柱前衍生化高效液相色谱法测定人血浆中花生四烯酸乙醇胺浓度

目的:建立血浆中花生四烯酸乙醇胺(Anandamide)的柱前衍生化高效液相色谱(HPLC)测定方法。方法:取血浆样品1mL碳酸氢钠碱化,无水甲苯提取,衍生化试剂DBD-COCL衍生,进样HPLC测定,采用外标法。色谱柱为Agilent C18(250×4.6mm,5μm),流动相为50mmol.L-1醋酸钠水溶液-乙腈,采用梯度洗脱,流速1.0ml.min-1,激发波长为336nm,发射波长为560nm。结果:血浆中Anandamide线性关系良好,日内日间RSD<10%,范围1-30ng/ml,血浆中花生四烯酸乙醇胺最低检测限为0.50-0.85ng(S/N=3)。结果:该方法样品处理过程简便,重复性好,符合生物样品测定要求,并适用于临床血样中anandamide浓度的测定。