月桂酰精氨酸乙酯胞内抑菌机制及抗消化道蛋白酶水解研究

本文通过对月桂酰精氨酸乙酯(LAE)的抑菌谱、细菌细胞胞内的抑菌机制以及耐受消化道蛋白酶水解的研究发现,LAE对G+菌、G-菌、真菌均有广谱抑菌活性,且对G+菌的抑菌活性普遍高于G-菌和真菌。LAE在凝胶阻滞实验中可以与菌体基因组强烈结合,随浓度增加阻滞现象更明显。LAE能抑制胞内蛋白的合成,使得碱性磷酸酶、β-半乳糖苷酶表达活性降低。LAE对胃蛋白酶和胰蛋白酶的耐受能力都很差,胃蛋白酶可部分水解LAE,胰蛋白酶能完全水解LAE,证明LAE可被消化道内蛋白酶水解,不会在肠道内保留。

乳酸链球菌素(Nisin)抑菌作用及其抑菌机理的研究

通过抑菌试验确定了乳酸链球菌素(Nisin)的高产菌株-乳酸乳球菌乳酸亚种T0625菌株的抑菌谱。结果显示,含有乳酸链球菌素的发酵液对革兰氏阳性细菌有抑制作用,但对革兰氏阴性细菌、酵母菌和霉菌无抑制作用。从T0625菌株发酵液中提取乳酸链球菌素加入金黄色葡萄球菌培养液中进行抑菌试验,结果培养液蛋白质含量提高、电导率增加,未出现对数生长期。透射电镜观察发现,加入乳酸链球菌素后,菌体变形,出现质壁分离现象,进而菌体细胞破裂,细胞内容物大量外泄,菌体成为不规则残片。SDS-PAGE凝胶电泳显示,乳酸链球菌素作用使金黄色葡萄球菌菌体内蛋白质减少,培养液中蛋白质增加。推测乳酸链球菌素的作用位点为细胞膜,具有破坏菌体细胞膜完整性的作用。试验结果支持了"孔道形成"理论的观点。

头孢类抗生素对临床常见革兰阴性杆菌体外抗菌活性的比较研究

目的 为证实头孢吡肟的抗菌作用。方法 利用临床分离的常见革兰阴性杆菌 ,对头孢吡肟与常用的第三代头孢菌素和氨曲南的体外抗菌活性进行比较。结果 头孢吡肟和头孢他啶对临床常见革兰阴性杆菌的体外抗菌活性总体上比头孢噻肟和氨曲南强 ,尽管头孢吡肟对染色体介导的 类头孢菌素酶的诱导作用弱并能耐受其水解 ,以致耐头孢他啶的产气肠杆菌、弗劳地枸橼酸杆菌对头孢吡肟的体外抗菌活性仍敏感 ,但由于超广谱 β-内酰胺酶 (ESBL)在阴沟肠杆菌中的出现 ,使阴沟肠杆菌对头孢吡肟的耐药率高达 2 7.9%。 3种非发酵菌对头孢吡肟的敏感性也不比其他广谱头孢菌素更高 ,甚至在铜绿假单胞菌和嗜麦芽窄食单胞菌中 ,头孢吡肟比头孢他啶的耐药率更高。结论 对头孢吡肟而言 ,除非采取了有力的医院感染控制措施防止 ESBL 和多重耐药细菌 (如嗜麦芽窄食单胞菌 )的扩散 ,使用头孢吡肟治疗严重感染的住院患者并不安全有效。

枯草芽胞杆菌SNUB16的抗真菌作用研究

本文测定了枯草芽胞杆菌SNUB16发酵液无菌滤液的抗菌谱及无菌滤液对尖镰孢和棉花枯萎病菌孢子萌发和菌丝生长的影响。结果表明,枯草芽胞杆菌SNUB16发酵液无菌滤液对23株真菌有抗菌作用,尤其对植物病原真菌尖镰孢、棉花枯萎病菌、玉米大斑病菌、辣椒炭疽病菌和小麦根腐病菌有显著抗菌作用。发酵液无菌滤液可使尖镰孢及棉花枯萎病菌孢子萌发率下降,芽管顶端、菌丝末端及菌丝中央发生畸形的球状结构,菌丝干重减少,菌丝细胞损伤,使细胞内物质外泄。

动物抗菌肽的研究及应用

抗菌肽是具有抗菌活性的一类短肽,广泛存在于生物界.研究表明,除了具有广谱抗菌活性外,抗菌肽还具有抗病毒、抗真菌、抗寄生虫及抗肿瘤等生物活性.基于对抗菌肽的分类与特性、结构与活性、作用机理等方面进行系统的分析,综述了抗菌肽研究进展及应用前景.

贝莱斯芽孢杆菌Pm9生物防治潜力及全基因组分析

为探究贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)Pm9对植物病害的生防潜力,明确其抑菌广谱性、无菌发酵滤液抑菌活性的稳定性、抑菌机制和抑菌物质遗传基础,并为生防制剂开发利用提供依据,采用平板对峙法测定菌株Pm9对小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)、小麦全蚀病菌(Gaeumannomyces graminis)、小麦纹枯病菌(Rizoctonia cerealis)、君子兰茎基腐病菌(Fusarium proliferatum)、番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)和南天竹炭疽病菌(Colletotrichum karstii)6种供试植物病原菌的抑制作用。以葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)为供试病原菌,测定菌株Pm9无菌发酵液抑菌物质稳定性,并考察无菌发酵滤液对葡萄座腔菌孢子萌发和菌丝生长的影响。利用3代Nanopore测序仪测定菌株Pm9的全基因序列,通过BLAST比对分析明确抑菌作用的遗传基础。结果表明,菌株Pm9对6种植物病原菌均具有抑制作用,抑制率在55.5%~87.5%之间。菌株Pm9无菌发酵滤液在pH 4~10之间抑菌活性稳定,耐受酸碱范围广,同时对紫外线照射和蛋白酶K不敏感,80℃以内具有较强的热稳定性。菌株Pm9可使葡萄座腔菌菌丝膨大畸形,抑制菌丝生长和孢子萌发。菌株Pm9含有合成地非西丁(difficidin)、丰原素(fengycin)、bacillibactin、表面活性素(surfactin)等多种肽聚糖和聚酮糖类抗性化合物的基因簇,以及能够降解病原菌细胞壁的β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶相关的基因。贝莱斯芽孢杆菌Pm9可抑制多种植物病原菌的生长,抑菌物质稳定性高,具有产生多种肽聚糖和聚酮糖类抗性化合物和细胞壁水解酶的能力,本研究为菌株Pm9进一步开发应用奠定了基础。

莳萝蒿精油成分分析及抑菌活性机理探究

为了确定莳萝蒿精油的化学成分,并探究其抑菌活性及抑菌机理。该研究采用水蒸气蒸馏法提取莳萝蒿精油,并通过气相色谱-质谱联用法测定其化学成分。采用抑菌圈法、二倍稀释法和生长曲线法测定精油的抑菌活性,采用电导率法和扫描电镜法探究精油的抑菌机理。结果表明:(1)莳萝蒿精油的主要化学成分包括醇类(47.12%)和萜烯类(19.90%),在所有成分中桉油精(12.39%)含量最高,其次为松油醇(8.70%)。(2)精油对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌圈直径分别为(22.57±1.68)mm和(15.36±0.71)mm。(3)精油对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的最小抑菌浓度分别为3.25和7.5μL/mL,最小杀菌浓度分别为7.5和15μL/mL。(4)当精油浓度为1.625和3.25μL/mL时,其分别能够延缓金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的生长;当精油浓度为3.25和7.5μL/mL时,其能够完全抑制金黄色葡萄球菌的生长;当精油浓度为7.5和15μL/mL时,其能够完全抑制大肠杆菌的生长。(5)经精油处理之后的细菌,其相对电导率明显增大,且随精油浓度的增加而增大,同时其细胞膜发生了萎缩和破裂的现象。研究发现,莳萝蒿精油富含醇类和萜烯类等多种活性物质,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有良好的抑菌活性,且莳萝蒿精油能够改变细胞的膜结构,导致细菌中的内溶物发生泄漏,从而抑制细菌生长。

贝莱斯芽孢杆菌Mr12预防苹果轮纹病等病害的潜力及其全基因组分析

【目的】探究新疆野苹果内生贝莱斯芽孢杆菌Mr12对多种植物病害的生防潜力,明确其抑菌活性物质稳定性、抑菌作用表现和抑菌物质遗传基础,为生防制剂开发利用提供依据。【方法】采用平板对峙法测定菌株Mr12对6种供试植物病原菌的抑制作用。以苹果轮纹病菌(Botryosphaeria dothidea)为供试病原菌,测定Mr12无菌滤液抑菌稳定性及无菌滤液对苹果轮纹病菌孢子萌发和菌丝生长的影响;利用3代测序平台Nanopore测定Mr12的全基因序列,通过BLASTX比对注释所含基因,预测分析菌株Mr12抑菌作用的遗传基础。【结果】菌株Mr12对6种供试植物病原菌均具有抑制作用,抑制率在55%~91%。该菌株无菌滤液在pH 4~10范围内抑菌活性稳定,对酸碱的耐受范围广;对紫外线照射和蛋白酶K不敏感,80℃以内具有较强的热稳定性。Mr12无菌滤液可使苹果轮纹病菌菌丝膨大畸形,抑制菌丝生长和孢子萌发。通过全基因序列信息分析,发现Mr12含有合成difficidin、fengycin、bacillibactin、surfactin等多种肽聚糖和聚酮糖类抗性化合物的基因簇,以及能够降解病原菌细胞壁的β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶相关的基因。【结论】菌株Mr12对多种植物病原物具有广谱拮抗作用,抑菌物质稳定性高,具有产生多种肽聚糖和聚酮糖类抗性化合物和细胞壁水解酶的能力。

氧化锌/凹凸棒石纳米复合材料的抗菌性能和机制

通过油橄榄叶介导合成氧化锌纳米粒子,将其负载于凹凸棒石上得到复合抗菌材料(ZnO/APT).通过扫描电子显微镜、透射电子显微镜等表征ZnO/APT的合成,通过琼脂稀释法研究ZnO/APT的抗菌活性.结果表明,ZnO/APT对金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为0.25和1.00mg/mL,对大肠埃希菌及产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌的MIC均为2.50mg/mL,对铜绿假单胞菌的MIC为1.00mg/mL,具有广谱抗菌性能.以ZnO/APT为抗菌剂,以大肠埃希菌为模型,通过透射电子显微镜、活/死细菌染色、活性氧检测、DNA琼脂糖凝胶电泳等手段研究其可能的抗菌机制.ZnO/APT纳米复合材料与细菌相互作用时能够捕获细菌,并由外部破坏细菌结构,由内部催化细菌活性氧含量,导致氧化应激失衡.ZnO/APT的接触加剧细菌生理活动的紊乱,抑制并损伤细菌DNA,使细菌死亡.

白藜芦醇及其衍生物的抗菌谱及作用机理

白藜芦醇作为植物体内的天然芪类化合物,有着比较广泛的生物功能。白藜芦醇通过聚合、修饰能产生许多衍生物,具有相似的生物功能。本文主要阐述白藜芦醇的结构、重要的衍生物、抗菌谱及抗菌机理。

一株乳酸杆菌ZL43的分离鉴定及抑菌机制初探

目的:对从泡菜中分离到有较强抑菌活性的乳酸菌ZL43进行鉴定,并对其抗菌谱和抑菌机制进行研究。方法:采用形态学、生理生化特征结合16S r DNA序列分析,对菌株ZL43进行鉴定;采用杯碟法测定ZL43的抗菌谱;通过ZL43对大肠杆菌细胞超微结构、细胞蛋白的合成等方面的研究,探讨ZL43的抑菌机制。结果:菌种鉴定结果表明,ZL43为短乳杆菌(Lactobacillus brevis);ZL43对革兰阳性细菌和革兰阴性细菌均具有较好的抑制作用。扫描电镜结果表明ZL43可以导致大肠杆菌细胞壁破裂或形成孔洞;SDS-PAGE分析表明ZL43能影响大肠杆菌蛋白质的表达与合成。结论:短乳杆菌ZL43具有广谱抑菌活性,可以使细菌的细胞壁破裂或形成孔洞,导致胞内一些物质泄漏,并影响细菌蛋白的合成,使细胞生长受到抑制,进而导致其死亡。

噬菌体AB3裂解酶的抗菌谱及其抗菌机制

目的明确噬茵体AB3裂解酶LysAB3的抗茵谱及其抗菌机制。方法利用扩散法检测裂解酶LysAB3的抗茵谱;扩增裂解酶LysAB3基因序列前端的354 bp以pET28a(+)为载体构建重组质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,Ni^(2+)-NTA亲和层析柱纯化重组蛋白,得到删除了两性多肽结构的裂解酶LysAB3-D,并测定其抗茵率。结果裂解酶LysAB3可以裂解全部40株鲍曼不动杆菌菌株;删除了两性多肽结构后,裂解酶LysAB3-D的抗菌率由95.8%下降至33.3%。结论裂解酶LysAB3的抗茵谱较宽;其杀菌机制可能是通过其两性多肽结构增加细菌外膜通透性,辅助酶解催化域进入其中降解肽聚糖。

富血小板血浆的抑菌作用及其机制的研究进展

随着富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)基础研究的日益深入和临床应用的逐渐广泛,目前PRP已应用于骨科、烧伤整形科、疼痛科及生殖医学科等多种学科。近年来,PRP在促进组织修复方面已逐步得到公认,不仅能促进骨折愈合和软组织损伤修复,还具有减轻伤口疼痛、减少创面并发症发生等特点。除此之外,PRP独特的抑菌作用也成为目前研究的热点之一,然而其抗菌谱及潜在的抑菌机制尚不明确。本文就PRP的体内外抑菌作用及潜在的抑菌机制进行综述,以期为PRP用于临床抗感染治疗提供理论依据。