固相萃取-液相色谱串联质谱法测定婴儿食品中的4种添加剂

本文建立了一种测定婴儿食品中4种常用食品添加剂(香豆素、香草醛、甲基香草醛和乙基香草醛)的方法。结果表明,各目标物质的质量浓度在50~5000 ng·mL^(-1)时线性关系良好,检测限和定量限分别为10μg·kg^(-1)和50μg·kg^(-1);加标浓度为50μg·kg^(-1)、100μg·kg^(-1)、500μg·kg^(-1)时,回收率为81.72%~102.13%,相对标准偏差低于10%。说明该方法精准可靠,可用于婴儿食品基质中常见添加剂的检测。

基于通过式固相萃取净化的高效液相色谱法测定婴幼儿配方乳粉中五种核苷酸的含量

该研究建立了一种亲水性高效液相色谱同时测定婴幼儿配方乳粉中胞嘧啶核苷酸、尿嘧啶核苷酸、次黄嘌呤核苷酸、鸟嘌呤核苷酸和腺嘌呤核苷酸共5种核苷酸含量的检测方法。婴幼儿配方乳粉样品经超纯水提取其中的核苷酸,沉淀蛋白后上清液用Oasis PRiME HLB固相萃取柱净化,采用Waters BEH Amide色谱柱分离,以0.1%磷酸溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱,二极管阵列检测器采集信号,外标法定量。结果表明,5种核苷酸在2~40 mg/L内线性关系良好(R^(2)>0.999),方法的检出限和定量限分别为0.5~1.0 mg/kg和1.5~3.0 mg/kg;空白样品添加6、15、30 mg/kg三个浓度水平,平均加标回收率为90.17%~101.20%,相对标准偏差为1.6%~4.5%(n=6)。该方法快速准确、基质干扰小、灵敏度高,适用于婴幼儿配方乳粉中核苷酸的测定。

改良阶段性补铁方案治疗婴幼儿营养性缺铁性贫血的疗效观察

目的探讨改良阶段性补铁方案治疗婴幼儿营养性缺铁性贫血的临床疗效。方法 2000年2月至2001年10月常熟市中医院儿科收治中重度缺铁性贫血患儿34例,为对照组。2005年6月至2013年6月常熟市中医院儿科收治中重度缺铁性贫血患儿169例为观察组。两组均口服速力菲薄膜衣片。观察组:第一阶段:血红蛋白<90g/L,以3～4mg/(kg·d),分两次口服;第二阶段:血红蛋白90～110g/L,以3～4mg/(kg·周),每周一次口服,至红细胞分布宽度<14.6%。对照组:第一阶段:血红蛋白<90g/L,以5mg/(kg·d),分两次口服;第二阶段:血红蛋白90～110g/L,以3～4mg/(kg·d),分两次口服;第三阶段:血红蛋白≥110g/L,以3mg/次,2d1次,服至红细胞分布宽度<14.6%。观察组:治疗第1周查血常规和网织红细胞;以后血红蛋白<90g/L每周查一次血常规;血红蛋白90～110g/L每2周查一次血常规;血红蛋白≥110g/L每4周查一次血常规至红细胞分布宽度<14.6%。对照组:治疗第1周查血常规和网织红细胞,以后每2周查一次血常规。观察第二阶段两组治疗红细胞相关参数达指标时间及不良反应。结果两组患儿治疗后血红蛋白、红细胞平均体积、红细胞分布宽度值达标时间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。观察组与对照组治疗第1周食欲均明显改善,服药后3～5d大便出现黑色。观察组第一阶段17例有恶心现象,第二阶段时无恶心腹痛和食欲下降情况出现。对照组8例出现腹痛、恶心呕吐反应。结论改良方案可达到了原方案的临床治疗效果,不良反应少,提高家长依从性,且医师对改良方案更易掌握和使用,便于临床推广。

婴幼儿配方奶粉中邻苯二甲酸酯的固相萃取净化-气相色谱-质谱法测定

建立婴幼儿配方奶粉中邻苯二甲酸酯（PAEs）固相萃取净化,气相色谱-质谱法测定的方法。样品加入同位素内标后,以乙腈提取,PSA/Silica固相萃取柱净化,气相色谱-质谱法检测,内标法定量。结果表明：该方法对婴幼儿配方奶粉的16种PAEs定量限为50～100μg/kg,加标回收率在74%～124%之间,RSD在0.78%～7.1%之间。该方法简便快捷,定量准确,重现性好,适用于高通量检测婴幼儿配方奶粉中PAEs质量分数。

反相高效液相色谱法快速测定婴儿配方乳粉中的维生素A酯类化合物

目的:开发一种快速测定婴儿配方乳粉中维生素A酯类含量的反相高效液相色谱法。方法:直接使用二氯甲烷和甲醇体积比为2.5:1的混合溶剂对样品进行提取,在30℃的条件下采用等度洗脱,流动相采用体积比为80:20的甲醇-三氯甲烷溶剂,流动相流速1.0mL/min;色谱柱温度30℃,检测波长325nm。结果:维生素A醋酸酯和维生素A棕榈酸酯的回收率分别为100.1%和102.8%,多次测定结果的相对偏差分别为1.18%和0.96%,检出限分别为3.1ng和4.3ng。结论:本方法操作简单、精密度、回收率和灵敏度高,适用于婴幼儿配方乳粉中的维生素A酯类的检测。

反相高效液相色谱法检测婴幼儿配方乳粉中叶酸的含量

目的:建立了快速、灵敏地检测婴幼儿配方乳粉中叶酸含量的方法。方法:在配方乳粉中加入60%的高氯酸溶液去蛋白,取一定量的滤液经过含有C18填料的固相萃取小柱进行除杂,再经过高锰酸钾衍生后利用反相高效液相色谱测定叶酸的含量。流动相选用pH5.0的浓度为0.1mol/L的磷酸二氢钠溶液,流动相流速为1.0mL/min,经BDSC18色谱柱进行分离(柱温为30℃)。结果:方法在0.005～1.5μg/mL范围内线性良好,方法的回收率为91.7%～98.3%,RSD为2.5%。结论:应用本方法检测婴幼儿配方乳粉中的叶酸,具有操作简单、精密度高、重现性好、容易推广等优点。

SPE-HPLC法检测婴幼儿配方乳粉中生物素的质量分数

建立了灵敏有效的测定婴幼儿配方乳粉中生物素质量分数的方法，用盐酸在超声波条件下除去蛋白质提取出生物素后，使用Hyper Sep C18固相萃取柱进行纯化、浓缩。采用荧光检测器，柱前PDAM衍生剂衍生，色谱柱为BDS HYPERSIL C18（250×4．6mm i．d．5μm），柱温为50℃，检测波长：Ex为340nm，Em为395nm。流动相流速1mL／min。标准曲线相关系数为0．9996；回收率为83．0％-101．5％之间；7次样品测定SD为0．45，RSD为2．35％。

改进的高效液相色谱法测定婴幼儿配方奶粉中5种核苷酸

建立并优化了高效液相色谱检测婴幼儿配方奶粉中5种核苷酸(尿嘧啶核苷酸(UMP)、腺嘌呤核苷酸(AMP)、次黄嘌呤核苷酸(IMP)、鸟嘌呤核苷酸(GMP)、胞嘧啶核苷酸(CMP))的方法。样品用水提取后,经乙酸沉淀蛋白质和HLB固相萃取柱净化,采用Waters XBrigde Amide(150 mm×4.6 mm,3.5μm)色谱柱分离,以乙腈、10 mmol/L磷酸二氢钠溶液和0.12%(v/v)磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,二极管阵列检测器(波长为254nm)检测。结果表明,5种核苷酸检测的线性范围宽,相关性好,相关系数(r2)均为0.999 9;方法的加标回收率为86.9%~105.7%;定量限为5.6~8.0 mg/kg;日内和日间精密度分别为0.5%~1.7%(n=5)和0.6%~1.9%(n=9)。该法前处理简单,分离效果好,回收率高,重复性好,可作为婴幼儿配方奶粉中5种核苷酸的有效检测方法。

正相高效液相色谱法检测婴幼儿乳粉中的α-生育酚、α-生育酚醋酸酯

开发了一种快速测定婴幼儿乳粉中α-生育酚以及α-生育酚醋酸酯的正相高效液相色谱法。使用乙醇、正己烷提取,40℃下等度洗脱;流动相是体积比为97.2:2.8的正己烷-乙酸乙酯混合溶剂,流速为0.5 mL/min;α-生育酚和α-生育酚醋酸酯的检测波长分别为284 nm和296 nm。结果表明:α-生育酚和α-生育酚醋酸酯的回收率分别为99.41%,102.17%;多次测定相对标准偏差分别为3.45%和3.27%。检出限分别为5.5ng,6.9ng。本方法操作简单、精密度、回收率和灵敏度高,适用于快速检测婴幼儿奶粉中α-生育酚以及α-生育酚醋酸酯。

家庭早期干预对早产儿智能发育的影响

目的 探讨家庭早期干预对早产儿智能发育的影响。方法 2 6 0例早产儿分为干预组 14 0例 ,对照组 12 0例 ,干预组指导家长按《挖掘儿童潜能始于零岁》一书中 0～ 3岁教育大纲在家中进行早期干预训练 ,对照组仅常规育儿指导 ,两组均定期用Gesell方法进行智能发育评定。结果 干预组各项发育均优于对照组 ,且随月龄增加差异逐渐显著。结论 家庭早期干预促进早产儿智能发育行之有效 ,方法简便 。

HBV感染免疫耐受期孕妇分娩前后临床指标及细胞因子水平变化特征

目的 分析HBV感染免疫耐受期孕妇分娩前后临床指标及细胞因子水平的变化规律,比较分娩后不同ALT水平组孕妇血清细胞因子水平差异。方法 选择2015年1月—2017年12月就诊于首都医科大学附属北京佑安医院的HBV感染免疫耐受期孕妇52例,妊娠28周给予替比夫定(telbivudine, LdT)抗病毒干预,分别于LdT干预前(基线)、分娩前(2周)及分娩后(6周)进行生化、血清学及病毒学检测,同步留取相应时间点外周血标本进行细胞因子检测,并分析分娩前后临床指标及细胞因子水平的变化特征。结果 52例患者分娩后6周ALT水平均值明显高于LdT干预前和分娩前,其中ALT≥2倍正常值上限(upper limit of normal, ULN)者达28.8%(15/52例);与LdT干预前相比,分娩前HBV DNA水平显著下降,平均降幅达(3.68±0.79) lg IU/ml;HBsAg和HBeAg水平在分娩前后无明显变化。与分娩后ALT <2倍ULN组相比,ALT≥2倍ULN组的IFN-γ水平在LdT干预前呈低水平表达,分娩后呈高水平表达,差异均有统计学意义(Z=2.284,P=0.022;Z=2.223,P=0.026);2组间IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α在LdT干预前、分娩前及分娩后均无明显差异。结论 HBV感染免疫耐受期孕妇分娩后部分患者ALT明显升高,结合分娩前后细胞因子的动态变化,提示分娩后可能出现免疫功能增强并打破机体对HBV的免疫耐受,这或许有利于分娩后的抗病毒治疗,但仍须要进一步深入的研究。

自制线圈辅助支架及表面线圈组合用于新生儿颅脑1.5T MR检查

目的观察自制线圈辅助支架及相控阵表面线圈组合(简称组合线圈)用于新生儿颅脑1.5T MRI的价值。方法针对水模分别以组合线圈及常规头颅线圈以相同参数采集T1WI进行体外实验。采用组合线圈(试验组)及常规头颅线圈(对照组)以相同参数对10名健康足月新生儿采集颅脑T1WI、T2WI和T2液体衰减反转恢复(T2-FLAIR)序列图像,比较图像信噪比(SNR)、对比噪声比(CNR)和信号一致性(Cs),综合分析新生儿颅脑各序列图像,比较组间图像主观评分的差异。结果体外实验中,相比常规头颅线圈,以组合线圈采集的T1WI中,各区域SNR均有所增加(P均<0.05),前后部及左右侧Cs值均降低(P均<0.01)。临床试验中,相比对照组,试验组新生儿颅脑T1WI、T2WI及T2-FLAIR序列图像的前额部SNR均提高(P均<0.05),T1WI基底节及左右颞部SNR均降低(P均<0.05),其余区域各序列图像SNR差异均无统计学意义(P均>0.05);组间新生儿颅脑各序列图像所示各区域CNR差异均无统计学意义(P均>0.05);试验组图像质量主观评分(4.45±0.27)高于对照组[(3.01±0.42),t=35.25,P<0.01]。结论自制线圈辅助支架及表面线圈组合有利于提高新生儿颅脑1.5T MR图像质量。

固相萃取-二维液相色谱法同时测定婴儿配方乳粉中V_(A)、V_(D)和V_(E)

建立了同时测定婴儿配方乳粉中V_(A)、V_(D)和V_(E)含量的固相萃取-二维液相色谱法。通过正交试验优化皂化条件,样品皂化液经TUP-E76-2060固相萃取柱净化后,以赛默飞FOODKIT1 ADE-C18色谱柱(150 mm×3.0 mm,3μm)作为一维分析柱,完成V_(A)和V_(E)的定量及V_(D)的净化,以赛默飞FOCDKIT1&2ADE-C18色谱柱(100 mm×4.6 mm,2.6μm)作为二维分析柱,完成对V_(D)的定量分析。结果显示,V_(A)、V_(D)和V_(E)分别在质量浓度为0.005~5、0.01~10和0.5~500μg/mL范围内与色谱峰面积具有良好的线性,相关系数分别为0.9996、0.9998和0.9999。与国标法比较,该方法在灵敏度、准确度及精密度等方面均有不同程度的提升,尤其是V_(A)的定量限提高了30倍,V_(D)的回收率提升了1.6倍。该方法样品处理过程简便快捷,准确稳健,可满足实验室大批量样品快速分析的需求。

自制琼脂糖板测定新生儿血清急相蛋白

采用国产试剂自制琼脂糖板测定新生儿血清α_1-AT、α_1-AGP和PA3种急相蛋白含量,并分别与Behring厂相应免疫扩散板进行方法学比较:分10次交互测定标准(参考)血清蛋白含量,并用两种方法同时测定35份新生儿血清。结果显示两种方法测定α_1-AGP和PA含_量无明显差异,而国产α_1-AT参考血清实际含量(1907.3mg/L)显著低于其出厂标签值(2582mg/L,P<0.01),需按Behring标准血清值换算。

多学科协作结合阶段性干预对早产儿发育及母亲亲职压力的影响

目的 探索多学科协作结合阶段性干预对早产儿发育及母亲亲职压力的影响。方法 选取2019年1月—2022年5月100例早产儿,根据干预方案不同分为对照组48例和观察组52例。对照组采用常规干预,观察组采取基于多学科协作的阶段性干预疗法。观察干预前及出院后3、6个月后2组早产儿体格生长、神经行为、耳声发射(OAE)及母亲亲职压力的变化。结果 出院后3、6个月,2组早产儿身长、体质量、头围及精细运动、大运动、适应能力、社交行为、语言评分均较干预前升高,且观察组高于对照组(P<0.05,P<0.01)。出院后3、6个月,2组早产儿OAE通过率比较差异无统计学意义(P>0.05)。出院后3、6个月,2组母亲亲职压力各维度评分均较干预前降低,且观察组低于对照组(P<0.05)。结论 基于多学科协作的阶段性干预疗法可有效降低早产儿母亲亲职压力,改善早产儿体格、神经、心理发育及认知功能,利于提高早产儿生长质量。

FeNO及潮气肺功能检测在不同进展期婴幼儿喘息性肺炎诊断中的应用

目的探讨呼出气一氧化氮(FeNO)及潮气肺功能检测对不同进展期婴幼儿喘息性肺炎的诊断价值。方法选取2018年3月至2019年2月在西安市中心医院儿科接受治疗的131例喘息性支气管肺炎婴幼儿为观察组,选取同期在我院体检的128例健康婴幼儿为对照组,比较对照组及观察组急性期、缓解期婴幼儿的FeNO及潮气肺功能指标,包括达峰时间比(TPTEF/TE)、达峰容积比(VPEF/VE)、每千克体质量潮气量(VT/kg)、吸呼比(TI/TE)、呼吸频率(RR)、25%、50%潮气量时呼气流速(TEF25%、TEF50%)。结果观察组急性期婴幼儿的FeNO浓度为(48.72±16.24)ppb,明显高于对照组的(12.38±4.12)ppb及缓解期的(21.34±7.11)ppb,差异均有显著统计学意义(P<0.01);观察组急性期婴幼儿的TPTEF/TE为(23.72±7.93)%、VPEF/VE为(26.69±8.91)%、VT/kg为(6.91±2.30)mL/kg、TI/TE为0.63±0.21、TEF25%为(85.43±28.51)mL/s及TEF50%为(114.82±38.27)mL/s,均明显低于对照组[(32.24±10.75)%、(36.57±12.19)%、(7.73±2.58)mL/kg、0.78±0.26、(104.37±34.79)mL/s、(127.06±42.35)mL/s]及缓解期[(29.13±9.71)%、(32.46±10.82)%、(9.48±3.16)mL/kg、0.91±0.30、(96.12±32.04)mL/s、(133.01±44.3)mL/s],差异均有统计学意义(P<0.05);而观察组急性期RR为(34.61±11.5)次/分,明显高于对照组的(28.24±9.41)次/分及缓解期的(30.05±10.02)次/分,差异均有统计学意义(P均<0.05);观察组缓解期婴幼儿TPTEF/TE、VPEF/VE、TEF25%水平均较对照组有明显降低,VT/kg、TI/TE则有明显升高,差异具有统计学意义(P均<0.05);Pearson分析结果显示,FeNO浓度与VT/kg呈明显负相关(r=-0.290,P<0.01)。结论潮气通气肺功能及FeNO浓度能判断喘息性肺炎婴幼儿肺炎进展及气道损伤程度,可为临床治疗喘息性肺炎提供参考依据。

C－反应蛋白固相放射免疫分析法的改进及初步应用

建立一种竞争性固相放射免疫分析法（ＳＰ－ＲＩＡ），用于定量测定人体血清或脑脊髓液（ＣＳＦ）中的Ｃ－反应蛋白（Ｃ－ｒｅａｃｔｉｖｅＰｒｏｔｅｉｎ，ＣＲＰ）。最小可测量为５ｎｇ／ｍｌ；批内ＣＶ为４．９％，批间ＣＶ为１２．６％。６８份健康人血清的ＣＲＰ含量为０．０２８～３．４００μｇ／ｍｌ（中位数０．１６６μｇ／ｍｌ）；１６份新生儿脐带血清的ＣＲＰ含量为０．０１３～９．０００μｇ／ｍｌ（中位数０．０９５μｇ／ｍｌ）；６３份“流脑”病人血清ＣＲＰ为０．１５０～５２０．０００μｇ／ｍｌ（中位数７７．５００μｇ／ｍｌ），相当于健康人的４００～５００倍。ＧＳＦ中也可检出低水平的ＣＲＰ（中位数２．０７０μｇ／ｍｌ）。“流脑”急性期血清的ＣＲＰ含量，比恢复期高出３００多倍，而婴幼儿轮状病毒性腹泻病人的急性血ＣＲＰ含量不高（中位数５．５８０μｇ／ｍｌ），且同恢复期血清ＣＲＰ含量之比，仅为２～３∶１，提示此种病毒性感染的急性相应答（Ａｃｕｔｅｐｈａｓｅｒｅｓｐｏｎｓｅ）不如细菌性脑膜炎显著。

婴儿肝胆动态显像早期各时相肠道放射性分布检出率比较

目的比较婴儿肝胆动态显像早期各时相肠道放射性分布检出率,探索保证诊断质量前提下优化早期检查方案可行性。方法回顾性分析2014年1月至2018年10月于郑州大学第一附属医院核医学科按常规检查流程行肝胆动态显像检查的婴儿297例,男,159例,女,138例,年龄最小3d,最大293d,平均(65.9±20.5)d。把受检者分为排泄正常和排泄异常两组,分别统计5、10、20、30、45、60min早期相各采集时间点肠道放射性分布的检出率,并按顺序递次配对2检验,比较其差异。结果297例受检婴儿,排泄正常者89例,排泄异常者208例。排泄正常组早期各时相肠道放射性分布的检出率,5、10、20min分别为5.62%、10.11%、19.10%,均较低;30、45、60min分别为71.91%、86.52%、100.00%,检出率明显增高;5min和10min,10min和20min,30min和45min,45min和60min肠道放射性分布的检出率比较,差异均无统计学意义(P>0.01),但20min和30min的检出率比较,差异有统计学意义(2=38.080,P<0.001)。排泄异常组早期各时相肠道均无放射性分布。结论优化婴儿肝胆动态显像常规检查流程,方案具有可行性,优化为30min和60min两次检查对诊断结果影响不大。

混合型固相萃取柱净化-气相色谱-质谱法测定婴幼儿配方奶粉中的三聚氰酸

建立了一种混合型固相萃取柱净化-气相色谱-质谱法(GC-MS)测定婴幼儿配方奶粉中三聚氰酸的方法。在84℃条件下,用0.5%乙酸水溶液提取样品中的三聚氰酸,离心,滤液经Carb/C18混合型固相萃取柱净化,氮气吹干,硅烷化衍生,GC-MS测定,选择离子监测模式,外标法定量。在0.01～2mg/L内线性关系良好(r>0.99),在0.25～2.5mg/kg的添加水平范围内,平均回收率为80%～103%,相对标准偏差(RSD)为7.7%～14.5%,三聚氰酸的检出限(LOD)为0.10mg/kg,定量限(LOQ)为0.25mg/kg。该方法快速、灵敏、准确、专一、耐用,适合婴幼儿配方奶粉中三聚氰酸的确证和定量测定。

通过式固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定婴幼儿配方奶粉中的10种季铵盐类消毒剂残留

建立了通过式固相萃取净化-超高效液相色谱-串联质谱法测定婴幼儿配方奶粉中的10种季铵盐类消毒剂(QACs)残留的方法。样品经水溶解后,用含0.2%甲酸的乙腈提取,提取液用甲醇1∶1混匀,用通过式固相小柱(Oasis PRiME HLB)净化,流动相由含0.2%甲酸的甲醇-乙腈溶液(体积比,6∶4)与含0.2%的甲酸水溶液组成。10种QACs在Waters CORTECS UPLC C18(100 mm×2.1 mm,1.6μm)色谱柱上以梯度洗脱分离后,采用电喷雾离子源正离子(ESI+)模式电离,配合多反应监测模式(MRM)进行定性定量分析。结果表明,10种QACs在各自浓度范围内线性良好,相关系数r^(2)≥0.9964,方法定量限(LQD)为0.5~3.0μg/kg。采用低、中、高3个浓度水平进行加标实验,回收率范围为86.2%~103.4%。方法简单高效,可作为日常婴幼儿配方奶粉监督抽样中10种季铵盐类消毒剂(QACs)残留检测的有效方法。