人红细胞类同种特异性自身抗体的血清学试验分析与研究

目的近年来,实验室临床样本的检测中,类同种特异性自身抗体(以下简称“类抗体”)样本检出率不断增加。抗球蛋白微柱凝集卡技术逐渐普及应用,进一步提高了类抗体检出率。为了研究类抗体实验室检测特点,探讨类抗体输血原则,本文进行了回顾性数据分析,为产生类抗体的患者提供有效的检测方法和临床建议。方法对160名产生类抗体的受检者进行详细的性别、年龄、诊断、血清学试验等回顾性分析。分析实验所得数据,找寻相关规律。结果类抗体最常见特异性为RH血型类抗体,包括类抗-Ce,类抗-Ec和类抗-D等占94.48%。CCDee分型是类抗体受检者最常见分型。血清微柱凝集卡法检测类抗体反应性较强(类抗体计分值最高:7.16分)。血清试管抗球蛋白法反应强度差异性最为显著,鉴别类抗体特异性较好。结论鉴定类抗体特异性比较困难,建议选择多种鉴定方法。微柱凝集卡法检测类抗体的反应性较强,抗球蛋白法鉴别类抗体特异性较好,建议此两种方法联合使用。输血治疗时应尽量避开类抗体特异性,输注相应抗原阴性的红细胞。

静脉输注丙种球蛋白后对交叉配血的影响

目的研究静脉输注丙种球蛋白后对患者交叉配血的影响。方法对2014年医院送检的8例抗体筛选阴性、交叉配血不合的患者标本,采用试管法检测血型,采用微柱凝胶技术做抗体筛选、交叉配血、直接抗人球蛋白试验,检测血浆中抗-A、抗-B,热放散试验,用Liss/Coombs卡检测放散液。结果患者静脉输注丙种球蛋白后,5例A型和2例AB型患者血浆中检测到抗-A,1例B型患者血浆中检测出抗-B,患者直接抗人球蛋白试验阳性,且都与同型悬浮红细胞交叉配血不合。结论静脉丙种球蛋白制剂中含有的ABO血型抗体可引起交叉配血不合、血型鉴定困难。

微柱凝胶抗球蛋白技术检测红细胞同种抗体能力的研究

目的 研究微柱凝胶抗球蛋白技术检测红细胞同种抗体的能力.方法 采用微柱凝胶抗球蛋白技术对127例含有红细胞同种抗体的样本进行检测,使用经典的试管抗球蛋白法平行检测,比对两种方法的检测结果.结果 微柱凝胶抗球蛋白法对于红细胞同种抗体的检出率为98.4%,试管抗球蛋白法的检出率为80.3%.其中,试管抗球蛋白法对抗-D,-E,-C,-c,-e,-C＋e,-E＋c,-Mur,-Dia,-Dib,-Fyb,-Jka,-Jkb,-Lea和-P1抗体均能检出,但对于MNS血型系统抗M抗体的检出率仅为36.4%,对未知抗体特异性的冷抗体检出率为57.7%;而微柱凝胶抗球蛋白法对所有样本包含的红细胞同种抗体均能检出,除了Kidd血型系统,漏检率为33.3%.结论 微柱凝胶抗球蛋白法对于红细胞同种抗体的检出率高于试管抗球蛋白法,但是可能会漏检Kidd血型系统同种抗体,建议实验室在使用微柱凝胶抗球蛋白法的同时,应结合试管抗球蛋白方法,可以更有效地检出抗体,特别是输血前相容性试验.

不规则抗体检测的方法学比较与分析

目的比较不同的检测方法,在各种不规则抗体检测时,表现出的差异性,并总结相关规律。方法对本实验室通过盐水法、间接抗球蛋白法、凝聚胺法、微柱凝集法检出的293例不规则抗体进行回顾性比较与分析。结果Rh系统抗体使用不同方法检测无显著性差异,Kidd系统抗体在抗球蛋白法中最易被检出,微柱凝集法可以检出部分室温盐水阴性的Ig M抗体。结论运用多种检测方法,可提高不规则抗体的检出及鉴别能力,更好地保障临床用血的安全和有效性。

微柱凝胶法和传统试管法在新生儿溶血病诊断中的比较研究

目的:探讨微柱凝胶技术对新生儿溶血病(HDN)的诊断价值。方法:选取128例疑似HDN的新生儿,分别用微柱凝胶法和传统试管法进行直接抗人球蛋白试验(DAT)、间接抗人球蛋白试验(IAT)和放散试验并对比结果。结果:在128例中104例诊断为HDN患儿,微柱凝胶法的阳性检出率为92.31%,传统试管法为80.77%,微柱凝胶法的敏感性高于传统试管法(χ2=5.92,P<0.05);在微柱凝胶法3项试验中,以放散试验的阳性率最高,DAT阳性率最低。结论:对于辅助诊断HDN,微柱凝胶法比传统试管法更具优势。

温州地区人群Duffy血型基因频率分布及供受者Duffy血型不相合情况调查

目的 了解本地人群Duffy血型基因频率的分布以及输血供受者Duffy血型不相合的情况。方法 2018年3月—2018年5月随机收集416(人)份温州献血者的血液标本(5 mL/份,EDTA-K2抗凝),采用间接抗球蛋白法测定其Duffy血型抗原;计算Duffy基因型及基因频率,根据基因频率计算本地供受(血)人群Duffy抗原不相合的机率。结果 本组温州地区献血人群的FYA和FYB基因频率分别为0.942 3和0.057 7,观察值与期望值符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律并与国内其他地区献血者人群相近(P>0.05),Duffy血型Fya和Fyb抗原供受者不相合机率分别为0.003 3和0.099 6,总不相合几率0.102 9。结论 温州地区献血人群Duffy血型基因频率符合中国汉族人群该基因频率的分布特征;供受者Fya和Fyb抗原不配合机率为建立本地献血者Duffy血型资料库、进一步保障临床用血安全提供依据。

2种方法对红细胞同种抗体的检测能力的比较

目的探讨微柱凝胶抗球蛋白法与传统的试管抗球蛋白法对红细胞同种抗体的检测能力。方法分别采用微柱凝胶抗球蛋白法与经典的试管抗球蛋白法同时对148例含有红细胞同种抗体的样本进行检测,分析比较2种方法的检测结果。结果微柱凝胶抗球蛋白法对于红细胞同种抗体的检出率为98.0%,试管抗球蛋白法的检出率为81.8%,其中,试管抗球蛋白法对抗-D,-E,-C,-c,-e,-C+e,-E+c,-N,-S,-s,-Dia,-Fya,-Fyb,-Jka,-Jkb,-K,-k,-Lua,-Lub,-Lea,-Leb和-P1抗体均能检出,但对于MNS血型系统抗-M的检出率仅为36.0%,对未知抗体特异性的检出率为56.0%;而微柱凝胶抗球蛋白法对所有样本包含的红细胞同种抗体均能检出,除了Kidd血型系统同种抗体,Kidd系统漏检率为37.5%。结论微柱凝胶抗球蛋白法对于红细胞同种抗体的检出率高于试管抗球蛋白法,但是可能会漏检Kidd血型系统同种抗体。二者各有优劣,建议实验室在使用微柱凝胶抗球蛋白法配血时,若发现不匹配,应结合试管抗球蛋白方法,可以更有效地检出抗体和指导输血。

自身免疫性溶血性贫血患者的血型血清学检查

目的探讨自身抗体对自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者血型鉴定的影响。方法用D IANA全自动血型仪对23例AIHA患者进行ABO、Rh(D)血型常规定型及氯喹放散实验后定型,同时进行直、间接抗人球蛋白试验。结果ABO受干扰者13例,正定型均为AB型,氯喹放散后能正确定型。23例直抗均为阳性,间抗阳性更易出现在ABO血型正反定不符病例中。23例患者中无Rh(D)阴性者。结论AIHA患者的自身抗体干扰血型鉴定,需采用多种技术才能正确鉴定血型,确保输血安全。

犬DEA1.1血型抗体间接ELISA检测方法的建立

为探求减少宠物临床中犬因血型错配发生的输血反应,本试验以DEA1.1阳性红细胞膜作为抗原建立能检测DEA1.1抗体的间接ELISA方法。试验以犬DEA1.1血型为主要研究对象,提取犬红细胞膜,以DEA1.1阳性红细胞膜作为抗原,用醛化技术包被抗原,优化间接ELISA反应条件。结果显示,最佳固定剂为浓度0.0625%和0.125%的戊二醛,最佳抗原包被量为4~8μg/孔,最佳封闭液为5%的脱脂奶粉,最佳温度为37℃,最适反应时间为90 min。与间接抗球蛋白试验相比,优化后的间接ELISA法有更高的灵敏性,本试验建立的间接ELISA方法可以对犬DEA1.1血型抗体进行高通量检测。

微柱凝胶间接抗球蛋白试验检测不规则抗体的应用

目的探讨微柱凝胶间接抗球蛋白试验检测不规则抗体在临床上的应用价值。方法选取我院收治的申请输血治疗患者2810例。分别采用微柱凝胶间接抗球蛋白试验和试管间接抗球蛋白试验对其不规则抗体进行检测,并对比两者的检测结果。结果微柱凝胶间接抗球蛋白试验的阳性例数有18例,阳性率为0.64%,明显高于试管间接抗球蛋白试验的阳性0.50%(14/2810),其差异具有统计学意义(P<0.05)。两种试验方法均呈阳性的标本有14例,试管间接抗球蛋白试验漏检有4例。结论微柱凝胶间接抗球蛋白试验检测不规则抗体,具有较好的敏感性、易于操作、试验重复性好以及结果判断简易等优点,对满足临床用血的需求和保证其安全性有重大的价值,值得进一步推广应用。

自制增强剂在间接抗球蛋白试验中的临床应用

目的探索低离子强度盐溶液-聚乙二醇(LISS-PEG)、低离子强度盐溶液-牛血清白蛋白(LISS-BSA)这2种自制增强剂在间接抗球蛋白试验(IAT)中的临床应用。方法将较常见的标准红细胞IgG不规则抗体(抗-D、抗-M、抗-N、抗-S、抗-s、抗-Jk^(a)、抗-Jk^(b)、抗-Fy^(a)、抗-Fy^(b)、抗-Di^(a)、抗-K)与对应抗原的红细胞反应,在反应中分别添加LISS-PEG、LISS-BSA增强剂,选择5 min和15 min 2种不同的孵育时间进行试管法间接抗球蛋白增强试验,与常规IAT作比较。选择100例血液标本中含红细胞IgG不规则抗体的患者,将同样的反应条件应用于患者标本的IAT试验,观察自制增强剂的效果。用AABB评分法记录其凝集强度。结果 LISS-PEG孵育5 min与孵育15 min应用于临床标本IAT凝集强度分值(8.65±0.58 vs 8.7±0.68)比较无差异(P>0.05);LISS-BSA孵育5 min与孵育15 min、常规IAT应用于临床IAT凝集强度分值(5.12±0.34 vs 5.03±0.29 vs 4.78±0.68)比较无差异(P>0.05);LISS-PEG孵育5 min与常规IAT凝集强度分值(8.65±0.58 vs 4.78±0.68)比较有差异(P<0.05)。结论自制的LISS-PEG增强剂应用于IAT中,抗原抗体孵育时间仅需5 min,凝集强度即可达到明显的增强效果,此方法为救治急诊输血患者缩短了交叉配血时间,值得推广使用。

自身免疫性溶血性贫血患者DAT、IAT与输血疗效的相关性

目的探究自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者直接抗球蛋白试验(DAT)、间接抗球蛋白试验(IAT)与输血疗效的关系。方法回顾性抽取2021年4月至2023年4月河南省人民医院收治的94例AIHA患者,均进行DAT检测,并对患者血清及红细胞放散液进行IAT检测。通过分析自身抗体凝集强度,研究其与输血治疗效果的关系。结果94例AIHA患者的IAT和DAT均为阳性,凝集强度1+~4+。抗体和DAT强度不同,血红蛋白(Hb)水平不同。3+~4+时Hb为(34.58±1.04)g/L,2+~<3+时为(53.24±1.12)g/L,1+~<2+时为(60.21±1.13)g/L。随着抗体和DAT增强,贫血加重,Hb下降。3+以上患者输血次数多,2+~<3+患者输2 U红细胞效果佳。结论在AIHA患者中,贫血的严重性以及输血后的疗效都与自身抗体和DAT的凝集强度紧密相关。

RhD抗原变异型同种免疫反应研究

目的:研究RhD抗原变异型同种免疫反应。方法:采用微柱凝胶卡方法检测2015-07-2016-06江夏区42 940例本地居民RhD抗原;应用不同厂家RhD抗原试剂对初筛RhD阴性进行RhD阴性确认;使用PCR-SSP法对初筛RhD阴性的样本行RhD基因分型应用抗人球蛋白试验检测初筛RhD阴性样本中的弱D;用吸收放散试验检测初筛RhD阴性样本中的Del;对初筛RhD阴性样本进行不规则抗体筛查和抗体特异性鉴定。结果:在42 940例中共检出179例RhD阴性;在179例初筛RhD阴性中使用血清学方法检出弱D 2例、Del 15例,应用PCR-SSP方法检出弱D 5例、D-CE(2-9)-D融合基因型12例、Del型40例;12例RhD-CE(2-9)-D中有2例产检出抗D抗体;5例弱D未检出抗D抗体;Ddel型人群中未检出抗体。结论:不同RhD的变异型对D抗原有不同的免疫反应;建立不同的输血策略保障输血安全。

128例RhD阴性献血者DEL表型筛查与基因型分析

目的:分析武汉地区RhD阴性献血者中DEL表型的分布及RhD基因情况。方法:血清学直接凝集法检测D、C、c、E、e抗原,间接抗人球蛋白试验(IAT)确认RhD阴性血型,对IAT确认为RhD抗原阴性的样本采用吸收放散方法从中筛选DEL型;应用PCR-SSP技术检测DEL献血者RhD基因型。结果:血型血清学试验初筛为RhD阴性的128例献血者标本中,IAT试验检出阳性9例,经鉴定为D变异型;剩余119例样本中吸收放散结果阳性31例,确定为DEL型。119例RhD阴性献血者中68例ccee,39例Ccee,5例CCee,5例ccEe和2例CcEe。128例样本检出DEL型31例,占比为24.22%,表型分布为Ccee 23例,CCee 5例,ccEe 2例,CcEe 1例;送检的DEL型标本第9外显子均有1227G>A突变,其中杂合子24例(DEL/d),纯合子7例(DEL/DEL)。结论:武汉地区DEL型献血者表型分布与其他地区相似,RhD 1227A是武汉地区DEL表型个体的重要遗传标记。

72684例无偿献血者抗人球蛋白试验结果分析

目的:通过对无偿献血者进行抗人球蛋白试验,了解献血者抗人球蛋白试验的血清学特性以评价输血前抗人球蛋白试验在安全输血中的意义。方法:通过对捐献全血的无偿献血者EDTA-K2抗凝血标本进行抗人球蛋白试验,红细胞进行直接抗人球蛋白试验,血浆进行间接抗人球蛋白试验,阳性者利用谱细胞进一步做血浆不规则抗体鉴定。记录抗人球蛋白试验阳性的献血者基本资料及试验结果,并进行统计学分析。结果:共计72 684例献血者血样进行抗人球蛋白试验,直接抗人球蛋白试验和(或)间接抗人球蛋白试验阳性258例(0.35%),女性献血者阳性率0.69%,高于男性献血者0.19%(P<0.01)。直接抗人球蛋白阳性献血者213例(0.29%),其中抗人-IgG 192例,抗-C_(3)d 8例,抗人-IgG和抗-C3d同时阳性13例。间接抗人球蛋白试验阳性55例(0.08%),鉴定出特异性的不规则抗体主要是抗-M 16例、抗-E 8例、抗-D 5例、抗-Le^(a) 4例。有10例直接和间接抗人球蛋白试验同时阳性。结论:对献血者进行抗人球蛋白试验可以有效筛查出抗体致敏红细胞或血浆不规则抗体,能避免影响主次侧交叉配血的血液发往临床,既能节省输血前交叉配血时间,又能降低输血风险,保障输血安全。