次苷酸查尔酮对LPS诱导的RAW264.7细胞iNOS和COX-2表达的影响

补骨脂为豆科植物补骨脂(Psoraleacorylifolia L.)果实,具有温肾助阳、温脾止泻的功效[1],临床上被用于治疗皮肤病、肾炎、骨折等[2-3]。次苷酸查尔酮(corylifol A,CYA)是中药补骨脂的活性成分之一,是一种异黄酮类化合物,具有抗炎、抗菌、抗氧化、抗骨质疏松的特性[4-5]。有研究表明,CYA能明显抑制破骨细胞的分化,且能明显降低LPS诱导的巨噬细胞一氧化氮(NO)的生成[6-7]。

PS-MPs和DEHP联合暴露通过NO/iNOS/NF-κB通路诱导小鼠结肠上皮细胞自噬的作用机制研究

【目的】探究聚苯乙烯微塑料(PS-MPs)和邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)联合暴露通过NO/iNOS/NF-κB通路诱导小鼠结肠上皮细胞(MCEC)自噬的作用机制。【方法】依据CCK-8法测定的PS-MPs和DEHP对MCEC的半数抑制浓度(IC 50),将MCEC分为5组:对照组、PS-MPs组、DEHP组、联合组和抑制组,各组MCEC分别用培养基及含有200μg/L PS-MPs、100μmol/L DEHP、200μg/L PS-MPs+100μmol/L DEHP、200μg/L PS-MPs+100μmol/L DEHP+5 nmol/L硼替佐米(PS-341)的培养基处理24 h后,采用生化试剂盒检测NO含量及iNOS活性,通过MDC法检测自噬小体,利用免疫荧光染色、实时荧光定量PCR和Western blotting检测自噬,以及NO/iNOS/NF-κB通路相关基因的mRNA和蛋白表达水平。【结果】PS-MPs和DEHP均可抑制MCEC的活力,且IC 50分别为2315μg/L和1477μmol/L。与对照组相比,PS-MPs、DEHP、联合组细胞中NO含量、iNOS活性及NO/iNOS/NF-κB通路相关基因的mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),MDC法与免疫荧光染色的荧光强度均显著增强(P<0.05),MCEC的自噬相关基因(Beclin1、ATG5、LC3-B)的mRNA和蛋白表达水平显著上调(P<0.05);PS-341可显著缓解PS-MPs和DEHP对MCEC暴露引起的上述检测指标的变化。【结论】联合暴露于PS-MPs和DEHP可激活iNOS,使NO含量激增,上调NO/iNOS/NF-κB通路,从而诱导小鼠结肠上皮细胞自噬。

黄芪甲苷通过HIF-1α/iNOS通路对下肢深静脉血栓大鼠血管内皮功能的影响及机制研究

目的研究黄芪甲苷对下肢深静脉血栓大鼠血管内皮功能的保护作用,并探讨其潜在作用机制。方法线栓法构建大鼠下肢深静脉血栓模型。将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪甲苷低、中、高剂量治疗组[20、40、80 mg/(kg·d)]和HIF-1α选择性激动剂组[20 mg/(kg·d)]。采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测IL-6、IL-1β、TNF-α、血栓素A2(thromboxane A2,TXA2)与前列环素(prostaglin 2,PGI2)水平;HE染色法观察大鼠下腔血脉血栓状态;TUNEL染色检测血管内皮细胞凋亡情况;Western Blot检测HIF-1α、iNOS、caspase 9、caspase 3蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组IL-6、IL-1β、TNF-α、TXA2水平显著升高,PGI2水平显著降低;HE染色结果可见红色和混合血栓,血管壁伴炎性细胞浸润;血管内皮细胞凋亡数显著增加;HIF-1α、iNOS蛋白表达明显下调;caspase 9、caspase 3蛋白表达明显上调。与模型组相比,黄芪甲苷低、中、高剂量治疗组和HIF-1α选择性激动剂组IL-6、IL-1β、TNF-α、TXA2水平显著降低,PGI2水平显著升高;HE染色结果可见无血管内皮细胞掉落,仅有极少量炎性细胞浸润;血管内皮细胞凋亡数显著减少;HIF-1α、iNOS蛋白表达明显上调;caspase 9、caspase 3蛋白表达明显下调。结论黄芪甲苷对下肢深静脉血栓大鼠血管内皮功能具有明显的保护作用,其机制可能与调控HIF-1α/iNOS信号通路有关。

ILC2和MDSC及其相关细胞因子IL-13和iNOS在宫颈癌中的表达及其列线图模型的构建和评价

目的:研究2型固有淋巴样细胞(ILC2)和髓源性抑制细胞(MDSC)及其相关细胞因子IL-13和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在宫颈癌(CC)中的表达,并基于其构建CC发病风险的列线图预测模型。方法:采集2022年5月至2024年1月在新疆医科大学第一附属医院手术切除的40例CC组织及100例外周血作为CC组,选取同期收治的30例子宫肌瘤经CC筛查为阴性的宫颈组织和100例正常健康个体外周血作为对照组。用多重免疫荧光技术(mIF)及免疫组化染色(IHC)法检测两组组织中ILC2和MDSC细胞浸润及其相关细胞因IL-13和iNOS的表达;使用流式细胞术和ELISA技术分别检测两组外周血中ILC2和MDSC及IL-13和iNOS的表达差异;通过Person相关性分析评估其相关性;使用单因素和多因素Logistic分析来确定ILC2和MDSC及IL-13和iNOS是否为CC发病的独立危险因素,再利用R软件建立免疫预测模型,使用ROC曲线下面积(AUC值)、Hosmer-Lemeshow检验、校准曲线、临床决策曲线和临床影响曲线来分别评估模型。结果:CC组中ILC2及MDSC及其相关细胞因子IL-13和iNOS均高于对照组(均P<0.05),且其均呈正相关(均P<0.05);经过单因素及多因素Logistic回归分析显示,ILC2、MDSC及IL-13、iNOS均是CC发病的独立危险因素(均P<0.05);基于这些危险因素的CC发病列线图,经过验证提示,该列线图模型具有一定的临床实用价值。结论:ILC2和MDSC及其相关的细胞因子IL-13和iNOS在CC组织及外周血中均呈高表达,基于这些危险因素构建的预测模型具有良好的预测能力和一定的实用性,为CC的早期诊断和治疗提供了一种简便有效的辅助工具。

苗药五香血藤提取物对慢性非细菌性前列腺炎大鼠NF-κB P65、iNOS表达的影响

目的观察苗药五香血藤提取物对慢性非细菌性前列腺炎(CAP)大鼠核因子(NF)-κB P65、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法健康雄性成年SD大鼠60只,随机分为正常组、CAP模型组、阳性药物组、苗药五香血藤提取物高(高剂量组)、中(中剂量组)、低(低剂量组)剂量组,每组10只。注射消痔灵进行大鼠造模,造模7 d,之后阳性药物组给予前列舒通胶囊水溶液灌胃治疗,苗药五香血藤提取物高、中、低剂量组分别给予252、126、63 mg/kg剂量灌胃治疗,正常组和模型组给予无菌生理盐水灌胃,每天灌胃1次,连续给药28 d;于末次给药后2 h股动脉取血处死大鼠,采用Western印迹检测前列腺组织NF-κB P65、iNOS蛋白表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6和IL-8水平,观察前列腺组织病理学改变等。结果给药结束后,与CAP模型组比较,各组前列腺组织内NF-κB P65、iNOS蛋白相对表达量、血清中TNF-α、IL-6和IL-8含量均出现不同程度的降低,而高剂量组与阳性药物组的差异性不显著(P>0.05),并逐渐接近正常组水平;前列腺指数比较显示,除低剂量组外其余各组前列腺指数均明显低于模型组(P<0.05),而高剂量组与阳性药物组的差异性不显著(P>0.05);脏器指数比较显示,高剂量组和阳性药物组的肝、肾脏器指数均明显高于正常组和模型组(P<0.05);病理观察显示,高剂量组前列腺组织的腺体上皮细胞排列整齐,无明显增生,纤维组织增生及炎症细胞渗出病变明显减轻,病理改变接近阳性药物组。结论苗药五香血藤提物能够通过抑制NF-κB P65、iNOS蛋白表达,降低血清中TNF-α、IL-6和IL-8含量,对前列腺组织炎症起到缓解作用。

骨保护素对大鼠脑出血后iNOS表达影响的研究

目的探讨骨保护素对大鼠脑出血后iNOS表达的影响。方法将SD大鼠随机分为Sham组、ICH组、OPG组,每组又分为12 h、24 h、72 h共3个亚组。在各个时间点进行Bederson评分,应用免疫组化技术观察不同时间点大鼠脑出血血肿周围iNOS的表达。结果各组大鼠12 h神经功能缺损最重,之后症状逐渐减轻。12 h ICH组、OPG组与Sham组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05)。脑含水量比较,12 h、24 h、72 h,ICH组、OPG组与Sham相比差异有统计学意义(P<0.05);72 h OPG组与ICH组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。各组血肿周围脑组织中iNOS的表达:12 h、24 h、72 h,OPG组、ICH组与Sham相比差异有统计学意义(P<0.05);72 h OPG组明显高于ICH组,两者相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论大鼠侧脑室注入重组OPG可引起血肿周围iNOS的表达显著增加,OPG可能增加脑出血后的炎性反应。

HIF-1α、ET-1及iNOS在子痫前期胎盘组织中的表达及意义

目的本研究通过对HIF-1α、ET-1与iNOS进行蛋白表达检测,分析HIF-1α、ET-1与iNOS三者在子痫前期患者胎盘组织中的表达规律,对目前尚未完全明确的子痫前期发病机制进行完善和补充。方法通过临床收集正常妊娠产妇(对照组)、子痫前期及重度子痫前期患者胎盘组织各30例,采用SP免疫组化和Western-Blot-ting检测各组胎盘组织中HIF-1α、ET-1及iNOS的蛋白表达部位及表达量。结果1、免疫组化:HIF-1α及ET-1在疾病较重的胎盘组织中阳性率及阳性表达强度更高,三组比较差异有统计学意义(P<0.05);iNOS在各组胎盘组织中阳性率均较低,三组比较差异无统计学意义(P>0.05)。2、Western-Blotting:(1)重度子痫前期组中HIF-1α的表达水平明显高于正常妊娠组,差异具有统计学意义(P<0.05);且重度子痫前期组中HIF-1α的表达水平明显高于子痫前期组,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)与正常妊娠组相比较,ET-1的表达水平在患病组明显增强,且重度子痫前期组ET-1的表达水平明显高于子痫前期组,差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)iNOS在重度子痫前期组中为高表达水平,与正常妊娠组相比较表达量有明显差异,差异具有统计学意义(P<0.05),与子痫前期组相比较表达量也有明显差异,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论随着子痫前期严重程度的增加,HIF-1α、ET-1及iNOS的表达呈升高趋势,在重度子痫前期组中的表达明显高于正常妊娠组及子痫前期组,三者呈正相关关系,共同参与了子痫前期的发病机制,且与该病严重程度密切相关。

绵羊iNOS基因突变与布鲁杆菌侵染率的关系分析

探究绵羊诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因多态性与布鲁菌易感性的关系。使用虎红平板血清凝集试验检测哈萨克羊布鲁菌患病情况。参考GenBank中绵羊iNOS基因序列,针对其15、16、17外显子及其邻近内含子片段设计引物,PCR扩增出目的基因片段。采用SSCP凝胶电泳检测不同基因型分型,DNA测序进行多态性检测,分析其SNPs与哈萨克羊布鲁菌易感性之间的关系。经检测发现阳性羊数67只,占比29.00%。在哈萨克羊iNOS基因的exon 15片段上有F15-C29002T和F15-G29076A两个多态位点。在exon 16片段上有F16-A30045G位点。在exon 17片段上有F17-T31213G位点。卡方检验表明,F15-C29002T和F15-G29076A多态位点与布鲁菌易感性的相关性不显著(P>0.05),F16-A30045G和F17-T31213G多态位点与布鲁菌易感性的相关性极显著(P<0.01)。哈萨克羊iNOS基因F15-C29002T和F15-G29076A与布鲁菌易感性没有相关性,F16-A30045G和F17-T31213G与布鲁菌易感性存在相关性。

右美托咪啶抑制LPS诱导的巨噬细胞iNOS基因表达机制

目的探讨右美托咪啶(Dex)抑制脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因表达的机制。方法Dulbecco培养的永生化小鼠巨噬细胞分为空白对照组、LPS+Dex 1~5组(Dex作为iNOS抑制剂),每组设12个培养皿。空白对照组不用任何处理;LPS+Dex 1~5组分别予以0.01、0.10、1.00、10.00和100.00 mmol/L Dex处理。采用Western印迹法测定各组巨噬细胞iNOS的表达水平及在iNOS表达受到抑制时,小鼠巨噬细胞中Toll样受体(TLR)2的表达情况,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定在TLR2的表达下调后小鼠巨噬细胞miR-143的表达。结果LPS+Dex 1~5组腹腔巨噬细胞、贴壁细胞的亚硝酸盐生成含量均显著高于空白对照组(P<0.05),且上述指标水平均呈逐渐降低趋势。LPS+Dex 1组、2组和空白对照组巨噬细胞iNOS含量无明显差异(P>0.05)。LPS+Dex 3~5组巨噬细胞iNOS含量均显著低于空白对照组(P<0.05),且呈逐渐降低趋势。LPS+Dex 1~5组巨噬细胞中TLR2受体表达水平显著低于空白对照组(P<0.05),且呈逐渐降低趋势。LPS+Dex 2~5组巨噬细胞中miR-143表达量均显著高于空白对照组(P<0.05),且LPS+Dex 1~5组miR-143表达量呈逐渐升高趋势。结论Dex在10.00 mmol/L和100.00 mmol/L时,可有效抑制LPS诱导的小鼠巨噬细胞中iNOS的表达。

基于NF-κB iNOS-COX-2信号通路探究瑞芬太尼对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能的作用机制

目的研究基于核转录因子(NF)-κB-一氧化氮合酶(iNOS)-环氧合酶(COX)-2信号通路探究瑞芬太尼对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能的作用机制。方法选取清洁及健康雄性大鼠32只,8只为空白组,剩余24只建立脑缺血再灌注损伤模型,分为模型组、低、高剂量瑞芬太尼组各8只。采用Longa 5级神经功能缺损评分,评估神经功能损伤评分;酶联免疫吸附试验检测iNOS;采用色谱柱检测脑组织单胺类神经递质含量甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(HT);采用Western印迹检测NF-κB、iNOS、COX-2。结果与模型组相比,低、高剂量瑞芬太尼组神经功能损伤明显降低,神经递质NE、DA含量明显降低,5-HT明显升高,NO水平明显降低,iNOS、COX-2、NF-κB蛋白表达明显降低(均P<0.05)。结论瑞芬太尼通过调控NF-κB-iNOS-COX-2信号通路蛋白水平,改善大鼠脑缺血再灌注损伤的神经功能。

柚皮素通过抑制NF-κB-iNOS/COX-2通路减轻小鼠糖尿病肝损伤

目的探讨核因子(NF-κB)-诱导型一氧化氮合酶(iNOS)/环加氧酶2(COX-2)信号通路在柚皮素治疗减轻小鼠糖尿病肝损伤中的作用。方法将昆明小鼠分为正常对照组、糖尿病肝损伤模型组、低剂量(25 mg·kg^(-1)·d^(-1),灌胃)柚皮素治疗组及高剂量(75 mg·kg^(-1)·d^(-1),灌胃)柚皮素治疗组,每组10只。长期高能量饮食联合多次小剂量链脲菌素(STZ;40 mg·kg^(-1)·d^(-1)×5 d,腹腔注射)建立小鼠糖尿病肝损伤模型。HE染色观察肝脏形态学变化;生化试剂盒检测小鼠血脂及肝功能改变;每周监测空腹血糖(FBG)水平;qRT-PCR检测肝脏NF-κB、iNOS和COX-2的mRNA表达;Western blot法检测肝脏NF-κB、iNOS和COX-2蛋白表达。结果给予STZ 7 d,小鼠FBG水平持续高于11.1 mmol/L,4周后肝脏病理变化及肝功能检测提示出现肝损伤。再过4周(即实验结束时),模型组小鼠肝细胞内可见脂肪变性,还伴有炎症细胞浸润,血脂和肝功能水平均显著升高(P<0.01),同时肝脏NF-κB、iNOS和COX-2的表达显著上调(P<0.01)。柚皮素治疗呈剂量依赖性地减轻肝组织损伤,保护肝功能,显著降低血脂水平(P<0.01);同时,NAR使NF-κB、iNOS和COX-2的表达下调(P<0.01)。另外,柚皮素也显著降低模型组FBG水平(P<0.05),但较正常对照组仍显著升高(P<0.01)。结论柚皮素对小鼠糖尿病肝损伤的治疗作用可能与其抑制NF-κB-iNOS/COX-2信号通路有关。

痛泻要方对肝郁脾虚型UC大鼠结肠组织Claudin-1、ZO-1及血清COX-2、iNOS表达的影响

目的:探讨痛泻要方对肝郁脾虚型溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型大鼠血清中环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(induced nitric oxide synthase,iNOS)含量及结肠组织中密封蛋白1(Claudin-1)、紧密连接蛋白1(ZO-1)基因及蛋白表达的影响。方法:100只Wistar大鼠用病-证结合法复建肝郁脾虚型UC模型,按随机数字表法将造模组大鼠分为模型组(10 g/kg蒸馏水灌胃),美沙拉嗪组(0.4 g/kg美沙拉嗪灌胃),痛泻要方高、中、低剂量组(20.8、10.4、5.2 g/kg痛泻要方灌胃),每组20只。另取20只正常大鼠作为空白组(10 g/kg蒸馏水灌胃),各组灌胃体积均为10 mL/kg,连续21 d。药物治疗结束后,取血清及结肠组织,ELISA法检测血清中COX-2、iNOS含量;观察结肠组织大体形态及损伤情况,HE染色观察病理表现,RT-qPCR法检测Claudin-1、ZO-1 mRNA表达,免疫组化法和Western blot法检测Claudin-1、ZO-1平均光密度值及蛋白表达。结果:光镜观察显示,模型组大鼠结肠黏膜充血、水肿,炎性细胞浸润,细胞间紧密连接断裂;经痛泻要方干预后,大鼠结肠黏膜病理变化明显改善,细胞间紧密连接正常。与空白组比较,模型组大鼠血清中COX-2、iNOS含量明显升高(P<0.01);Claudin-1、ZO-1 mRNA、平均光密度值和蛋白表达明显降低(P<0.01)。与模型组比较,美沙拉嗪组COX-2、iNOS含量降低(P<0.01);痛泻要方高、中剂量组COX-2、iNOS含量显著降低(P<0.01),痛泻要方低剂量组COX-2、i NOS含量降低(P<0.05);美沙拉嗪组及痛泻要方高、中剂量组Claudin-1、ZO-1 mRNA平均光密度值及蛋白表达量显著升高(P<0.01);痛泻要方低剂量组Claudin-1、ZO-1 mRNA表达量与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05);痛泻要方低剂量组Claudin-1、ZO-1平均光密度值升高(P<0.05),蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05)。结论:痛泻要方治疗肝郁脾虚型UC的作用可能与上调关键蛋白Claudin-1、ZO-1的表达量及降低炎症细胞因子COX-2、iNOS的含量有关。

大黄素通过NF-kB-iNOS/COX-2信号通路治疗急性胰腺炎的作用机制研究

目的石研究大黄素对急性胰腺炎的抗炎治疗作用及相关机制。方法半将24只SPF大鼠随机分为假手术组(Sham组)、蔗糖脂肪酸酯处理组(Z组)、模型组(AP组)和大黄素处理组(E组),每组6只。除Sham组外,每一个组中均须使用L-精氨酸制作急性胰腺炎模型,E组于造完模型后1h及6h分别给予大黄素(60mg/kg)腹腔注射治疗;Z组比照E组,腹腔注射等量的4%的蔗糖脂肪酸酯溶液进行处理;造模实验期间每间隔2h观察大鼠的一般情况,AP组造模12h后处死大鼠,E组及Z组末次给药后12h后处死大鼠,ELISA法检测大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-1β、iNOS和COX-2,TBA法检测大鼠血清中SOD、MDA含量;WesternBlot检测大鼠胰腺组织NF-kB蛋白的表达情况;HE染色法检测胰腺及周围组织中的细胞炎症情况。结果与Sham组相比,AP组大鼠一般情况明显变差,血清TNF-α、IL-6及IL-1β指标升高(P<0.05),SOD活性升高,MDA活性降低(P<0.05)COX-2及iNOS显著升高(P<0.05);与AP组相比,大黄素处理组中TNF-α、IL-6及IL-1β指标明显降低(P<0.05),SOD活性升高,MDA活性降低(P<0.05);COX-2及iNOS明显降低(P<0.05);与Sham组比较,AP组大鼠胰腺组织中NF-kB蛋白表达水平显著增加(P<0.05);与AP组相比,E组NF-kB蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论大黄素可以通过NF-kB-iNOS/COX-2通路来控制胰腺炎症,从而达到治疗胰腺炎的效果。

L-NMMA对过量氟暴露引起的小鼠MC3T3E1成骨细胞中NO/iNOS表达的影响

目的探讨L-单甲基-精氨酸(L-NMMA)与过量氟化钠(NaF)共培养对小鼠颅顶前成骨(MC3T3E1)细胞中一氧化氮(NO)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法将MC3T3E1成骨细胞分为空白组(只含培养基)、NaF染毒组(0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 mmol/L)及L-NMMA染毒组(0、5、10、20、40、80 mol/L),采用细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK8)检测细胞存活率,并筛选最佳染氟浓度和最佳L-NMMA用药浓度;再将MC3T3E1成骨细胞分为对照组(0.0 mmol/L NaF)、低氟组(1.0 mmol/L NaF)、高氟组(4.0 mmol/L NaF)、低氟+L-NMMA组(1.0 mmol/L NaF+20μmol/L L-NMMA)、高氟+L-NMMA组(4.0 mmol/L NaF+20μmol/L L-NMMA)、L-NMMA组(20μmol/L L-NMMA),处理24 h,采用硝酸还原酶法检测细胞中NO含量,蛋白免疫印迹法及实时荧光定量PCR法分别检测iNOS蛋白及mRNA表达水平。结果与对照组相比,1.0、2.0、4.0、8.0 mmol/L NaF染毒组及80μmol/L L-NMMA染毒组MC3T3E1成骨细胞存活率降低(P<0.05),选择1.0 mmol/L和4.0 mmol/LNaF为染氟浓度、20μmol/LL-NMMA用药浓度进行后续实验;与对照组比较,低氟组、高氟组MC3T3E1成骨细胞中NO含量增加(P<0.05),低氟+L-NMMA组中NO含量低于低氟组(P<0.05),高氟+L-NMMA组细胞中NO含量低于高氟组(P<0.05);与对照组相比,高氟组MC3T3E1成骨细胞中iNOS蛋白及mRNA表达水平升高(P<0.05);与高氟组比较,高氟+L-NMMA组细胞中iNOS蛋白及mRNA表达水平降低(P<0.05)。结论过量氟可致MC3T3E1成骨细胞损伤、iNOS蛋白和mRNA表达增强、细胞中NO含量增加,L-NMMA与氟共培养后可减弱这一效应,提示L-NMMA对过量氟所致MC3T3E1成骨细胞损伤有一定的保护作用。

染色质重塑复合体INO80调控基因表达的机制研究

真核生物基因组DNA与组蛋白形成核小体,但真核基因组仍可结合转录、复制和修复过程的一系列酶,该过程主要受ATP依赖的核小体重塑复合物的调节.核小体重塑复合物INO80具有独特的结构特征,可促进复制叉停滞后重启,并在复制叉与转录物碰撞后帮助转录的基因清除RNA聚合酶Ⅱ.此外,INO80复合物还参与DNA损伤修复并抑制与编码序列方向相反的不适当转录.这些不同功能的基础是可促进核小体滑动并进行组蛋白变异体交换的核心ATPase亚基.本文主要概述染色质重塑复合物INO80的组成及其介导的基因表达调控机制研究的最新进展,为进一步研究INO80的生物学功能以及其在发育和疾病中的作用提供基础.

HGF对脑缺血/再灌注大鼠脑iNOS,NO及IL-1β的影响

目的:探讨肝细胞生长因子(HGF)对脑缺血/再灌注(I/R)大鼠脑诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、NO及白细胞介素-1β(IL-1β)的影响。方法:SD大鼠随机分为以下5组:假手术组(Sham组);I/R组;HGF1,HGF2,HGF3组,即I/R大鼠分别注射15,30,60μg/kg HGF。线栓法建立局灶性脑I/R模型,脑缺血1.5 h再灌注24 h后,测定缺血区脑组织iNOS活性及NO含量,检测iNOS及IL-1βmRNA水平的变化,测定iNOS蛋白表达水平及IL-1β含量。另取体外培养的大鼠大脑皮层神经元行I/R处理,检测iNOS和IL-1β蛋白表达水平及NO含量。结果:大鼠缺血区脑组织iNOS活性升高、NO含量增加,iNOS和IL-1βmRNA表达上调,iNOS蛋白表达增多,IL-1β含量增加。注射不同剂量HGF均能降低缺血区脑组织iNOS活性及NO含量,下调iNOS和IL-1βmRNA的表达,抑制iNOS蛋白的表达,降低IL-1β含量。此外,HGF可明显下调体外I/R神经元IL-1β和iNOS蛋白的表达,降低NO含量。结论:抑制IL-1β的表达,减少iNOS的表达,降低NO含量可能是HGF减轻脑缺血损伤的机制之一。

舌鳞癌组织iNOSmRNA表达及其意义

背景及目的:近年的研究发现一氧化氮在肿瘤的发生、发展中起着重要的作用,在头颈肿瘤中检测出高水平的诱导型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase,iNOS)表达,并与肿瘤的进展正相关,未见有关口腔癌中iNOSmRNA与其生物学行为相关的报道。本文拟研究舌鳞癌组织中iNOSmRNA表达与其侵袭性生长、颈淋巴结转移、预后的相关性。方法:原位杂交检测常规石蜡包埋的68例舌鳞癌活检组织中iNOSmRNA的表达;对所研究的舌鳞癌病例进行随访,获取有关预后资料;用原位杂交技术来分析iNOSmRNA与舌鳞癌侵袭性生长、颈淋巴结转移、预后的相关性。结果:①舌鳞癌浸润肌层组与无肌层浸润组iNOSmRNA阳性率分别为86.1%、48.0%,两组间差异有显著性(P<0.05),相关系数为0.3。②iNOSmRNA在舌鳞癌有颈淋巴结转移组阳性率为85.7%,无颈淋巴结转移组阳性率为62.5%,两组间差异有显著性(P<0.05),相关系数为0.3。③舌鳞癌iNOSmRNA表达阳性组3年生存率显著低于iNOSmRNA表达阴性组(P<0.05)。结论:①iNOSmRNA阳性表达与舌鳞癌的侵袭性生长、颈淋巴结转移正相关。②舌鳞癌组织中iNOSmRNA表达阳性的病例较iNOSmRNA表达阴性的病例预后差。

复方蜥蜴散对慢性萎缩性胃炎模型大鼠血清NO及iNOS水平影响的实验研究

目的:观察复方蜥蜴散对慢性萎缩性胃炎(Chronic atrophic gastritis,CAG)模型大鼠血清NO及iNOS水平的影响,探讨其治疗CAG的作用机制。方法:采取55℃热盐水、2%水杨酸、20mmol/L脱氧胆酸钠三个致萎缩因素配合饥饱失常造成CAG模型。将实验动物分为正常对照组,模型对照组,维酶素组,复方蜥蜴散高、中、低剂量组。检测大鼠血液中NO和iNOS水平及观察胃黏膜组织学方面的改变。结果:模型组大鼠NO和iNOS水平明显高于正常组(P<0.01),病理组织学上也有较大改变,而经复方蜥蜴散治疗1个月后,NO和iNOS水平恢复正常,胃黏膜病理组织学改善明显。结论:复方蜥蜴散可以逆转萎缩胃黏膜的病理改变,发挥保护胃黏膜的作用。

大黄酚对糖尿病脑病大鼠海马中BDNF、iNOS和氧化应激的影响

目的探讨大黄酚对糖尿病脑病的神经保护作用及其分子机制。方法应用水迷宫实验检测大黄酚对糖尿病大鼠模型学习记忆的影响;应用试剂盒法检测不同实验组海马中胆碱酯酶(AChE),胆碱乙酰基转移酶(ChAT),脑源性神经营养因子(BDNF),诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和氧化应激相关指标(CAT、SOD、GSH)的活性。结果大黄酚改善了糖尿病大鼠模型的学习记忆能力,增强了糖尿病大鼠模型组海马中AChE和BDNF的活性,抑制了模型组海马中ChAT、iNOS、CAT、SOD和GSH的活性。结论大黄酚可能通过增强BDNF的活性,下调iNOS的功能及抗氧化途径从而对糖尿病脑病产生保护作用,其可能成为临床上治疗糖尿病脑病的新型药物。

温肺降浊方对血管性痴呆大鼠认知功能及VEGF和iNOS表达的影响

目的观察温肺降浊方对血管性痴呆(VD)大鼠的认知功能的改变及其对脑内相关血氧动力改变诱导的血管内皮生长因子(VEGF)以及一氧化氮合酶(iNOS)基因表达,以评价温肺降浊方的脑保护作用。方法实验大鼠随机分为:空白对照组、假手术组、模型组、尼莫地平组、温肺降浊方组,采用双侧颈总动脉永久结扎法制备VD动物模型,以Morris水迷宫试验和穿梭箱实验检测来评价大鼠的认知功能,采用免疫组化法测定大鼠VEGF和iNOS的表达。结果模型组的潜伏期最短,错误次数最多(P<0.01)。温肺降浊方组的潜伏期大于尼莫地平组(P<0.01)。温肺降浊方组及尼莫地平组潜伏期大于模型组(P<0.01)。同时,假手术组与空白对照组大鼠跨越平台次数、目标象限次数无差异(P>0.01);模型组跨越平台次数、目标象限次数均低于假手术组(P<0.01);温肺降浊方组及尼莫地平组越平台次数、目标象限次数高于模型组(P<0.01);温肺降浊方组与尼莫地平组指标比较,差异有统计学意义(P<0.05)。温肺降浊组、尼莫地平组VEGF阳性细胞多于模型组(P<0.01),温肺降浊方组阳性细胞数多于尼莫地平组(P<0.05)。各组大鼠海马区iNOS阳性细胞数分布状况:假手术组及空白对照组iNOS阳性细胞数低于模型组,温肺降浊方组和尼莫地平组iNOS阳性细胞数低于模型组,温肺降浊方组iNOS阳性细胞数与尼莫地平组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论温肺降浊方能抑制血管性痴呆大鼠iNOS表达,上调VEGF的表达,改善认知功能。