损伤的细胞存活率,同时降低了细胞内ROS含量(P<0.01);较高浓度的芦荟胶能显著提高FLG和Cldn-1表达水平,促进I型胶原蛋白分泌(P<0.01);使用芦荟胶28天后,受试者皮肤泛红、脱屑、干燥度、敏感度、灼热感及紧绷感较使用前皆有改善;受试者在使用产品4~6天皮肤角质层含水量显著上升,皮肤经表皮失水率、皮肤血红素以及泛红区面积显著下降(P<0.05)。综上,芦荟胶具有屏障修护功效,可能通过促进表皮细胞增殖和细胞愈合,抑制ROS的产生,促进屏障基因表达和胶原蛋白分泌,从而减少表皮细胞的损伤和凋亡共同实现。 展开更多
关键词 芦荟胶 皮肤屏障 修护 角质细胞 成纤维细胞 人体临床测试
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红外线影响人皮肤成纤维细胞中c-Jun、Ⅰ型和Ⅲ型胶原的表达 被引量:7
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作者 刘平 杨荣丽 +4 位作者 苏慧 李林丽 宋健文 卢宁 刘钰泽 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期163-169,共7页
目的研究红外线对体外培养成纤维细胞(HSF)中c-Jun和Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响,为红外线引起光老化损伤的分子机制提供理论依据。方法提取原代皮肤成纤维细胞培养,成纤维细胞被分为对照组(无红外线照射)和实验组(红外线照射);用MTT检测各... 目的研究红外线对体外培养成纤维细胞(HSF)中c-Jun和Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响,为红外线引起光老化损伤的分子机制提供理论依据。方法提取原代皮肤成纤维细胞培养,成纤维细胞被分为对照组(无红外线照射)和实验组(红外线照射);用MTT检测各组细胞活性;用实时定量PCR和免疫细胞化学(ICC)方法检测各组c-Jun和Ⅰ、Ⅲ型胶原m RNA和蛋白的表达。结果MTT检测显示与对照组比较,实验组各组中红外线照射对HSF的增殖有不同程度的抑制作用;红外线照射下调Ⅰ型胶原m RNA和蛋白的表达,随着照射剂量的增加,Ⅰ型胶原的m RNA和蛋白表达下降越明显(P<0.01);红外线照射成纤维细胞12 h后Ⅲ型胶原m RNA和蛋白的表达都呈照射剂量依赖性下调(P<0.05,P<0.01),24 h后Ⅲ型胶原m RNA和蛋白的表达都呈照射剂量依赖性上调(P<0.05,P<0.01);红外线照射上调了c-Jun m RNA和蛋白的表达水平,随着照射剂量的增加,呈照射剂量依赖性(P<0.05,P<0.01)。结论红外线照射人皮肤成纤维细胞后上调c-Jun表达,抑制Ⅰ型胶原表达,干扰Ⅲ型胶原表达,这可能是其引发和促进皮肤光老化的发生机制之一。 展开更多
关键词 红外线 C-JUN Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原 人皮肤成纤维细胞
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组织工程化人工复合皮肤的构建 被引量:19
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作者 刘晋宇 侯立中 +1 位作者 颜炜群 杨同书 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2001年第4期235-239,共5页
目的 为皮肤缺失的移植提供具有生物活性的表皮、真皮的组织工程化人工复合皮肤。方法 将体外传代培养的表皮角朊细胞和真皮成纤维细胞分别接种在经冷冻干燥及戊二醛交联的 I型胶原基质网架的两侧 ,在液面下培养 1周后 ,改为气 -液界... 目的 为皮肤缺失的移植提供具有生物活性的表皮、真皮的组织工程化人工复合皮肤。方法 将体外传代培养的表皮角朊细胞和真皮成纤维细胞分别接种在经冷冻干燥及戊二醛交联的 I型胶原基质网架的两侧 ,在液面下培养 1周后 ,改为气 -液界面培养 ,动态观测人工皮肤光镜下组织学形态及电镜下超微结构。结果 人工复合皮肤具有表皮、真皮双层结构。培养过程中表皮逐步增殖、分化、发育 ,形成基底层、棘细胞层、颗粒层和角质层 ;真皮基质网架渐渐降解 ,并逐步被增殖的成纤维细胞及其所分泌的细胞外基质所取代 ,完成真皮构建。结论 利用组织工程技术体外构建人工复合皮肤 ,可用于皮肤缺失者的自体移植治疗 ,体外构建的复合人工皮肤可从根本上解决自体供皮不足 ,且细胞源于自体皮肤 ,排除了发生免疫排斥反应和疾病传播的风险 ,具有安全、有效。 展开更多
关键词 组织工程 人工皮肤 角朊细胞 成纤维细胞
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亚砷酸钠对人皮肤细胞增殖作用的影响 被引量:10
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作者 吴顺华 刘开泰 +3 位作者 杨晓燕 石玉瑚 信学雷 王国荃 《新疆医科大学学报》 CAS 2003年第1期6-8,共3页
目的:探讨亚砷酸钠对人皮肤细胞增殖作用的影响。方法:使用原代培养的人真皮成纤维细胞和表皮细胞 ,采用直接细胞计数法和 MTT法检测亚砷酸钠对两种细胞系生长的影响。 结果:成纤维细胞较表皮细胞易于培养 ;MTT法检测 ,不同剂量的亚砷... 目的:探讨亚砷酸钠对人皮肤细胞增殖作用的影响。方法:使用原代培养的人真皮成纤维细胞和表皮细胞 ,采用直接细胞计数法和 MTT法检测亚砷酸钠对两种细胞系生长的影响。 结果:成纤维细胞较表皮细胞易于培养 ;MTT法检测 ,不同剂量的亚砷酸钠与对照组比较 ,吸光度值均有提高 ,有剂量 -效应关系 (P <0 .0 1) ;0 .5~8.0 μm ol/ L 的亚砷酸钠对成纤维细胞有明显增殖作用 ;低浓度 (0 .8μmol/ L、1.6 μm ol/ L)对表皮细胞有明显的增殖作用 ,浓度高于 3.2 μm ol/ L 时 ,表皮细胞生长受抑制 ;10 .0 0 μmol/ L 亚砷酸钠对成纤维细胞有毒性作用。 结论 :无机砷诱导人皮肤细胞的增殖作用可能是引起慢性砷中毒皮肤损伤的重要原因 。 展开更多
关键词 亚砷酸钠 人成纤维细胞 表皮细胞 细胞增殖
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神经肽P物质诱导高糖条件下人皮肤成纤维细胞分泌MCP-1的分子机制 被引量:6
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作者 贾志刚 方勇 +4 位作者 姚敏 俞为荣 徐鹏 贾一韬 倪涛 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1302-1306,共5页
目的探讨神经肽P物质(SP)诱导高糖培养环境中的人皮肤成纤维细胞分泌单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的分子机制。方法采用高糖DMEM培养基培养人皮肤成纤维细胞,加入同一浓度(10 nmol/L)SP孵育不同时间,Western blotting检测细胞中核因子κB(... 目的探讨神经肽P物质(SP)诱导高糖培养环境中的人皮肤成纤维细胞分泌单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的分子机制。方法采用高糖DMEM培养基培养人皮肤成纤维细胞,加入同一浓度(10 nmol/L)SP孵育不同时间,Western blotting检测细胞中核因子κB(NF-κB)抑制蛋白α(IκBα)、磷酸化IκBα(p-IκBα)和磷酸化NF-κB亚单位p65(p-NF-κBp65)的表达,免疫荧光方法观测细胞p-NF-κBp65表达和转位情况。将高糖DMEM培养基培养人皮肤成纤维细胞分为对照组、SP组和SP+NF-κB抑制剂(MG132)组(以MG132预处理细胞60 min),Western blotting检测各组细胞内p-NF-κBp65的表达,ELISA方法测定细胞培养上清液中MCP-1的浓度。结果随着SP作用时间的延长,成纤维细胞IκBα的表达量显著减少,p-IκBα的表达量显著增加(P<0.05);同时p-NF-κBp65的表达量在SP作用后显著增加(P<0.05),并保持递增趋势;免疫荧光染色激光共聚焦显微镜观察证实SP作用后细胞胞核内p-NF-κBp65表达增强。与SP组比较,SP+MG132组细胞p-NF-κBp65表达及细胞培养上清液中MCP-1浓度均显著降低(P<0.05)。结论 SP促进人皮肤成纤维细胞分泌MCP-1的作用机制可能与NF-κB信号通路激活有关。 展开更多
关键词 P物质 人皮肤成纤维细胞 核因子κB 单核细胞趋化蛋白1
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纳米二氧化钛对人皮肤基底细胞癌和胚胎皮肤成纤维细胞的生物学效应 被引量:10
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作者 刘云波 孟金萍 +3 位作者 孙淑华 王艳蓉 胡季帆 吕素军 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期180-182,183,共4页
目的探讨纳米粒子二氧化钛(TiO2)对体外培养的人皮肤基底细胞癌A431和人胚胎皮肤成纤维细胞的生物学效应。方法TiO2处理体外培养的人皮肤基底细胞癌A431(human skin Basal cell carcinoma,A431)和人胚胎皮肤成纤维细胞(human embryo ski... 目的探讨纳米粒子二氧化钛(TiO2)对体外培养的人皮肤基底细胞癌A431和人胚胎皮肤成纤维细胞的生物学效应。方法TiO2处理体外培养的人皮肤基底细胞癌A431(human skin Basal cell carcinoma,A431)和人胚胎皮肤成纤维细胞(human embryo skin Fibroblast,ESF),MTT法测定细胞生长活性,计数集落形成和荧光染色检测细胞凋亡情况。结果纳米TiO2显著抑制体外培养的人皮肤基底细胞癌A431的集落形成,对其生长活性具有显著负相关性(P<0.05);能够抑制人胚胎皮肤成纤维细胞(ESF)的集落形成,但对其生长活性的抑制无相关性(P>0.05)。结论纳米TiO2可影响体外培养的人皮肤基底细胞癌A431的生长、集落形成,并可导致细胞凋亡。 展开更多
关键词 纳米TIO2 皮肤基底癌细胞A431 ESF细胞 生物学特性
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黄芪甲苷对紫外线诱导皮肤成纤维细胞表达TGFβ RⅡ与Smad7的影响 被引量:8
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作者 闫宁 陈斌 +3 位作者 李燃 李双凤 毕志刚 张银娣 《中国美容医学》 CAS 2011年第2期225-228,共4页
目的:探讨黄芪甲苷对紫外线诱导皮肤成纤维细胞TGFβRⅡ、Smad7mRNA以及蛋白质表达的影响。方法:培养原代人皮肤成纤维细胞,UVA及UVB分别照射人成纤维细胞,黄芪甲苷进行干预,MTT法检测细胞增殖活性,以ELISA法检测Smad7的生成量,半定量RT... 目的:探讨黄芪甲苷对紫外线诱导皮肤成纤维细胞TGFβRⅡ、Smad7mRNA以及蛋白质表达的影响。方法:培养原代人皮肤成纤维细胞,UVA及UVB分别照射人成纤维细胞,黄芪甲苷进行干预,MTT法检测细胞增殖活性,以ELISA法检测Smad7的生成量,半定量RT-PCR法检测TGFβRⅡ、Smad7的mRNA表达,Western blot法检测TGFβRⅡ的蛋白表达。结果:不同浓度的黄芪甲苷干预组与正常对照组相比,成纤维细胞增殖活性随浓度增加而增强,药物浓度为40μg/ml时最显著(P<0.05);UV辐射组与正常组相比,细胞上清液中Smad7蛋白含量明显增高,细胞内TGFβRⅡ的mRNA和蛋白表达均下降,Smad7mRNA表达增强;黄芪甲苷干预后,细胞上清液中Smad7蛋白含量下降,细胞内TGFβRⅡ的mRNA以及蛋白表达水平明显增高,Smad7mRNA表达下降(P<0.05)。结论:黄芪甲苷可能通过提高成纤维细胞的增殖活性,上调TGFβRⅡmRNA、蛋白水平以及下调Smad7mRNA、蛋白水平的表达来对抗紫外线抑制TGF-β/Smad信号通路的传导,缓解皮肤光老化进程。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 人成纤维细胞 TGFβRⅡ SMAD7
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人皮肤成纤维细胞原代培养及生物学特性 被引量:11
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作者 王晓华 王扬 +2 位作者 蒋涛 付立业 姜又红 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1041-1044,共4页
目的探索和建立人皮肤成纤维细胞原代培养的方法,为皮肤成纤维细胞在临床医学中的应用提供可靠的科学依据。方法胰蛋白酶消化法分离培养人皮肤成纤维细胞;细胞生长曲线及MTT法测定细胞增殖能力;流式细胞仪测定细胞生长周期及细胞增殖指... 目的探索和建立人皮肤成纤维细胞原代培养的方法,为皮肤成纤维细胞在临床医学中的应用提供可靠的科学依据。方法胰蛋白酶消化法分离培养人皮肤成纤维细胞;细胞生长曲线及MTT法测定细胞增殖能力;流式细胞仪测定细胞生长周期及细胞增殖指数;倒置显微镜下观察成纤维细胞生长状态;HE染色观察细胞爬片下的形态及着色;免疫组织化学染色观察成纤维细胞中间丝波形蛋白;电子显微镜下观察成纤维细胞超微结构。结果体外用胰蛋白酶消化法建立了人皮肤成纤维细胞;传5代内细胞及传5代内冻存复苏后人皮肤成纤维细胞增殖能力均很强;倒置镜下观察、HE染色、波形蛋白免疫组化染色及电镜下观察鉴定培养细胞的形态及生物学特性符合成纤维细胞。结论本研究确立了体外人皮肤成纤维细胞原代培养。 展开更多
关键词 皮肤 原代培养 成纤维细胞 细胞增殖指数 细胞形态学
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蚯蚓小分子多肽提取物对人皮肤细胞活性及胶原分泌的影响 被引量:3
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作者 刘廷强 严泽民 +2 位作者 侯冬梅 周华峰 段明星 《日用化学工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期168-172,共5页
通过体外细胞模型,考察蚯蚓小分子多肽提取物(LMWPEE)对正常成人皮肤成纤维细胞(HSF)和正常成人表皮角质形成细胞(HEK)的细胞活性以及对HSF分泌I型前胶原蛋白的影响。结果表明,与空白组相比,质量浓度为25—400 mg/L的LMWPEE对... 通过体外细胞模型,考察蚯蚓小分子多肽提取物(LMWPEE)对正常成人皮肤成纤维细胞(HSF)和正常成人表皮角质形成细胞(HEK)的细胞活性以及对HSF分泌I型前胶原蛋白的影响。结果表明,与空白组相比,质量浓度为25—400 mg/L的LMWPEE对2种细胞的细胞活性都具有显著促进作用,但对2种细胞的细胞周期并没有明显的影响。LMWPEE对HSF细胞活性的促进作用存在一定的剂量一效应关系,而促进HEK细胞活性的较佳质量浓度为50 mg/L。此外,LMWPEE在质量浓度为200和400 mg/L时,可显著促进HSF分泌I型前胶原蛋白,较空白组分别提高了31%(P〈0.05)和51%(P〈0.01)。 展开更多
关键词 化妆品添加剂 蚯蚓 小分子多肽 人皮肤成纤维细胞 人表皮角质形成细胞 I型前胶原蛋白
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紫外线及黄芪甲苷对人皮肤成纤维细胞E3连接酶Hrd1表达的影响 被引量:5
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作者 钱雯 陈斌 +1 位作者 蒋辉莉 苏东明 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期201-205,共5页
目的:探讨紫外线(UV)对人皮肤成纤维细胞中E3连接酶Hrd1表达的影响及黄芪甲苷的干预作用。方法:分离培养人原代成纤维细胞,分别以10J/cm^2UVA和30mJ/cm^2 UVB进行照射,黄芪甲苷进行干预处理。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓... 目的:探讨紫外线(UV)对人皮肤成纤维细胞中E3连接酶Hrd1表达的影响及黄芪甲苷的干预作用。方法:分离培养人原代成纤维细胞,分别以10J/cm^2UVA和30mJ/cm^2 UVB进行照射,黄芪甲苷进行干预处理。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度的黄芪甲苷对成纤维细胞增殖活性的影响;荧光定量PCR法检测成纤维细胞中Hrd1的mRNA表达;免疫组化法观察成纤维细胞Hrd1的蛋白表达。结果:MTT结果示:在适宜浓度下,黄芪甲苷对体外培养的成纤维细胞有显著的促增殖作用,药物浓度为10、20、30mg/L时最为明显(P<0.001);荧光定量PCR结果示:UVA、UVB照射组成纤维细胞Hrd1 mRNA表达量明显高于正常对照组,而黄芪甲苷可显著抑制UV辐射后成纤维细胞中Hrd1的表达(P<0.001);免疫组化结果示:UV照射(UVA或UVB)可增加Hrd1的蛋白表达,黄芪甲苷可显著抑制UV照射后成纤维细胞中Hrd1的蛋白表达。结论:UV辐射可以上调人皮肤成纤维细胞中E3连接酶Hrd1的表达,而黄芪甲苷对这一现象具有逆转作用。 展开更多
关键词 紫外线 人皮肤成纤维细胞 E3连接酶 羟甲基戊二酰辅酶A还原酶降解蛋白1 黄芪甲苷
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Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc基因重编程人皮肤成纤维细胞的实验研究 被引量:3
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作者 沙杭 艾民 +3 位作者 张清华 蒋知新 高毅 卢海 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第49期9-11,共3页
目的探讨利用Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc基因能否将人皮肤成纤维细胞(HSF)编程为诱导性多潜能干细胞(iPS)。方法①利用组织块贴壁法原代分离培养HSF细胞。②包装生产携带Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc基因的逆转录病毒上清液感染HSF细胞。③病... 目的探讨利用Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc基因能否将人皮肤成纤维细胞(HSF)编程为诱导性多潜能干细胞(iPS)。方法①利用组织块贴壁法原代分离培养HSF细胞。②包装生产携带Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc基因的逆转录病毒上清液感染HSF细胞。③病毒感染后HSF细胞培养,镜下观察HSF细胞形态学变化。④应用细胞碱性磷酸酶(AP)染色检测细胞基因表达量和体内分化畸胎瘤实验对细胞生物学特性进行鉴定。结果原代HSF细胞编程后形态类似于胚胎干细胞,细胞AP染色阳性,内源多能基因Oct4、Sox2、Nanog、Rex1表达量增高,细胞体内可分化为畸胎瘤。结论利用Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc基因可将HSF细胞编程为iPS细胞。 展开更多
关键词 脐带基质间充质细胞 细胞编程 造血干细胞 诱导性多潜能干细胞
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沙枣总酚抗辐射活性研究 被引量:3
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作者 杨建华 闫瑶 +2 位作者 胡君萍 柳惠斌 热娜.卡斯木 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期2120-2122,共3页
目的对沙枣总酚的辐射防护作用进行研究。方法采用不同剂量X射线照射人皮肤成纤维细胞(Human Skin Fibroblasts,HSF),构建辐射损伤模型,以MTT法检测不同剂量沙枣总酚对HSF增殖的影响。结果 X射线对HSF的增殖抑制作用与辐射剂量呈正相关... 目的对沙枣总酚的辐射防护作用进行研究。方法采用不同剂量X射线照射人皮肤成纤维细胞(Human Skin Fibroblasts,HSF),构建辐射损伤模型,以MTT法检测不同剂量沙枣总酚对HSF增殖的影响。结果 X射线对HSF的增殖抑制作用与辐射剂量呈正相关。与2、4、8 Gy辐射组比较,16 Gy辐射组增殖抑制作用有显著差异(P<0.01)。采用16 Gy一次性X射线照射构建辐射损伤模型,模型组与不同剂量沙枣总酚组在2,24,48 h(除100μg/ml-48 h组以外)时段均有显著统计学差异(P<0.01)。照射后2 h,辐射防护作用呈现剂量依赖性,但各剂量给药组的辐射防护作用均随辐射后时间延长而减弱。结论 X射线辐射对HSF具有明显损伤作用,而沙枣总酚对其具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 沙枣 总酚 辐射防护 人皮肤成纤维细胞
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