Stain Materials’Role in Biological Research:A Tool in Heath Care

Stains and staining methods significantly assist in diagnoses in medical research and health care.Certain color of a dye can identify the location of a tumor within a specimen.Applying histochemical-staining enabled morphological identification of fibrin in the lymphoid tissue during cancer progression.Staining methods in combination with the LSFM(light-sheet fluorescence microscopy)allowed tracing the drug penetration,development and spread of tumors.The Curcumin dye is in use for labelling and imaging of Aβplaques in post-mortem brain tissue.Immunofluorescent staining methods are employed in detection of some important proteins in early diagnostic changes relevant to heart damage.The methods are developed in medical research to include stem cells and tissue engineering,cell culturesproperties and capabilities,connective tissues and extracellular matrix,nervous system,musculoskeletal system;respiratory system,liver and gastrointestinal tract,and male and female reproductive systems.

组织芯片的基本应用范围

目的 探索组织芯片的基本应用范围。方法 将HE染色、组织化学、免疫组织化学、原位杂交和荧光原位杂交技术应用于组织芯片 ,了解这些技术应用于组织芯片的可行性和有效性。结果 这些检测技术在组织芯片中均有清晰、定位明确的着色。结论 HE染色、组织化学、免疫组化、原位杂交和荧光原位杂交技术可有效地用于组织芯片 ,因此 ,组织芯片可用于组织形态观察、组化特性分析以及蛋白和核酸 (RNA和DNA)在组织细胞中的定位性研究。

PAS、AB染色法在软骨蛋白黏多糖检测中的运用

[目的 ] 探讨过碘酸雪夫氏反应PAS染色 (PeriodicAcidSchiff)及阿利辛兰AB染色 (AlcianBlue)组织化学分析法在检测软骨组织蛋白黏多糖含量中的运用价值。 [方法 ] 以原发性退行性骨关节炎动物模型的软骨为检测标本 ,分别采用PAS和AB染色法 ,观察软骨组织中蛋白黏多糖的含量。 [结果 ] PAS染色法中软骨组织基质中的中性黏多糖呈紫红色 ,软骨细胞内为无色。AB法中软骨细胞周围的酸性黏多糖呈深蓝色 ,基质呈淡蓝色。此外 ,随着动物模型关节炎程度的不断加剧 ,即软骨组织中蛋白黏多糖丢失的不断增加 ,标本中的紫红色和深蓝色也相应减退 ,直至消失。 [结论 ] PAS染色法和AB染色法能清楚地区分软骨基质中的中性黏多糖和细胞囊内的酸性黏多糖 ,并能对它们的改变进行量化分析。可作为软骨组织中黏多糖检测的有效方法。

微波凝固肝癌细胞活性的酶组织化学检测

目的比较HE染色和酶组织化学染色对判断微波消融灭活肝癌细胞活性的价值。方法用10W、1.5～2min(85～95℃)和5W、1.5～2min(55～65℃)两种条件的微波消融,分别治疗A、B两组(每组3只)小鼠移植型肝癌,并取微波消融前后的肿瘤组织标本制成切片,进行常规HE染色及琥珀酸脱氢酶的酶组织化学染色,在显微镜下观察两种染色的情况。结果从HE染色观察到,A、B两组小鼠肝癌组织在微波消融后的即刻,其细胞核形态和排列较消融前无明显改变。酶组织化学染色显示,A组肿瘤消融区内的琥珀酸脱氢酶的活性均消失,这说明了癌细胞的灭活;B组肿瘤消融区内上述的酶活性都呈散在阳性,提示部分癌细胞仍存活,A、B两组的肿瘤灭活效果明显不同(Ρ<0.01)。结论HE染色不能评价微波消融对肝癌的即刻灭活效应,用酶组织化学染色测琥珀酸脱氢酶的活性能判定MA对肝癌的灭活效果。

大鼠室周器官的形态学观察

目的系统观察 5个室周器官的微细结构。方法对 4 0只成年SD大鼠行脑切片 ,分别行硫堇和Tolivia还原银染色 ,以及NADPH d组织化学染色。结果①室周器官微小的体积与其异常丰富的血床形成鲜明的反差 ;② 5个室周器官依体积大小次序为穹隆下器、最后区、正中隆起、连合下器、终板血管器 ;③穹隆下器和终板血管器可能含神经分泌细胞 ;④连合下器具有室管膜下神经细胞层 ;⑤正中隆起具有最密集和最多的伸展细胞 ,一氧化氮合酶均呈阳性 ;⑥在最后区与延髓中央管之间 ,可能有神经纤维联系。

Lyon′s PAS标准化染色方法与传统PAS法的比较研究

目的:Lyon′s PAS标准法与传统PAS法的比较。方法:用相同组织切片经Lyon′s PAS标准法和传统PAS方法同时染色,观察阳性强度,比较两法的重复性。结果:相同组织切片经Lyon′s PAS法染色阳性产物明显强于传统法,重复性更好。结论:Lyon′s PAS标准法优于传统法。

家兔主要黏膜免疫器官肥大细胞的免疫组化及超微结构特征

为了探讨家兔黏膜免疫器官肥大细胞(MC)的分布、超微结构及巴氏杆菌感染后特征,对家兔空肠及圆小囊MC进行不同时间甲苯胺蓝染色与血管活性肠肽(VIP)和/或P物质(SP)免疫组化检查,并进行光、电镜观察。结果发现,采用不同固定液和染色方法所获得的MC数量不同,家兔黏膜免疫器官肥大细胞主要分布于黏膜固有层或黏膜下层结缔组织中;当巴氏杆菌感染时MC数量显著增加,这可能对机体的抗感染有重要意义。电镜下,MC胞浆内充盈大量呈电子密度不同的均质状物基质颗粒,未见特殊超微结构。

一种可同时显示三种粘液的粘液套染法

目的 :探讨一种能在同一张切片中同时显示硫酸化酸性粘液、非硫酸化酸性粘液及中性粘液的粘液染色法。方法 :将高铁二胺 (HID)、爱先蓝 (AB)及过碘酸雪夫氏反应 (PAS)三种粘液染色法结合起来 ,按一定顺序 ,对14 7例胃粘膜肠化及胃癌标本中的粘液进行套染 ,并提出HID AB(pH2 .5 ) PAS粘液套染法。结果 :硫酸化粘液呈棕黑色 ,一般酸性粘液呈蓝色 ,中性粘液呈红色。在同一张切片中三种粘液颜色有明显反差 ,背景清晰。结论 :HID AB(pH2 .5 ) PAS粘液套染法是一种便捷、实用。

脑溢安对实验性脑出血大鼠细胞色素c氧化酶活性的影响

目的 :从神经元能量代谢的角度 ,探讨脑溢安治疗脑出血的作用机制。方法 :采用胶原酶诱导大鼠脑出血模型 ,以组织化学方法结合灰度值半定量法测定细胞色素c氧化酶 (cytochromecoxide,CO)活性 ,配合Nissl’s染色和细胞计数。结果 :脑溢安可维持大鼠海马CA1区CO活性 ,减少细胞缺失。结论 :脑溢安在脑出血中的神经元保护机制可能与其维持CO活性 ,改善细胞有氧代谢 。

养血清脑颗粒对蒙古沙鼠全脑缺血再灌注后Glu和Caspase-3表达的影响

目的探讨养血清脑颗粒对全脑缺血再灌注后的蒙古沙鼠的神经保护作用。方法采用蒙古沙鼠两血管(2-VO)结扎30min再灌注损伤模型,将模型随机分为假手术组、模型组、治疗组。用Nieel染色法观察蒙古沙鼠海马细胞的变化,用免疫组织化学方法观察假手术组、模型组、治疗组Glu、caspase-3阳性细胞表达变化。并将3组结果进行比较。结果蒙古沙鼠全脑缺血再灌注治疗组海马CA1存活细胞数明显增加,Glu、caspase-3阳性细胞表达量较模型组明显降低,凋亡细胞相应减少。结论养血清脑颗粒能选择性抑制Glu、caspase-3的表达,减少神经细胞的死亡,发挥神经保护作用。

应用冷Schiff组织化学法检测人体组织脂质过氧化反应的研究

自由基引发的生物膜不饱和脂肪酸脂质过氧化反应涉及多种疾病过程。多年来检测脂质过氧化反应一直沿用生物化学 (如硫代巴比妥酸法测定丙二醛 )或生物物理技术 (如分光光度法测定共轭双烯 )。自从冷 Schiff组织化学染色技术用于自由基研究以来 ,使形态学方法研究脂质过氧化反应成为可能。当前 ,应用冷 Schiff组织化学法进行组织细胞的脂质过氧化反应检测大多限于动物实验研究。本研究对多种人体离体新鲜组织的冰冻切片应用冷 Schiff组织化学法进行检测 ,未发现被测组织存在组织化学水平上的脂质过氧化反应 ;但对被测组织人为施加氧化攻击 (用 Fe- NADPH促氧化剂孵育 )后 ,肝、肾及胃的泌酸细胞与其它组织相比呈现较明显的脂质过氧化反应 ;皮肤、脂肪组织几乎不出现脂质过氧化反应 ;甲状腺 C细胞、肌肉、骨骼等与钙代谢、贮存及利用相关的组织也出现较明显的脂质过氧化反应。结论 :冷 Schiff组织化学方法检测人体组织脂质过氧化反应具有简便易行、同时可以形态学定位的优点 ,在医学生物学、肿瘤学及老年医学研究中具有应用前景。

大鼠胸腺的神经分布——银染色和乙酰胆碱酯酶组织化学的研究

用银染色法和乙酰胆碱酯酶(AChE)组织化学法,观察大鼠胸腺的神经纤维分布。银染色法显示,在胸腺髓质中神经纤维构成复杂的网络状结构。在胸腺皮质和髓质中,均存在AChE阳性神经纤维,其分支终止或环绕于胸腺细胞的附近。此外,AChE阳性神经纤维与肥大细胞可形成紧密邻接。有些肥大细胞含有AChE阳性反应物。作者认为,胸腺皮质和髓质都接受副交感的胆碱能神经纤维的支配,后者对胸腺细胞和肥大细胞等可能起调节作用。

Lyon’s Feulgen标准化染色方法与传统Feulgen法的比较研究

目的:Lyon’s Feulgen标准法与传统Feulgen法的比较。方法:用相同组织切片经Lyon’s Feulgen标准法与传统Feul- gen方法同时染色,观察阳性强度,比较两法的重复性。结果:相同组织切片经Lyon’s Feulgen标准法染色阳性产物明显强于传统Feulgen法,重复性更好。结论:Lyon’s Feulgen标准法优于传统法。

基质金属蛋白酶-9和核因子-κB在颅内动脉瘤中的表达

目的观察基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和核因子-κB(NF-κB)在颅内动脉瘤中的表达情况。方法用免疫组织化学方法对23例经手术和病理证实的颅内动脉瘤标本中的MMP-9、NF-κB的表达进行检测,对照组为20例非血管性疾病的外伤患者正常颅内血管,将所得染色标本在光镜下观察,并用医学图像分析系统进行定量分析。结果颅内动脉瘤的MMP-9、NF-κB阳性表达率分别为69.6%和56.5%,20例正常脑动脉血管组织中无MMP-9、NF-κB阳性表达(P<0.05);MMP-9在动脉瘤壁内、中、外膜中均有表达,其中外、中膜阳性表达较高;NF-κB主要在动脉瘤壁中、外膜表达。结论 MMP-9及NF-κB可能与颅内动脉瘤的发生,增长以及结构维持有关。

红鲫肥大细胞鉴别方法比较

目的探讨红鲫(Cyprinus carpio)肥大细胞(MC)的不同鉴别方法。方法取已被迟缓爱德华菌感染的红鲫鳃组织,用Bouin氏液固定3 h,苏木精-伊红(HE)法、甲苯胺蓝(TB)法、阿利新蓝(AB)法、中性红法、Masson三色法、May-Grünwald Giemsa(MGG)法与免疫组织化学SABC法观察MC。同时使用Wright-Giemsa染色的头肾涂片法作为补充。结果阿利新蓝和甲苯胺蓝法显示肥大细胞良好,MGG法次之。免疫组织化学法检测类胰蛋白酶阳性肥大细胞数量较少,阳性反应弱。涂片法可将细胞分散开,并显示出不同发育阶段肥大细胞的特性。结论组织化学染色结合涂片法和免疫组织化学染色,可以更好的识别鱼类肥大细胞。

溶甲涂片镜检结合组化染色对甲真菌病病原学诊断的意义

目的 探讨溶甲涂片镜检结合组化染色对甲真菌病病原学诊断的意义。方法 采用KOH直接镜检、真菌培养、溶甲涂片直接镜检、溶甲涂片PAS染色和凝集素组化染色。结果 12 9例KOH直接镜检、真菌培养和溶甲涂片镜检的阳性率分别为 73 .3 %、5 6.6%、95 .3 %。 3 2例溶甲涂片真菌 7个属与 12种凝集素的结合形式具有属间区别。结论 溶甲涂片镜检结合组化染色阳性率高并有助于鉴别真菌菌属。

植物酶的组织和细胞化学定位研究方法

酶是参与植物体内生化反应的特殊蛋白质。在保持活组织和细胞结构完整性的条件下,利用组织化学、细胞化学、免疫学和显微检测等技术研究酶的即位定位,是了解酶在组织、细胞和亚细胞中的分布、活性动态与定量及酶功能等的重要途径。对植物体中酶定位的组织化学和细胞化学方法的概念、原理与研究进展进行了综述,并根据国际酶化学分类编号顺序,分别介绍了25种酶的组织化学染色定位所用的反应介质和染色方法及46种酶的细胞化学定位方法的参考文献。

慢粒血片及髓片中出现小巨核细胞的临床意义

对３６ 例慢粒患者的血片及髓片中小巨核细胞出现的变化进行探讨分析． 结果提示： 慢粒不同时期小巨核细胞出现的频率各不一样． 动态地观察小巨核细胞在数量上的变化， 可以及时了解慢粒的病情进展及演变规律， 为早期治疗提供一定的实验依据．

猪圆环病毒感染后部分免疫器官的组织化学检测

采用非特异性酯酶和甲基绿-派洛宁两种染色方法,对40头猪的淋巴结、脾脏和扁桃体进行研究,利用细胞计数软件,统计分析T、B淋巴细胞的数量变化。结果表明,圆环病毒可导致机体淋巴组织T细胞和B细胞减少,且淋巴细胞数量的变化受伴发病原的影响,其中猪瘟病毒影响最大,伪狂犬病病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒次之。

蔷薇红景天对大鼠脑缺血的保护作用研究

为观察蔷薇红景天对大鼠局灶性脑缺血模型的保护作用。采用Longa改良线栓法建立大鼠左侧大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,通过观察大鼠脑组织病理切片,免疫组化,脑指数等指标,以及测定MDA、NO、GSH-PX、LD、Na+K+-ATP酶、Ca2+Mg2+-ATP酶的含量和SOD、NOS的活性,判断大鼠脑缺血情况及蔷薇红景天对大鼠脑缺血模型的保护作用,利用分子对接技术进一步阐述蔷薇红景天对大鼠脑缺血保护作用的机制。结果显示,蔷薇红景天能够显著降低大鼠血清中的MDA、NO、NOS和脑组织中LD的含量;显著升高血清中的SOD及脑组织中的GSH-PX、Na+K+-ATP酶、Ca2+Mg2+-ATP酶的含量;与模型组相比,各给药组的脑指数均有显著降低,从HE染色和免疫组化的图片来看,各给药组的脑缺血情况都有所改善,从分子对接的结果来看,主要是通过蔷薇红景天中化合物3、6、9、11、13、14对大鼠脑缺血起保护作用。由此可知,蔷薇红景天对大鼠局灶性脑缺血模型有一定的保护作用。