靶向VEGF的shRNA对皮肤鳞癌A431细胞的作用

目的在皮肤鳞癌细胞(A431)中下调VEGF mRNA和VEGF蛋白的表达,观察其对A431细胞增殖、迁移和黏附的影响。方法构建psVEGF-shRNA真核表达质粒(psilencer-VEGF1-shRNA,VEGF-s1;psilencer-VEGF2-shR-NA,VEGF-s2)干预A431细胞,同时构建含随机靶序列的阴性对照表达质粒(psilencer-Target-off-shRNA,T-off)。RT-QPCR,Western blot和ELISA检测细胞内VEGFmRNA和蛋白表达;CCK-8法检测细胞活性;流式细胞仪检测细胞周期百分比与细胞凋亡;划痕试验和Transwell小室试验检测细胞二维、三维空间的迁移能力;FN黏附试验检测细胞黏附潜能。结果 A431细胞转染psVEGF-shRNA后活性降低,细胞周期发生阻滞,与对照组相比细胞比率显著增加,在G1期明显降低,在S期伴细胞调亡增加。细胞内VEGFmRNA和VEGF蛋白表达下降,细胞迁移和黏附潜能力均受到抑制(P<0.05)。结论 VEGF是人皮肤鳞癌A431细胞生长相关的重要基因,干扰VEGF基因能有效抑制A431细胞的增殖、迁移和黏附。

去甲斑蝥素对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞侵袭转移能力的影响

目的探讨去甲斑蝥素(Norcantharidin,NCTD)对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞侵袭、转移的影响及可能的分子机制。方法 MTT法检测NCTD对A431细胞生长增殖的影响,Transwell小室、细胞黏附实验、划痕实验等方法检测药物对A431细胞侵袭、黏附和迁移能力的影响,Western blot法检测药物作用后细胞中MMP-2、MMP-9、VEGF蛋白水平的表达变化。结果 MTT实验显示,NCTD作用24 h,A431细胞的生长增殖能力受到明显抑制,与对照组比较,40.0μmol·L-1NCTD组的抑制率为(45.38±2.75)%(P<0.05);Transwell实验、细胞黏附、划痕实验显示,经20.0,40.0μmol·L-1NCTD作用细胞24 h后,与对照组相比,用药组细胞的侵袭、黏附、迁移能力均有不同程度的下降,其抑制率呈剂量效应(P<0.05,P<0.01);Western blot实验表明,A431细胞中VEGF、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平明显下调(P<0.05)。结论 NCTD能显著地抑制A431细胞的生长增殖、侵袭、黏附、迁移能力,其机制可能与其能下调VEGF、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平相关。

去甲斑蝥素诱导人皮肤鳞状细胞癌A431细胞凋亡作用

目的探讨去甲斑蝥素(Norcantharidin,NCTD)诱导人皮肤鳞状细胞癌A431细胞凋亡作用及其相关分子机制。方法体外培养A431细胞,分为对照组和NCTD低、高剂量组(20,40μmol·L^(-1))。采用MTT法检测对细胞增殖的抑制作用;Annexin V/PI染色法检测细胞凋亡;试剂盒检测细胞活性氧(ROS)水平、丙二醛(MDA)含量、线粒体膜电位(MMP)变化、Caspase-3及Caspase-9酶活性变化;Western Blot法检测对细胞Bcl-2及Bax蛋白表达水平的影响。结果采用NTCD处理A431细胞48 h,与对照组相比,NCTD低、高剂量组均能抑制细胞增殖能力(P<0.05),并明显诱导细胞凋亡(P<0.05),提高细胞内的ROS水平(P<0.05,P<0.01)和MDA含量(P<0.05,P<0.01),降低细胞MMP(P<0.05,P<0.01)。同时,NTCD可以抑制Bcl-2蛋白表达及上调Bax蛋白表达,并能够明显升高细胞的Caspase-3及Caspase-9酶活性。结论 NCTD可能通过提高细胞内ROS水平的途径诱导A431细胞发生凋亡。

基于PI3K/Akt信号通路探讨葡萄籽原花青素对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞凋亡的作用研究

目的基于PI3K/Akt信号通路探讨葡萄籽原花青素对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞凋亡的影响。方法体外培养人皮肤鳞状细胞癌A431细胞,用不同浓度的葡萄籽原花青素(5、10、20、40、80μg/mL)处理24、48、72小时,MTT法检测各组细胞的活力;蛋白免疫印迹法(western blot,WB)检测cleaved caspase-3蛋白的表达及PI3K/Akt磷酸化变化。使用PI3K激活剂740-Y-P或Akt激活剂SC79处理后,观察对细胞存活率和PI3K/Akt蛋白磷酸化的影响。结果与正常对照组比较,葡萄籽原花青素组(5、10、20、40、80μg/mL)处理24、48、72小时后细胞活力显著下降(P<0.01),呈浓度、时间依赖性。Western blot结果显示,与正常对照组比较,葡萄籽原花青素组(40、80μg/mL)cleaved caspase-3蛋白表达显著增加(P<0.01),PI3K/Akt通路蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.01)。与葡萄籽原花青素组比较,740-Y-P联合用药组、SC79联合用药组PI3K/Akt通路蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.05),细胞相对存活率显著增加(P<0.01)。结论葡萄籽原花青素可能通过抑制PI3K/Akt信号通路诱导人皮肤鳞状细胞癌A431细胞凋亡。

葡萄籽原花青素对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖和凋亡的影响

目的:明确葡萄籽原花青素(GSP)对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖和凋亡的影响。方法:体外培养A431细胞,用不同浓度的GSP(5、10、20、40、80μg/mL)处理,采用MTT实验和克隆形成实验检测细胞活力和增殖能力,Western blot检测细胞通路PI3K/Akt/GSK-3β信号转导通路蛋白的表达。结果:随着GSP浓度增加,A431细胞活力及细胞克隆逐渐下降,细胞凋亡逐渐增加。GSP处理后A431细胞中p-PI3K、p-Akt和p-GSK-3β表达水平明显降低。结论:GSP可以诱导A431细胞凋亡和抑制A431细胞增殖,其机制可能与抑制PI3K/Akt/GSK-3β信号通路活化有关。

槲皮黄酮通过Sphk2抑制人皮肤鳞状细胞癌A431细胞的增殖

目的:研究槲皮黄酮(Quercetin,Qu)对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖活性的影响。方法:采用CCK8法、Western blot实验和流式细胞术检测不同浓度下(10、50、100、200μg/mL)A431细胞活力、增殖及凋亡相关指标;Western blot检测Qu对A431细胞中Sphk2信号通路的影响。结果:10、50、100、200μg/mL Qu作用96 h后,细胞OD值分别为(0.654±0.098)、(0.527±0.089)、(0.412±0.076)、(0.309±0.054);细胞活力分别为(81.3±4.6)%、(56.3±4.9)%、(37.4±4.2)%、(19.4±3.6)%;细胞凋亡率分别为(6.43±1.09)%、(14.77±1.26)%、(21.30±1.36)%、(29.84±1.26)%。Qu呈浓度依赖性的抑制细胞中Sphk2蛋白表达,且Qu+Sphk2 mimics组细胞活力明显高于于Qu,细胞凋亡率明显低于Qu组(P s<0.05)。结论:Qu可能通过抑制Sphk2信号通路降低人皮肤鳞状细胞癌细胞的增殖活性。

萝卜硫素通过下调Cox-2/Akt/GSK3β信号传导抑制人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖

目的:明确萝卜硫素对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株增殖、凋亡的影响及其对Cox-2/Akt/GSK3β信号传导相关蛋白水平的影响。方法:体外培养皮肤鳞状细胞癌A431细胞株,分为不同剂量(30μM,60μM,120μM)萝卜硫素组、单纯顺铂组及顺铂+萝卜硫素组,采用CCK8法、流式细胞术分别检测A431细胞相对存活率及凋亡率,Western Blot检测了A431细胞中Survivin、Casepase-3、Cox-2、Akt、p-Akt、GSK3β及p-GSK3β蛋白的表达水平。结果:与对照组比较,60μM及120μM萝卜硫素组、单纯顺铂组及顺铂+萝卜硫素组细胞相对存活率显著降低(均P<0.05),细胞凋亡率显著增高(均P<0.05),Survivin、Cox-2、p-Akt、p-GSK3β蛋白表达水平显著降低(均P<0.05),而Caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.05);120μM萝卜硫素组与顺铂组比较,细胞相对存活率、细胞凋亡率,Survivin、Cox-2、p-Akt、p-GSK3β蛋白表达水平及Caspase-3蛋白表达,无明显统计学差异(P>0.05)。结论:萝卜硫素可通过诱导A431细胞凋亡、抑制细胞增殖发挥抗肿瘤作用,其机制可能与抑制Cox-2/Akt/GSK3β信号通路活化有关。

人类乳头瘤病毒与脆性组氨酸三联体基因蛋白在皮肤鳞状细胞癌中的作用

目的探讨人类乳头瘤病毒(HPV)和脆性组氨酸三联体基因(FHIT)蛋白在皮肤鳞状细胞癌(SCC)中的作用及其之间的关系。方法用免疫组化SP法检测SCC和癌旁组织皮损中HPV及FHIT蛋白的表达。结果HPV和FHIT蛋白在癌旁正常皮肤鳞状上皮组织、非典型增生组织、原位癌及浸润癌组织中的表达具有明显差异性(P<0.05);且FHIT蛋白在分化不同的肿瘤组织表达具有差异性(P<0.01);HPV和FHIT蛋白在肿瘤组织中的表达呈负相关。结论HPV和FHIT共同参与了SCC的发生,FHIT表达状况与SCC的分化程度有关。

高迁移率族蛋白N2抑制口腔鳞状细胞癌增殖作用的体外研究

目的以人口腔鳞状细胞癌细胞株Tca8113为实验模型,初步探讨高迁移率族蛋白N2(HMGN2)抗口腔鳞状细胞癌的作用。方法大量培养重组人HMGN2表达载体大肠杆菌BL21,用异丙基-1-硫代-β-呋喃半乳糖苷(IPTG)诱导HMGN2的表达,产物用B-PER GST Fusion Protein Purification Kit进行纯化。在细胞培养基中加入不同质量浓度的HMGN2,通过MTT、Hoechst 33342荧光染色、流式细胞术和Western-blot法检测其凋亡效果及抗凋亡的分子机制。结果经MTT检测证明HMGN2能显著抑制Tca8113细胞的生长,通过Hoechst 33342荧光染色、流式细胞术和Western-blot检测证明HMGN2能使Tca8113的细胞形态发生改变,并且能使Tca8113细胞阻滞于细胞周期的S期,促进Tca8113细胞凋亡。结论 HMGN2可以促进人口腔鳞状细胞癌细胞的凋亡。

雷公藤内酯醇对人口腔鳞状细胞癌细胞株Tca8113作用的实验研究

目的观察雷公藤内酯醇对人口腔鳞状细胞癌细胞株Tca8113的抑制作用,并与传统化疗药物顺铂的作用相比较,评价其作为抗头颈部恶性肿瘤药物的价值。方法噻唑蓝比色法检测雷公藤内酯醇和顺铂对Tca8113增殖的抑制作用,形态学观察经药物作用后细胞的生长情况。结果雷公藤内酯醇对Tca8113的增殖有明显抑制作用,呈量-效、时-效关系;较小浓度的雷公藤内酯醇即可产生较好的抑制效果,作用小于7 d时与顺铂相当,7 d时0.001 mg.L-1抑制率达60%,0.01 mg.L-1抑制率达90%,显著优于顺铂(P<0.05);1、3、5 d作用点时,在大于0.1 mg.L-1时顺铂效果优于雷公藤内酯(P<0.05),7 d时两者差异无统计学意义;各个作用点雷公藤内酯醇的50%抑制浓度均小于顺铂。结论雷公藤内酯醇对人口腔鳞状细胞癌细胞株Tca8113有明显的抑制作用,呈量-效、时-效关系,且在较低浓度和较长时间作用下其抑制率明显高于顺铂。

尼美舒利对人喉鳞癌Hep-2细胞祼鼠移植瘤CD44和MMP-7表达的影响

目的探讨尼美舒利对喉鳞状细胞癌裸鼠皮下移植模型的抑瘤作用及机制。方法建立人喉鳞癌Hep-2细胞株裸鼠移植瘤模型,应用尼美舒利处理裸鼠,观察肿瘤生长情况并绘制生长曲线,免疫组织化学技术检测移植瘤组织中COX-2、CD44和MMP-7蛋白表达,RT-PCR技术检测移植瘤组织中COX-2、CD44和MMP-7 mRNA表达情况。结果与对照组相比,治疗组肿瘤体积增长较对照组缓慢,体积抑瘤率为63.36%,重量抑瘤率达51.81%,肿瘤体积和重量均明显低于对照组(P均<0.05)。实验组和对照组治疗前后裸鼠体重增长值差异无统计学意义(P>0.05)。实验组COX-2、CD44和MMP-7蛋白及mRNA表达明显低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论尼美舒利可有效抑制人喉鳞癌细胞系Hep-2裸鼠移植瘤的生长,其机制可能与抑制COX-2、CD44及MMP-7表达有关。

白细胞介素7基因转染口腔癌细胞株的免疫调节效应的研究

目的:探讨IL-7基因转染人舌鳞癌Tca8113细胞株的免疫调节效应。方法:将已构建的原核/真核表达载体pBK-CMV/IL-7转染到癌细胞株中,采用MTT法检测转染前后肿瘤细胞培养上清对鼠脾细胞增殖的影响;ELISA法检测细胞培养上清转移生长因子β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)和IL-10的浓度。将pPK-CMV/IL-7癌细胞株移植于小鼠腹腔,观察肿瘤细胞的成瘤性;并采用MTT法检测其NK杀伤活性。结果:IL-7基因转染癌细胞株的培养上清对鼠脾细胞的增殖抑制作用与对照组比较显著下降(P<0.05),并且IL-7基因转染的肿瘤细胞产生TGF-β1、VEGF和IL-10三种免疫抑制因子明显降低(P<0.05);IL-7基因转染组鼠腹腔瘤结节明显小于对照组(P<0.05);NK的杀伤活性与对照组比较,具统计学差异(P<0.05)。结论:IL-7基因转染人舌鳞癌细胞株具有抑瘤作用,其机理可能是通过降低肿瘤细胞产生免疫抑制因子,进而促进淋巴细胞增殖,提高NK的杀伤活性。

胡椒碱通过Keap1/Nrf2/ARE通路促进皮肤鳞状细胞癌细胞凋亡

目的探讨胡椒碱对人皮肤鳞状细胞癌细胞的功能影响及相关作用机制。方法用不同浓度梯度的胡椒碱处理人皮肤鳞状细胞癌细胞(A431和SCL-1)24 h或48 h后,检测对细胞存活率的影响;A431和SCL-1细胞单独用50μmol·L^(-1)和100μmol·L^(-1)胡椒碱处理,或先转染红系衍生的核因子2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)干扰RNA或Kelch样ECH相关蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)过表达载体pcDNA-Keap1后再用100μM胡椒碱进行诱导处理。Transwell和流式细胞仪分别检测细胞侵袭和凋亡;qPCR检测Keap1/Nrf2/抗氧化反应元件(antioxidant response elements,ARE)信号通路中Keap1、Nrf2和醌氧化还原酶1(NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1,NQO1)的mRNA水平;Western blot检测B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)、Keap1、Nrf2和NQO1蛋白表达水平。结果在0μmol·L^(-1)到300μmol·L^(-1)胡椒碱浓度梯度内,随着胡椒碱浓度和处理时间的增加,A431和SCL-1细胞存活率下降;与control组相比,50μmol·L^(-1)和100μmol·L^(-1)的胡椒碱处理细胞后,细胞活力和侵袭力减弱、凋亡率增加、Caspase-3的活性增加、Bax/Bcl-2比值升高、Keap1的mRNA和蛋白表达被抑制、Nrf2和NQO1的mRNA水平升高,N-Nrf2和NQO1的蛋白表达增加;转染si-Nrf2或pcDNA-Keap1后,逆转胡椒碱对细胞活力和侵袭能力的抑制、凋亡的促进及Keap1/Nrf2/ARE通路的激活作用。结论胡椒碱激活Keap1/Nrf2/ARE通路促进人皮肤鳞状细胞癌细胞的凋亡。

维甲酸对肺鳞癌细胞株增殖分化的影响

用 5× 10 -6mol·L-1浓度的全反式维甲酸 (ATRA)作用于人肺鳞癌细胞株 (TUL细胞 ) ,检测细胞生长曲线 ;用MTT法检测细胞生长抑制率 ;用3H TdR掺入法测细胞DNA合成情况 ;透射电镜下观察细胞超微结构改变 ;并观察裸鼠成瘤情况。结果显示 :与对照组比较 ,经ATRA作用后 ,TUL细胞生长速度减慢 ,细胞生长曲线平坦 ,细胞生长抑制率为 42 3 % ,3H TdR掺入率明显减低 (P <0 .0 1) ,细胞DNA合成减少 ,透射电镜观察发现 ,TUL细胞呈良性分化 ,TUL细胞致瘤性明显降低。提示ATRA能抑制TUL细胞增殖 ,诱导分化 。

皮肤鳞状细胞癌患者人乳头瘤病毒感染的流行病学分析

目的分析皮肤鳞状细胞癌患者人乳头瘤病毒(HPV)感染的现状以及分布规律,探讨HPV感染与皮肤鳞状细胞癌发生的关系。方法采用多聚酶链式反应(PCR)技术对290例经过组织病理学诊断为皮肤鳞状细胞癌患者的组织标本进行HPV-DNA检测,主要检测型别为6、16、33。结果 290例皮肤鳞状细胞癌患者中,HPV阳性196例,HPV感染率为63.23%,男性HPV感染率为68.37%,女性为31.63%,差异无统计学意义(P>0.05)。高分化组(Ⅰ~Ⅱ级)感染率为67.87%,低分化(Ⅲ~Ⅳ级)感染率为47.38%,差异有统计学意义(P<0.05)。头面部、颈部、四肢、躯干以及生殖器和腹股沟部的HPV感染率分别为47.96%、26.53%、7.14%、4.08%、14.29%,不同发病部位的HPV感染率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。共有57例检出高危型(HPV16、33)感染,53例为低危型(HPV6)感染。结论 HPV感染与皮肤鳞状细胞癌有明显相关性。

三氧化二砷对人舌鳞癌细胞CAL-27侵袭能力的影响

目的检测三氧化二砷对人舌鳞癌细胞CAL-27体内、外侵袭能力的影响并探讨其相关作用机制。方法体外采用黏附实验、划痕实验、Transwell侵袭实验、免疫荧光染色和蛋白质印迹法检测三氧化二砷对CAL-27细胞黏附、迁移及侵袭能力的影响;体内采用免疫组织化学和蛋白质印迹法检测三氧化二砷对裸鼠移植瘤中CD44和基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9表达的影响。结果三氧化二砷作用后,实验组CAL-27细胞的黏附、迁移及侵袭能力明显低于对照组(P<0.05),细胞骨架微丝解聚,微管结构模糊、紊乱,MMP-2和MMP-9的表达下降;三氧化二砷降低了裸鼠移植瘤中CD44、MMP-2和MMP-9的表达。结论低浓度的三氧化二砷可降低人舌鳞癌细胞CAL-27细胞黏附能力,改变细胞骨架排列,下调CD44、MMP-2和MMP-9的表达,进而抑制癌细胞的侵袭能力。

miRNA-25对人食管鳞状细胞癌细胞株TE1增殖的影响

目的:探讨过表达/沉默微小RNA-25(microRNA-25,miRNA-25)对人食管鳞状细胞癌细胞株TE1增殖能力的影响及其作用机制。方法:RT-PCR检测各临床样品组织中miRNA-25的表达水平。建立miRNA-25过表达/沉默的TE1细胞株,采用CCK-8法、Brd U实验和流式细胞术检测TE1细胞增殖能力的变化及细胞周期状态;Western blot法和RT-PCR法检测细胞周期调控因子细胞周期蛋白E1(cyclin E1)和细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)的蛋白与mRNA表达水平。结果:miRNA-25在食管黏膜组织中具有特异性表达并在TE1细胞中呈高表达。CCK-8法和Brd U实验结果显示过表达miRNA-25的TE1细胞的增殖能力显著增加(P<0.05),而沉默miRNA-25抑制TE1细胞的增殖;流式细胞术检测结果显示过表达miRNA-25可明显促进TE1细胞从G0/G1期向S期转换,沉默miRNA-25则抑制其转换。同时Western blot和RT-PCR实验结果显示过表达miRNA-25后,cyclin E1和CDK2的蛋白和mRNA表达水平均显著增加(P<0.05),沉默miRNA-25后则显著减少(P<0.05)。结论:miRNA-25能够促进人食管鳞状细胞癌细胞株TE1的增殖,其作用机制可能与促进细胞周期转换及上调cyclin E1和CDK2的表达水平有关,提示miRNA-25可作为治疗食管鳞状细胞癌的一个潜在靶点。

α亚族趋化因子受体3在人舌鳞癌细胞株的表达及其配体干扰素诱导蛋白-10对CAL-27细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨α亚族趋化因子受体3(CXC-chemokine receptor 3,CXCR3)在不同人舌鳞癌细胞株的表达以及其配体干扰素诱导蛋白-10(interferon induced protein 10,IP-10)对人舌鳞癌细胞株CAL-27增殖和凋亡的影响。方法采用蛋白印迹法和免疫荧光染色对3种人舌鳞癌细胞株(CAL-27、UM-1、Tca-8113)IP-10的相应受体CXCR3的表达进行检测。CAL-27细胞被分为3个实验组和1个对照组,3个实验组根据IP-10的刺激浓度,分为10 ng/mL组、20 ng/mL组、40 ng/mL组,对照组不予刺激。12 h、24 h、48 h时检测4组细胞的增殖;24 h时用流式细胞仪检测细胞的凋亡。结果 CXCR3在3种人舌鳞癌细胞株均有表达,并且CXCR3在3株细胞的胞膜及胞质内均有染色。和对照组相比,12 h、24 h时,3种浓度的IP-10均能够促进CAL-27细胞增殖(P<0.05);在48 h时,只有40 ng/mL的IP-10能够促进CAL-27细胞增殖(P<0.05),10 ng/mL、20 ng/mL的IP-10对CAL-27细胞的增殖无促进作用(P>0.05)。在24 h时,对照组、10 ng/mL组、20 ng/mL组和40 ng/mL组的细胞凋亡率分别为(0.053 3±0.472 6)%、(3.236 7±0.940 0)%、(4.516 7±1.115 4)%和(3.363 3±0.571 2)%,3种浓度IP-10均能够促进CAL-27细胞的凋亡(P<0.05),但3个实验组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论CXCR3在3种人舌鳞癌细胞株的胞膜及胞质内均有表达;IP-10既能促进CAL-27细胞的增殖,又能促进其凋亡。随着时间的延长,IP-10的促增殖作用减弱,而这种减弱可能是由IP-10的促凋亡作用的逐步发挥所引起的。

依曲替酸诱导皮肤鳞状细胞癌细胞系SCL-1凋亡及其机制的初步研究

目的:探讨依曲替酸通过上调Fas基因表达诱导皮肤鳞状细胞癌(鳞癌)细胞系SCL-1细胞凋亡的作用。方法:以体外培养的人皮肤鳞癌细胞系SCL-1为研究对象,MTT法观察依曲替酸对SCL-1细胞的生长抑制作用,Annxin V-FITC/PI法检测早期凋亡,流式细胞仪检测细胞膜表面Fas的表达情况,实时荧光定量RT-PCR方法检测Fas mRNA的表达。结果:依曲替酸能显著抑制SCL-1细胞的生长,并具有浓度及时间依赖性。浓度为1×10-5mol/L的依曲替酸能诱导凋亡,上调细胞膜表面Fas表达水平及Fas mRNA水平。结论:依曲替酸能抑制皮肤鳞癌细胞生长及诱导凋亡,上调Fas抗原表达可能是其分子机制之一。

苯丙芘联合佛波酯恶性转化HIOEC细胞的实验研究

目的:诱导永生化口腔上皮细胞系HIOEC细胞恶性转化,建立HIOEC-B(a)P-TPA细胞系。方法:通过递增浓度的化学致癌剂苯丙芘复合促癌剂佛波酯体外诱导HIOEC细胞,筛选得到具有恶性表型的鳞状细胞癌细胞系HIOEC-B(a)P-TPA。通过微分干涉显微镜和HE染色观察细胞形态学改变,免疫组化染色检测细胞角蛋白和波形蛋白表达情况;软琼脂集落形成、裸小鼠异体皮下成瘤性鉴定HIOEC-B(a)P-TPA细胞的恶性表型。结果:(1)HIOEC细胞诱导培养6个月后,可以在正常生理钙离子浓度、含胎牛血清培养液中生长;(2)细胞在诱导过程中形态多变,最后以成纤维样细胞为主,异形性明显;(3)HIOEC-B(a)P-TPA细胞中细胞角蛋白表达减弱,同时表达波形蛋白;(4)有很强的软琼脂集落形成能力,集落形成率为24.5%;(5)HIOEC-B(a)P-TPA细胞尚未观察到成瘤性。结论:生物化学致癌因素B(a)P和TPA可诱导HIOEC细胞恶性转化,反映了口腔黏膜上皮细胞体外恶变发生、发展过程。