仙居鸡抑制素/活化素β_A亚基成熟区的cDNA克隆及序列分析

本研究根据发表的来航鸡抑制素 /活化素βA 亚基序列设计引物 ,运用RT PCR技术从仙居鸡卵泡的颗粒细胞总RNA中扩增出抑制素 /活化素βA 亚基成熟区序列 ,并进行了克隆和测序。结果显示 ,所测鸡成熟βA 亚基是由 116个氨基酸 (aa)残基组成的蛋白质 ,共有 9个半胱氨酸残基 ,与发表的鸡及哺乳类相应序列对比 ,其核苷酸序列的同源性分别为 99.2 %和 81%～ 85 .2 % ,其预测氨基酸序列的同源性分别为 10 0 %和 96 .6 %～ 97.4 % ,且所测鸡 βA 亚基成熟区半胱氨酸残基的数目和位置与发表的鸡和哺乳类相同 ,说明该亚基的序列及结构在不同物种间具高度保守性 。

仙居鸡抑制素α亚基成熟区的cDNA克隆及其在卵泡中表达的研究

根据发表的鸡抑制素α亚基序列设计引物，用ＲＴ－ＰＣＲ技术从仙居鸡卵泡的颗粒细胞总ＲＮＡ中扩增出了抑制素α亚基成熟区序列，并进行了克隆和测序。结果显示，仙居鸡成熟α亚基是由１１３个氨基酸（ａａ）残基组成的蛋白质，具有１个糖基化位点和７个半胱氨酸残基，与发表的鸡和哺乳类相应序列对比，其核苷酸序列的同源性分别为９８％和６１．４％～６８．７％，其预测氨基酸序列的同源性分别为９７．３％和６４．６％～６９％，且所测鸡α亚基成熟区的糖基化位点及半胱氨酸残基的数目和位置与发表的鸡和哺乳类相似，说明该亚基的序列及结构在不同物种间具高度保守性，提示其可能具重要的生理功能。鸡各级卵泡中α亚基ｍＲＮＡ表达丰度的定量分析显示，从ＳＹＦ到Ｆ１中，随着卵泡的成熟α亚基的表达量降低，其在ＳＹＦ和Ｆ６～８中表达量最高，在ＬＷＦ中表达量很低，说明α亚基在卵泡的吸收、选择及优势化过程中起重要调节作用。

仙居鸡抑制素/活化素β_B亚基成熟区cDNA的克隆及序列分析

根据发表的哺乳类抑制素 /活化素 βB亚基 c DNA序列设计引物 ,运用 RT- PCR技术从仙居鸡卵泡的颗粒细胞总RNA中扩增出抑制素 /活化素βB亚基成熟区序列 ,并进行了克隆和测序。结果显示 ,鸡成熟βB亚基是由 115个氨基酸(aa)残基组成的蛋白质 ,具有 9个半胱氨酸残基 ,与发表的哺乳类相应序列对比 ,其核苷酸序列的同源性为 79.7%～82 .9%,其编码氨基酸序列的同源性为 95 .7%～ 98.3%。 βB亚基成熟区半胱氨酸残基的数目和位置与发表的哺乳类相同。说明该亚基的序列及结构在不同物种间具高度保守性 ,提示抑制素 /活化素 βB亚基可能具重要的生理功能。