金黄色葡萄球菌B型肠毒素间接竞争ELISA检测方法的建立

以金黄色葡萄球菌B型肠毒素免疫Balb/c小鼠,待血清效价达到要求后,腹腔注射骨髓瘤细胞,制备抗金黄色葡萄球菌B型肠毒素抗体,并建立快速检测金黄色葡萄球菌B型肠毒素的间接竞争ELISA(ciELISA)方法。经方阵滴定确定B型肠毒素的最佳包被浓度为0.31μg/ml,抗B型肠毒素抗体的稀释度为1:1.2×104,羊抗鼠IgG-HRP的稀释度为1:103。本实验建立的B型肠毒素的间接竞争ELISA检测方法的最低检测量为1ng/ml,线性检测范围为1～103ng/ml,相关系数R2=0.9951,人工污染样品的平均回收率为94.5%。

ELISA法检测牛奶中头孢氨苄残留

应用头孢氨苄单克隆抗体,建立牛奶中头孢氨苄残留的间接竞争酶联免疫吸附测定(ELISA)检测方法,其牛奶中检测线性范围为1.0～50.0ng/mL,检测限为1.0ng/mL,半数抑制质量浓度为4.1ng/mL,牛奶的加标回收率分别为96.0%、98.2%及93.3%。头孢氨苄抗体与头孢拉定、头孢羟氨苄、头孢克洛及头孢克肟的交叉反应率分别为160.0%、80.0%、28.4%和3.7%。此外,一种简单、有效的牛奶纯化方法得以建立。对比ELISA和超高效液相色谱-串联质谱实验结果,显示两种方法有很好的数据相关性(R2=0.9988)。