山豆根不同提取部位的毒性作用研究

目的明确山豆根的主要毒性部位。方法制备山豆根水煎液,过大孔吸附树脂进行分离,得到水洗部位、生物碱部位和非生物碱部位(主要包括黄酮类和皂苷类)。斑马鱼急性毒性实验被用于评价山豆根不同提取部位的毒性大小。此外,通过MTT法检测不同提取部位给药24 h对Hep G2细胞活力的影响并计算半数抑制浓度(IC50);LDH释放检测试剂盒检测细胞膜损伤程度;Annexin V-FITC/PI双染,流式细胞术检测细胞凋亡。结果斑马鱼急性毒性实验结果提示非生物碱部位为山豆根主要毒性部位。MTT法结果也显示非生物碱部位对Hep G2细胞活力的抑制作用最强;非生物碱部位可以引起Hep G2细胞膜损伤,在2 g·L-1细胞损伤率达到67.31%;非生物碱部位(2 g·L-1)给药24 h引起的Hep G2细胞凋亡显著高于对照组(P<0.05)。结论山豆根非生物碱部位可能为山豆根主要毒性部位,非生物碱部位可能通过诱导细胞膜损伤和凋亡从而影响细胞活力。