大鼠肠道菌群对ilexsaponin A_(1)体外代谢转化的影响

目的考察大鼠肠道菌群对毛冬青三萜皂苷ilexsaponin A_(1)体外代谢转化的影响。方法采用HPLC-ESI-QTOF-MS/MS法检测ilexsaponin A_(1)体外肠道菌孵育样品,条件为Kromasil 100-5 C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈(含0.1%甲酸)-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;电喷雾离子源(ESI);负离子模式。对代谢产物进行筛查鉴定,结合二级质谱图,推测代谢产物及其可能的生物转化途径。结果鉴定出14个代谢产物(M1~M14),ilexsaponin A_(1)发生了去糖基化、氧化、还原等代谢反应(M1~M2、M4~M5、M7~M8),其脱糖生成的苷元ilexgenin A进一步发生氧化、羟甲基化、还原等生物转化反应(M3、M6、M9~M11、M13~M14)。结论ilexsaponin A_(1)在大鼠肠道菌群中发生代谢转化,该成分在体内发挥药效并不完全以原型物吸收入血,其苷元ilexgenin A或脱糖后的代谢转化物为其可能的药效物质。

毛冬青皂苷ilexsaponin A1的制备及其药理活性研究

目的:分离制备毛冬青三萜皂苷ilexsaponin A1(IPTS-1),并探讨其药理活性,为阐明毛冬青的活性成分提供实验依据。方法:综合运用色谱法和重结晶法等分离纯化方法进行化合物的制备,采用薄层对照及核磁波谱分析的方法对化合物的结构进行鉴定。通过凝血时间、出血时间、小鼠耳廓微循环实验和大鼠FeCl3诱导血栓实验对IPTS-1的抗凝、活血、抗血栓作用进行评估和探讨。结果:与对照组比较,IPTS-1各剂量均能显著延长小鼠出血时间和凝血时间(P<0.05),且作用呈剂量相关性。IPTS-1可加速小鼠耳廓微循环血流速度,减少FeCl3诱导的大鼠腹主动脉血栓生成质量。结论:毛冬青三萜皂苷IPTS-1具备一定的抗凝、活血、抗血栓作用,可能为毛冬青心血管药理作用的物质基础之一。

加速溶剂萃取/HPLC-MS对毛冬青药材中Ilexgenin A与Ilexsaponin A_1含量的测定

建立了加速溶剂萃取／高效液相色谱-质谱法（ASE／HPLC—MS）测定毛冬青药材中活性成分ilexgenin A和ilexsaponin A1含量的方法。采用ASE萃取毛冬青药材中的活性成分ilexgenin A和ilexsaponin A1，萃取溶剂为甲醇，萃取温度100℃，压力1．0×10^7 Pa，静态萃取模式，循环3次，每次萃取10min。采用HPLC—MS对萃取液中ilexgenin A和ilexsaponin A1进行定量分析，色谱柱选用Dikma Diamonsil C18（4．6mm×250mm，5μm），以水和乙腈为流动相进行梯度洗脱，大气压化学电离源（APCI），定量离子m／z485。ilexgenin A和ilexsaponin A1的线性范围为1．0～200．0mg／L，对毛冬青试样的定量下限分别为19．5和35．0μg/g，RSD分别为6．7％和7．8％，回收率分别为87％～96％和93％-102％。将建立的方法用于分析11个不同产地的毛冬青药材，ilexgenin A含量为0．42～6．3mg／g，ilexsaponin A1含量为0．80～8．9mg／g。

毛冬青三萜皂甙Ilexsaponin B3糖部分的核磁共振法分析

采用1H、13C、DEPT(无畸变极化转移增益法)、1H-1H COSY(氢-氢化学位移相关谱)、1H-1HTCOSY(氢-氢化学位移全相关谱)、HSQC(异核单量子相关谱)、HMBC(异核多键相关谱)等多种NMR分析方法,首次对毛冬青三萜皂甙Ilexsaponin B3的1H和13C NMR信号进行了全归属,特别是应用1H-1H COSY和1H-1HTCOSY相结合的分析方法,对该化合物中氢谱信号严重重叠的糖部分进行了详细的分析,提出了一套对三萜皂甙糖部分信号进行全归属的核磁共振法。

HPLC-ELSD法同时测定毛冬青中3种五环三萜的含量

目的：首次建立同时测定毛冬青中Ilexsaponin B1、Ilexsaponin B2和Ilexgenin A含量的方法并将其运用到同属植物三萜的检测中。方法：采用Cemini C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.5%醋酸水,流速1.0 mL/min,蒸发光散射检测器：漂移管温度为107℃,气体流速为3.0 L/min。结果：Ilexsaponin B1、Ilexsaponin B2和Ilexgenin A线性范围分别为0.25-2.50μg（r1=0.9992）、0.03-0.30μg（r2=0.9995）和0.07-0.70μg（r3=0.9998）,平均回收率（n=6）分别为101.08%、100.13%和100.16%。毛冬青及其同属植物中3种五环三萜Ilexsaponin B1、Ilexsaponin B2和Ilexgenin A的含量差异较大,其中在毛冬青中的含量最高。结论：该方法操作准确、有效,可为冬青属药材的来源和开发利用提供依据,同时测定3种五环三萜的方法可用于冬青属特别是毛冬青药材的质量控制。

毛冬青皂苷在大鼠体内的药物动力学研究

目的研究毛冬青皂苷(ilexsaponin A1)静脉给药后在大鼠体内的药物动力学特性。方法大鼠尾静脉注射给予毛冬青皂苷ilexsaponin A1(30 mg/kg),用HPLC法测定血药浓度,采用DAS2.0软件分析其药代动力学参数。结果大鼠静脉给药后,ilexsaponin A1在体内呈二室模型分布,主要药代动力学参数为:t1/2(α)=3.542min,t1/(2β)=17.636 min,CL=0.02 L.min-1.kg-1,AUC(0→)t=1096 mg.min.L-1,tmax=5 min,Cmax=52.972 mg.L-1。结论该法可用于大鼠血浆中ilexsaponin A1的检测及其体内药物动力学研究;静脉给药后,ilexsaponin A1在大鼠体内分布和消除迅速。

Triterpene saponins with XOD inhibitory activity from the roots of Ilex pubescens

A new triterpene saponin with 28-nor-urs-12（13）,18（17）-dien-3β-ol as aglycone,named ilexsaponin C（1） was isolated from the roots of Ilex pubescens,together with three known saponins 2,3 and 4.The structure of 1 was elucidated on the basis of spectral analysis including 1D and 2D NMR and HR-ESI-MS.Saponins 1 and 4 exhibited significant XOD inhibitory activity in the test.