鼠抗hTNF－α单克隆抗体轻链可变区基因片段的克隆和cDNA序列测定

目的：获得鼠抗人肿瘤坏死因子－α（ｈＴＮＦ－α）单克隆抗体轻链可变区基因序列。方法：采用反转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，以一对针对鼠Ｉｇ轻链可变区（ＶＬ）基因的引物，从分泌鼠抗ｈＴＮＦ－α单克隆抗体的Ｅ６杂交瘤细胞株中扩增和克隆ＶＬ基因片段，用双脱氧链终止法测定其核苷酸序列，并进行计算机分析。结果：此ＶＬ基因长３４２ｂＰ，可编码１１４个氨基酸，为开放读框；有明确的框架区（ＦＲＳ）和抗原互补决定区（ＣＤＲＳ）；含有抗体可变区特征性的两个半胱酸残基。在基因数据库（ＥＭＢＬＧｅｎｅＢａｎｋ１９９５）中，未查见相同序列的基因。结论：此ＶＬ基因系重排的鼠Ｉｇ轻链基因。