低氧预适应训练在急进高海拔高原部队中的应用研究

目的:在高海拔高原部队验证低氧预适应降低急性高原反应、改善体能的效果,并观察效果的时间保留规律。方法:拟进驻4300 m高原新兵利用低氧呼吸器进行低氧预适应训练,每天上、下午各1 h,连续5 d,分别于训练结束后第2天和第6天进入高原,观测受试者的急性高原反应症状和体能。结果:低氧预适应训练可显著降低急性高原病的患病率;训练结束后第2天进入高原者ADVO2max和PWC170显著降低,而第6天进入高原者,ADVO2max无明显改变。结论:进驻高海拔高原前进行为期5天的低氧预适应训练可显著降低急性高原病的患病率,训练效果至少可保留5天。

低氧下丹参酮ⅡA对人胃癌SGC-7901细胞HIF-1α与c-Myc表达的影响

目的观察低氧下丹参酮ⅡA(TanⅡA)对人胃癌SGC-7901细胞低氧诱导因子1α(H IF-1α)与c-Myc表达的影响和二者的相关性。方法用氯化钴创建低氧模型,设常氧对照组、低氧对照组和低氧加不同浓度TanⅡA组。分别取0.5、2.0、10.0 mg/L TanⅡA干预低氧胃癌细胞48 h后,免疫细胞化学二步法检测H IF-1α和c-Myc蛋白表达的变化。结果TanⅡA呈剂量依赖性地抑制H IF-1α和c-Myc蛋白表达,且二者呈高度正相关(r=0.901,P<0.05)。结论低氧条件下,TanⅡA可同时抑制人胃癌SGC-7901细胞H IF-1α和c-Myc蛋白的表达,提示TanⅡA可能对抑制肿瘤的无氧糖酵解和VEGF表达具有重要作用。

灵芝孢子防止妊娠高血压大鼠的胎鼠及其生后幼鼠海马细胞增殖下降和神经元存活减少

目的探讨灵芝孢子对妊娠高血压大鼠的胎鼠及幼鼠海马细胞增殖下降和神经元存活减少的干预作用。方法40只SD妊娠大鼠分为正常对照组、N硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME)+蒸馏水组、L-NAME+精氨酸组、L-NAME+灵芝孢子组。采用免疫组织化学、Western blotting、RT-PCR、流式细胞计数和电镜等技术对海马组织进行检测。结果应用L-NAME后,E21海马低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达增加,直到P30时仍有表达。E21海马微血管密度增高,P30海马毛细血管结构异常。E21海马细胞的增殖下降,P30海马神经元减少。应用灵芝孢子后,E21海马HIF-1α和VEGF低水平表达,在P30时则未见表达。E21海马微血管密度达到正常水平,P30海马毛细血管结构正常。E21海马细胞增殖上升,P30海马神经元恢复性增多。结论灵芝孢子能防止妊娠高血压大鼠的胎鼠及幼鼠海马细胞增殖下降和神经元存活减少。

胰岛素对人视网膜色素上皮细胞表达低氧诱导因子-1α的影响

目的研究胰岛素诱导人视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)低氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF 1α)的表达,及川芎嗪对其影响。方法应用免疫组化法检测不同浓度胰岛素作用下RPE中HIF1α的表达、同一浓度胰岛素作用于RPE不同时间HIF1α的表达、不同浓度川芎嗪对胰岛素作用下RPE中HIF1α的表达的影响。结果胰岛素作用4h,随着胰岛素浓度的增加,RPE中HIF1α的表达逐渐增加,以8×106U·L-1最为明显;8×106U·L-1胰岛素作用不同时间,以4h时RPE中HIF1α的表达较高;不同浓度的川芎嗪对胰岛素作用下的RPE中HIF1α的表达无影响。结论胰岛素可诱导RPE中HIF1α的表达,川芎嗪对胰岛素诱导的RPE中HIF1α的表达无影响。

IκBα突变型基因对缺氧缺糖损伤永生化神经前体细胞的保护作用

目的:检测在缺氧缺糖环境中,IκBα突变型基因对永生化神经前体细胞株(INPCs)NFκ-B的活性、细胞存活及细胞损伤的影响.方法:在建立转染pcDNA3.1及转染pcD-NA3.1/IκBαM INPCs的基础上,用MTT法检测缺氧缺糖处理3,6和9 h后两细胞株的存活率,用荧光素酶报告基因检测两细胞株缺氧缺糖6 h前后NFκ-B的活性,并测定缺氧缺糖6 h处理后培养液中乳酸脱氢酶的含量,用Hoechst33342染色观察细胞核的形态.结果:转染pcDNA3.1/κIBαM的INPCs中NFκ-B的活性均低于转染pcDNA3.1的INPCs,缺氧缺糖6 h或9 h时,前者存活率高于后者,且6 h时前者上清中的乳酸脱氢酶释放量较少,缺氧缺糖可使两细胞株的部分细胞核呈现凋亡改变.结论:κIBα突变型基因可降低INPCs中NFκ-B的活性,提高INPCs在缺氧缺糖处理后的存活率,减轻细胞损伤.

慢性肺心病血清酶活性与缺氧程度及预后的关系

目的探讨慢性肺原性心脏病(肺心病)患者与血清酶学活性、缺氧程度及预后的关系。方法对78例肺心病患者分为临床缓解期(病情缓解后1周)和急性发作期两组,急性发作期者分为轻、中、重度缺氧3组,以健康成年人为对照组,检测血清中6种酶(肌酸激酶CPK、乳酸脱氢酶LDH、天冬氨酸氨基转移酶AST、α-羟丁酸脱氢酶HBD、丙氨酸氨基转移酶ALT、γ-谷氨酰转肽酶γ-GT)的活性及动脉血氧分压(PaO2)、血氧饱和度(SaO2),并进行分析。结果发现肺心病各期(临床缓解期和急性发作期)患者CPK酶活性的变化与正常对照组无统计学差异(P>0.05),其他5种血清酶活性均有不同程度的升高;肺心病急性发作期轻、中、重度缺氧3组患者间经方差分析,除CPK外,LDH、AST、HBD、ALT、γ-GT活性均明显升高,且随着缺氧越严重,该5种酶活性则升高越明显,具有显著性统计学差异(P<0.01)。结论肺心病患者血清酶(LDH、AST、HBD、ALT、γ-GT)活性的变化可反映病情发展的程度,其血清酶活性与缺氧严重性密切相关,缺氧越严重,酶活力增高越明显。血清酶活力显著增高是病情危重信号,是判断预后的可靠指标。

微环境诱导肝细胞癌多药耐药的形成及机制

目的探讨微环境在肝癌多药耐药(MDR)表型形成中的作用,并初探其作用机制,为逆转肝癌耐药提供有效的新的分子靶点。方法模拟肝癌体内生长的局部微环境,使HepG2细胞分别在缺氧、低糖的微环境下生长或稳定整合HBX基因。应用荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术和Western blot技术分别检测这些局部微环境因素作用下的HepG2细胞内多药耐药相关基因mdr1、肺耐药相关蛋白基因(LRP)、多药耐药相关蛋白基因(MRP1)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的mRNA和蛋白水平的表达。同时运用免疫细胞化学技术检测肝癌耐药细胞株中HIF-1α蛋白的表达,以及检测转染了HIF-1α质粒的HepG2细胞中上述相关多药耐药基因的表达。结果在缺氧、低糖环境下生长或稳定整合了HBX基因的HepG2细胞均不同程度地高表达多药耐药相关基因和HIF-1α;在肝癌耐药细胞株中HIF-1α蛋白高表达;稳定转染了HIF-1α质粒的HepG2细胞显著高表达多药耐药相关基因。结论肝癌生长的微环境可通过核转录因子HIF-1α调控多药耐药相关基因的表达,从而诱导肝癌多药耐药表型的形成;HIF-1α有望成为逆转肝癌耐药的新的分子靶点。

不同浓度PNU282987对大鼠心肌细胞缺氧／复氧损伤的影响

目的评价不同浓度PNU282987对大鼠心肌细胞缺氧／复氧损伤的影响。方法新生大鼠，分离纯化心肌细胞，培养72h时，以5×105个／ml的密度接种于6孔板中（2ml／TL），108个培养孔，采用随机数字表法，分为6组（n=18）：正常对照组（c组）、缺氧，复氧组（AIR组）、3、10、30、60μmol／LPNU282987组（P3组、P10组、P30组和P60组）。采用缺氧6h复氧6h的方法制备心肌细胞缺氧／复氧损伤模型，P3组、P10组、P30组和P60组复氧时分别加入相应浓度的PNU282987。采用比色法检测心肌细胞乳酸脱氢酶（LDH）漏出水平，采用膜联蛋白V，碘化丙啶双染流式细胞术检测心肌细胞凋亡情况，采用ELISA法检测培养上清液白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF—α）的浓度。结果与c组比较，AIR组、P3组、P10组、P30组和P60组心肌细胞LDH漏出率、早期细胞凋亡率和晚期细胞凋亡率升高，培养上清液IL-6和TNF-α的浓度升高（P〈0．01）；与AIR组比较，P3组、P10组、P30组和P60组心肌细胞LDH漏出率和早期细胞凋亡率降低，P30组最明显，培养上清液IL-6和TNF-α的浓度降低，且呈浓度依赖性（P〈O．05或O．01），P3组、P10组、P30组和P60组晚期细胞凋亡率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论3、10、30、60μmol／LPNU282987可减轻大鼠心肌细胞缺氧／复氧损伤，而30μmol／L时效果最明显。