Nesfatin-1对饥饿小鼠氧化应激及自噬的影响

为了研究在急性禁食状态下Nesfatin-1对机体氧化应激及自噬的影响,试验构建小鼠饥饿模型,将50只小鼠随机均分为阴性对照组、禁食24 h组、禁食48 h组、Nesfatin-1+禁食24 h组、Nesfatin-1+禁食48 h组。禁食24,48 h组小鼠分别禁食24 h及48 h;Nesfatin-1+禁食24 h组及Nesfatin-1+禁食48 h组分别在禁食24,48 h基础上按每20 g体重腹腔注射1.25 nmol/g Nesfatin-1 0.26 mL;阴性对照组腹腔注射同等剂量PBS。对各组小鼠进行眼球采血,处死后解剖取脑、肝脏组织。采用化学荧光法测定各组小鼠肝脏氧化基因指标活性氧(reactive oxygen species,ROS)荧光强度,采用ELISA方法测定各组小鼠血清丙二醛(malonaldehyde,MDA)和Nesfatin-1含量,运用实时荧光定量PCR方法测定各组自噬相关基因Beclin-1、LC3、P62 mRNA相对表达量。结果表明:与阴性对照组相比,禁食24 h组及禁食48 h组小鼠ROS荧光强度、MDA含量极显著升高(P<0.01),脑组织Beclin-1、LC3 mRNA相对表达量显著或极显著上调(P<0.05或P<0.01),P62 mRNA相对表达量极显著降低(P<0.01);在禁食24,48 h后,小鼠血清Nesfatin-1含量显著降低(P<0.05),使用Nesfatin-1干预后,其含量极显著升高(P<0.01);与禁食24 h组相比,Nesfatin-1+禁食24 h组小鼠的ROS、MDA含量和Beclin-1、LC3 mRNA相对表达量极显著降低(P<0.01),P62 mRNA相对表达量显著升高(P<0.05);与禁食48 h组相比,Nesfatin-1+禁食48 h组小鼠的ROS、MDA含量和Beclin-1、LC3 mRNA相对表达量极显著降低(P<0.01),P62 mRNA相对表达量极显著升高(P<0.01)。说明急性禁食会使小鼠体内Nesfatin-1含量降低,氧化应激与自噬水平上调,Nesfatin-1能增强细胞活力,注射Nesfatin-1后可以降低小鼠体内的氧化应激水平,也能够降低小鼠在急性禁食状态下上调的自噬水平。

饥饿胁迫对小鼠学习记忆、SOD和心肌丙二醛的影响

给小鼠断绝食物 ,观察小鼠学习记忆能力的变化及生理应激反应。结果表明 ,饥饿后小鼠的体重明显减轻 ,学习能力明显增强 ,记忆能力和大脑 5 羟色胺含量无明显改变 ,心肌丙二醛含量下降 ,肝组织超氧化物歧化酶 (SOD)活性无明显改变 ,血浆SOD活性提高 ,血浆SOD同工酶谱带无明显改变。提示饥饿胁迫使小鼠产生适应性的生理反应 ,使小鼠学习能力提高 ,加强延缓机体衰退的生理功能 ;这些应激反应有利于小鼠在逆境下的生存。

饥饿胁迫24h对小鼠认知功能及海马区前脑啡肽原表达的影响

目的观察饥饿胁迫对小鼠认知功能和大脑海马区前脑啡肽原表达的影响。方法将40只小鼠随机分为对照组和饥饿24 h组(下称饥饿组),Morris水迷宫和八臂迷宫测试小鼠的认知功能。RT-PCR检测大脑海马区前脑啡肽原m RNA表达变化情况。结果饥饿组与对照组比较,1在Morris水迷宫测试中,饥饿组潜伏期明显缩短(P<0.05),通过原平台位置次数和穿越目标停留时间百分增加比(P<0.05);2在八臂迷宫测试中,饥饿组参考记忆错误和工作记忆错误减少(P<0.05);3在RT-PCR实验检测前脑啡肽原实验中,饥饿组小鼠大脑海马区前脑啡肽原表达明显降低(P<0.05)。结论 1饥饿胁迫可增强小鼠的认知功能;2饥饿胁迫通过降低小鼠大脑海马区前脑啡肽原来增强认知功能;3脑肠肽水平的调整可能是"脾藏意主思"功能实现的途径之一。

氮磷比及饥饿度对藻类膜脱氮除磷能力的影响

为研究氮磷比及饥饿度对藻类膜脱氮除磷能力的影响,在室温(25±2)℃、约3500 lx的连续光照条件下,以水华鱼腥藻(Anabaena flos-aquae)为藻种,立体弹性聚氯乙烯为载体制备藻类膜,对5种氮磷比(5∶1、10∶1、16∶1、20∶1、30∶1)及饥饿条件(0、1、2、4、7 d)进行为期6 d的污水处理实验。结果表明:氮磷比实验中,氮磷比为20∶1实验组藻类膜生物量最大,为3.875×10~6个/m L,藻类膜对TP、NH_4^+-N的去除率最高,分别为87.32%、90.57%;在最佳氮磷比为20∶1条件下,饥饿2 d实验组藻类膜生物量最大,为3.75×10~6个/m L,藻类膜对TP、NH_4^+-N的去除率最高,分别为88.80%、84.29%。

饥饿应激对整合子捕获耐药性基因盒频率影响的研究

目的通过测定在不同培养时间下大肠杆菌BL21(DE3)中整合子的整合频率,研究饥饿应激对整合子捕获耐药性基因盒频率的影响。方法将整合子和氨基糖苷腺苷转移酶(aadA2)基因盒克隆到同一质粒pACYC184的不同位点,该重组质粒和高表达整合酶的重组质粒同时转化大肠杆菌BL21(DE3),对10株此菌株培养12h和24h后用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定发生整合作用的整合子的拷贝数和总的整合子的拷贝数,前者除以后者即为整合频率。结果大肠杆菌BL21(DE3)中整合子在12h整合频率的均值为5.51×10-5,在24h整合频率的均值为1.82×10-4。比较10株此菌株2个时点的整合频率,差异有统计学意义(P<0.01)。结论饥饿应激对整合子捕获耐药性基因盒频率有明显的提高作用。

短期饥饿加重异烟肼引起的小鼠肝脏氧化应激

目的研究短期饥饿是否加重异烟肼(INH)引起的小鼠肝脏氧化应激效应。方法实验小鼠分为4组:对照组和INH组经灌胃分别给予生理盐水和INH(100mg/kg);饥饿组及饥饿+INH组分别在给予生理盐水和INH前12h及后6h均禁食。所有小鼠均连续处理4d,在末次INH处理后6h取材。取血清用于生化指标检测,用Griffith法检测肝脏还原型谷胱甘肽(GSH)水平,比色法检测肝脏羰基产物丙二醛含量。用蛋白质免疫印迹技术检测肝脏CYP2E1蛋白水平,用RT-PCR技术检测肝脏CYP2E1 mRNA水平。结果 INH组小鼠血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、总胆红素、总胆汁酸及病理学检查均未发现明显的改变。进一步的研究发现,短期饥饿或INH单独处理均显著上调小鼠肝脏CYP2E1蛋白水平,但对Cyp2e1 mRNA水平均无明显影响;与INH组小鼠相比,短期饥饿显著降低INH引起的小鼠肝脏GSH消耗并明显升高INH引起的脂质过氧化水平。结论短期饥饿加重INH引起的小鼠肝脏氧化应激至少部分经上调肝脏CYP2E1蛋白表达所介导。

王家岭3·28透水事故获救矿工消化功能的分析

目的分析长期饥饿应激条件对消化系统的影响。方法2010年3月28日王家岭煤矿透水事故中153名矿工，被困井下，处于断食、应激状态。8d后115例矿工获救并住院，均男性，年龄（38．7±7．6）岁（19。54岁）。观察其消化系统症状，入院后连续7～10d检测转氨酶、胆红索、脂肪酶、淀粉酶、电解质等生化指标。结果115例矿工中，21例矿工表现腹部不适和腹痛，有2例矿工表现恶心，但未有呕吐等症状；49．6％的矿工有低白蛋白血症；33．3％的矿工丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（AST）增高；40．3％的矿工总胆红素增高；74．5％的矿工有电解质异常，表现为低钠血症、低钾血症和，或低钙血症。结论长时间的饥饿应激可致低白蛋白血症及血生化紊乱，循序渐进的进食方案及补液治疗有助于恢复。

饥饿应激对藏系绵羊肌肉AMPK活性、糖酵解及品质的影响

通过分别测定不同饥饿时间后藏系绵羊肌肉的AMPK活性,糖酵解指标以及肌肉品质指标,分析饥饿应激对宰后AMPK活性及藏系绵羊肉品品质的影响,初步探明饥饿应激与AMPK活性及肌肉品质的关系,为提高肉品品质提供理论基础。结果表明:短期的饥饿应激(不超过24h)对宰后藏系绵羊肌肉的AMPK活性以及肌肉的品质没有显著的影响,而长期的饥饿应激(超过48 h)可以使宰后藏系绵羊肌肉的AMPK活性升高,ACC和GS活性下降,糖原含量下降,乳酸含量升高,pH值下降,熟肉率和滴水损失下降,剪切力上升。结果提示长时间的饥饿应激(超过48 h)可以通过提高AMPK活性,加快糖酵解的速度,使宰后藏系绵羊肌肉的糖原含量下降,乳酸含量升高,pH值降低,而较低的pH值,对藏系绵羊的肌肉品质有很大的影响。