靶向Cullin-RING E3泛素连接酶的抗肿瘤策略及相关药物研发进展

Cullin-RING E3泛素连接酶(CRL)是泛素-蛋白酶体系统的重要组分,参与催化蛋白质的泛素化,促进随后的蛋白质降解,从而影响细胞周期、细胞凋亡、DNA复制、信号转导等多种细胞生理活动,且在多种肿瘤细胞中异常活化。以MLN4924为代表的拟素化抑制剂的成功研发有力地证实了CRL是可行的抗肿瘤靶点,具有很好的药物研发潜力。近年来,不断有新的研究通过高通量筛选、基于计算机辅助的虚拟筛选或基于结构的药物设计技术寻找特异的CRL抑制剂,但由于CRL复合物具有多种亚单位,呈蛋白-蛋白相互作用和多变的蛋白构象,缺乏典型的小分子药物结合位点等特性,其相关药物研发仍面临巨大挑战。截至目前,CRL小分子抑制剂主要以研究最为透彻的SCF泛素连接酶复合体的底物识别亚基F-box蛋白家族为靶点。此外,也发现数个通过靶向UBE2M-DCN1相互作用,特异性阻断CRL3/CRL1拟素化,从而抑制CRL3/CRL1泛素连接酶活性的小分子化合物。另一方面,也有CRL激动剂的报道,主要见于植物生长素吲哚乙酸和免疫调节性酰亚胺类药物。此外,靶蛋白水解嵌合体(PROTAC)是一项靶向蛋白-蛋白相互作用的新技术,其通过特异性小分子抑制剂链接一个CRL E3泛素连接酶来精确降解特定促癌靶蛋白,已成为近年来利用E3泛素连接酶设计抗肿瘤靶向药物的热点。

量子防垢技术在油田加热炉的防垢应用研究

加热炉是油田生产运行中的重要设备,结垢不仅会造成加热炉频繁清洗,增加检修成本,而且影响换热效率,减少使用寿命,甚至造成加热炉烧损,导致停产或停输。采用新型管道外置安装量子环防垢器防垢技术,释放有针对性的振动波改变水中钙镁离子的振动特性,减少加热炉在温升过程中CaCO_(3)的结晶和沉积,防垢率可以达到80%以上。量子环防垢器防垢技术对于减少加热炉清洗,提高加热炉炉效和使用效率有着积极的意义,可在油田结垢严重区块推广应用。

结构特性对燃烧室压强振荡的影响研究

为了揭示结构特性对固体发动机燃烧室压强振荡的影响规律,采用大涡模拟方法以"绝热环"及"潜入式喷管空腔背壁区"为重要结构设计参数,完成了4种不同结构设计条件下的典型VKI发动机流场稳定性数值模拟。最终获得了各工况下的压强-时间曲线及其FFT结果。分析表明:绝热环是引起旋涡脱落的主要因素,背壁区维持并加强了声涡耦合引起的声能增益,对压强振幅有较大的影响。

鸟苷对大鼠胸主动脉血管环的舒张作用及机制

目的研究鸟苷对大鼠离体血管环的影响,并探讨其可能的作用机制。方法分离SD大鼠胸主血管环,分成去内皮组和内皮完整组,采用离体血管环实验方法,经生物信号采集与分析系统测定血管环张力的变化,观察鸟苷的舒血管作用并探讨不同抑制剂对鸟苷舒张大鼠离体血管环作用的影响。结果鸟苷(10-9～10-5 mol.L-1)对基础状态下或KCl预收缩血管环的张力无影响;对PE预收缩的血管环有内皮依赖性舒张作用;环氧合酶抑制剂吲哚美辛孵育对鸟苷的舒张作用无明显影响;一氧化氮合酶抑制剂L-NAME或鸟苷酸环化酶抑制剂亚甲蓝可阻断鸟苷的血管舒张作用。结论鸟苷对大鼠离体胸主动脉有浓度依赖性舒张作用,其舒张作用可能与NO-GC-cGMP途径相关。

2-氰基-3-取代吡啶甲胺基-3-取代丙烯酸乙氧乙酯的合成和除草活性研究

一系列2-氰基-3-取代吡啶甲胺基丙烯酸酯被合成作为光合作用光系统II电子传递抑制剂.生测发现一些目标化合物表现出很好的除草活性,如(Z)-2-氰基-3-异丙基-3-(2-烷氧基取代的吡啶-3-基)甲胺基丙烯酸乙氧乙酯.生测结果表明在吡啶环的2位合适的取代基和丙烯酸酯的3位取代基的体积对除草活性至关重要.

新结构Rho激酶抑制剂对离体胸主动脉血管环舒张作用及机制研究

目的评价2个全新结构小分子Rho激酶抑制剂J35242和J35243对离体大鼠胸主动脉血管环的舒张作用,并探讨其作用机制。方法利用离体大鼠胸主动脉血管环模型,分别用高浓度KCl和去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)预刺激,评价化合物的舒张血管活性;通过各种工具药干预,观察化合物舒张血管作用的内皮相关机制、钾通道相关机制和钙离子相关机制。结果 J35242和J35243可以剂量依赖性舒张高浓度KCl和NE预收缩的血管环,并呈现一定的内皮依赖性;L-NAME和亚甲蓝可在一定程度上影响其舒张作用;化合物还明显抑制由细胞内钙释放和外钙内流引起的血管收缩,说明其可能通过阻断钙离子通道发挥舒张血管作用;另外两个化合物可能不是通过开放钾离子通道发挥舒张血管作用。结论 J35242和J35243在体外具有一定的舒张血管作用,并且J35242的作用要强于J35243,其机制可能依赖于血管内皮功能,另外可能与抑制平滑肌细胞钙离子通道,降低细胞内钙离子浓度相关。

雷米普利对血流动力学及血管平滑肌的作用

雷米普利(Ram)1mg/kg iv能使正常血压大鼠、豚鼠的收缩压(SAP),舒张压(DAP),平均动脉压(MAP)迅速而持久下降,伴有左室压(LVP),左室内压力最大变化速率(±dp/dt_(max))下降,30 min后LVP,±dp/dt_(max)恢复,而血压在90 min后仍明显低于给药前水平。血管紧张素I(ANG I)10μg/kg iv后,上述参数迅速上升,但为时短暂。先iv Ram 1mg/kg,20 min后注入ANG I,以上作用不再出现。 离体实验中,Ram 0.1和1 μmol/L使甲氧明收缩兔胸主动脉和肺动脉环的量效反应曲线平行右移,最大反应压低不明显,求得Ram在主动脉环和肺动脉环上拮抗甲氧明的pA_2值分别为6.48和7.02。

MS23对大鼠的不同器官血管环收缩的影响

目的研究MS23对不同激动剂所致不同部位血管收缩的对抗作用或舒张作用。方法大鼠主动脉环和小动脉环的张力舒缩状态分别采用PowerLab和DMT系统记录。结果MS23浓度依赖性抑制去甲肾上腺(NA)引起的主动脉环收缩,使NA浓度-效应曲线非平行性右移,并抑制最大反应,使最大效应下降74.7%。MS23和氨茶碱对高钾和NA引起的大鼠主动脉环预收缩均表现出浓度依赖性舒张效应。去内皮和一氧化氮合酶抑制剂L-NAME对MS23的血管舒张作用无明显影响。小动脉环实验结果为,MS23和氨茶碱浓度依赖性舒张高钾所致大鼠冠状动脉、大脑中动脉、肾动脉和肠系膜动脉环的收缩,此4脏器的小动脉对此二药舒张作用的敏感程度差异均无显著性。结论MS23对多种刺激引起的血管环收缩具有对抗或舒张作用,对血管来源和刺激剂无明显的选择性。其血管舒张作用与NO产生及血管内皮是否存在无关。

咪唑-1-羧酸酯类化合物的构效关系研究

利用CoMFA方法，对20种咪唑-l-羧酸酯类化合物进行了三维定量均效关系研究．研究结果表明，影响其药效的主要因素是空间结构．得到了具有较强预测能力的QSAR模型．在此基础上，设计了高活性的化合物，并发现了分子中存在着明显的芳环堆积现象，可能和对受体的识别有关．

羟基积雪草苷对离体动脉条的舒张作用及其机制

目的探讨羟基积雪草苷(madecassoside,MC)的舒张血管作用及其机制。方法采用离体大鼠胸主动脉张力实验观察MC的舒张血管作用。结果MC使去甲肾上腺素(NE)和氯化钾(KC l)收缩动脉条的量效曲线右移,最大收缩力降低;并对NE诱导的细胞内Ca2+释放所引起的收缩有明显的抑制作用;但去除血管内皮细胞后MC反而使动脉条收缩进一步增强;在有一氧化氮合酶(NOS)抑制剂存在的情况下,其抑制NE收缩的效应消失;对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)收缩动脉条的量效曲线无明显影响。结论MC有明显的舒张血管作用,表现为钙拮抗活性,以抑制细胞内Ca2+释放为主;且通过内皮细胞发挥作用,并与一氧化氮(NO)合成通路有密切的关系。

环境友好型聚天冬氨酸衍生物的合成及其阻垢性能

利用马来酸酐热缩聚产物聚琥珀酰亚胺(PSI)和硫脲,合成了一种聚天冬氨酸衍生物。优化了PSI与硫脲的反应条件,通过红外光谱对聚天冬氨酸衍生物的结构进行了表征,考察了聚天冬氨酸衍生物的阻垢性能,分析了其阻垢机制。结果表明:以硫脲对PSI进行开环,当硫脲用量为1 g,改性缩聚温度为100℃,反应时间为2.5 h时,获得改性PASP产品的阻垢效果最佳;红外光谱证明了硫脲的一个氨基与原支链上的羧基发生缩合,生成酰胺键,在聚天冬氨酸侧链上增加了新的官能团;聚天冬氨酸衍生物用量为10 mg/L时,阻垢率可达到90%以上。

缓蚀阻垢剂聚天冬氨酸衍生物合成条件的探究

聚天冬氨酸(PASP)是一种新型的可生物降解的环境友好型阻垢缓蚀剂,为了增强阻垢性能,对其进行改性研究。结果表明:用29.4 g马来酸酐通过聚合法得到前驱体聚琥珀酰亚胺,将聚琥珀酰亚胺的1/2为母体,以硫脲对其进行开环,当硫脲用量1g,改性缩聚温度100℃,反应时间2.5h时,获得改性PASP的阻垢效果最佳;红外光谱证明了硫脲的一个氨基与原支链上的羧基发生缩合生成酰胺键,在PASP侧链上增加了新的官能团而使其阻垢率提高。

原儿茶醛对大鼠离体肠系膜上动脉血管环的舒张作用及机制

目的观察原儿茶醛(protocatechuic aldehyde,PCA)对大鼠肠系膜上动脉血管环的舒张作用,并探讨其相关机制。方法使用Myograph动态描记系统,分别记录高钾(60mmol/L)、5-羟色胺(5-HT)、苯肾上腺素(PE)对大鼠离体血管环的收缩作用;观察不同浓度PCA对高钾(60mmol/L)、5-HT、PE预收缩血管环的舒张作用;用高钾(60mmol/L)预收缩血管后,分别用内皮机制抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)、吲哚美辛(Indo)、1H-[1,2,4]恶草灵并[4,3-a]喹喔啉-1-酮(ODQ)以及钾通道阻断剂四氨基吡啶(4-AP)、四乙胺(TEA)、氯化钡(BaCl_2)、格列苯脲(Glib)作用于血管环后,观察PCA对预收缩血管环的舒张作用,研究PCA的作用机制。结果 PCA在10^(-6)~10^(-3)mol/L浓度范围内,对高钾(60mmol/L)和5-HT引起的血管收缩有浓度依赖性的舒张作用(P<0.01);内皮机制抑制剂Indo对PCA引起的舒张有抑制作用(P<0.05);钾离子通道阻滞剂4-AP和BaCl_2对PCA引起的舒张有抑制作用(P<0.01)。结论 PCA具有舒张血管作用,其作用与抑制钾离子通道和内皮机制有关。

回药核心方油溶液对离体大鼠胸主动脉血管环的舒张作用及机制研究

目的:研究回药核心方油溶液对离体大鼠胸主动脉血管环的舒张作用及机制,为其用于心血管疾病的治疗提供参考。方法:取出大鼠胸主动脉血管环后浸泡于克氏营养液(K-H)中,以1×10^(-6)mol/L去甲肾上腺素(PE)或60 mmol/L氯化钾(KCl)致血管环收缩,采用生物信号采集分析系统测定0.020 4、0.040 8、0.061 2、0.081 6、0.102 0 mg/mL核心方油溶液对血管环的舒张作用,计算舒张率;分别以0.1 mmol/L一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)、环氧合酶抑制剂吲哚美辛(INDO)、钾离子通道阻滞剂格列本脲(Gli)孵育血管环20 min后,测定上述5种质量浓度核心方油溶液对PE预收缩血管环的舒张作用,计算舒张率;试验均以K-H溶液为空白对照。结果:与空白对照比较,0.020 4~0.102 0 mg/mL核心方油溶液对PE、KCl预收缩血管环均有明显的舒张作用(P<0.05或P<0.01),且具有浓度依赖性。INDO预处理后可减弱核心方油溶液对PE预收缩血管环的舒张作用,舒张率较空白对照组差异无统计学意义(P>0.05);而Gli、L-NAME预处理不影响核心方油溶液对PE预收缩血管环的舒张作用,舒张率较空白对照组仍明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论:核心方油溶液可呈浓度依赖性地舒张PE、KCl预收缩的胸主动脉血管环,其作用机制可能与激活环氧合酶途径有关。

灯盏花素对大鼠主动脉肌环的松弛作用

用苯肾上腺素及氯化钡引起血管环收缩，并测定五种血管扩张药对这两种激动剂缩血管作用的拮抗作用的比值。结果表明，灯盏花素的作用与三氟拉嗪相似，是以抑制细胞内钙释放为主。在去除血管内皮的实验中发现，灯盏花素的松弛血管平滑肌的作用，与三氟拉嗪、脑益嗪及硝吡啶均相似，即并不依赖血管内皮的完整性，但从量效曲线来看，灯盏花素与前两者（尤其是与三氟拉嗪）相平行。然而，灯盏花素对五羟色胺的缩血管作用无任何拮抗作用，三氟拉嗪在低浓度时未显示拮抗作用，在高浓度时，可使量效曲线明显右移。这些结果说明灯盏花素的作用可能与拮抗钙调素的作用有关，但确切的机理仍有待进一步探讨。

19-羟基雄甾-4-烯-3,17-二酮4-取代物的合成及其对睾丸素A环芳香化酶的抑制活性

以19-羟基雄甾-4-烯-3,17-二酮(1)为先导物,经4β,5β-环氧化得8,然后4-位,引入取代基如羟基、氯、溴及乙酰硫基(2、3、4及5)。并用HPLC法测定其对人胎盘微粒体睾丸素A环芳香化酶的相对抑制活性,结果表明3活性较强。

NOS抑制剂对CLP败血症休克大鼠血流动力学及血管张力变化的影响

目的:探讨三种一氧化氮合酶抑制剂(NOSI)对盲肠结扎和穿孔法(CLP)败血症休克血流动力学改变及血管张力变化的影响。方法:采用CLP建立大鼠败血症休克模型,腹腔注射三种NOSI对CLP败血症休克进行干预;在体颈动脉插管和心室内导管术,测定血压和左心室动力学指标;用离体血管灌流方法,测定大鼠胸主动脉环的张力。结果:分别用三种NOSI可降低CLP败血症休克的死亡率,改善血压和左心室动力学指标;三种NOSI均能抑制CLP引起的去内皮主动脉环对苯肾上腺素(PE)和KCl的收缩反应性下降,并且iNOSI氨基胍(AMG)能够抑制CLP引起的去内皮主动脉环对细胞外钙的反应性降低;非选择性NOSI左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)与nNOSI7-硝基吲唑(7-NI)均能抑制CLP引起的内皮完整主动脉环对苯肾上腺素(PE)和KCl的收缩反应性下降,但是三种NOSI均不能抑制CLP引起的内皮完整动脉环对细胞外钙的反应性降低。结论:三种NOSI均能改善CLP晚期败血症休克大鼠血流动力学和无内皮血管的收缩反应性,L-NAME和7-NI还可改善有内皮血管的收缩反应性。

阿魏酸对大鼠离体胸主动脉舒缩功能的影响

目的基于气体信号分子途径,分析阿魏酸(ferulic acid)对大鼠离体胸主动脉舒缩功能的影响。方法采用大鼠离体胸主动脉环,加入3种气体信号分子的抑制剂,即一氧化氮合酶的抑制剂NG-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)、血红素加氧酶-1(HO-1)抑制剂锌卟啉(Zn PP)、胱硫醚-!裂解酶抑制剂炔丙基甘氨酸(PAG),进行体外血管舒张实验。结果加入3种气体信号分子抑制剂均能显著抑制阿魏酸的舒张血管作用(与空白组相比分别为P<0.01,P<0.01,和P<0.05),且不同浓度的阿魏酸均使Ca Cl2量效曲线右移(P<0.01),且可显著性降低无钙高钾K-H液中去甲肾上腺素NE引起的收缩(P<0.01)。结论阿魏酸的舒血管作用由NO、CO和H2S 3种气体信号分子通路介导,并通过血管平滑肌上的电压依赖性钙通道和受体依赖性钙通道发挥作用。

兔退变椎间盘纤维环及髓核组织中的PG、MMP-3、TIMP-2表达变化及意义

目的：观察兔退变椎间盘纤维环和髓核组织中蛋白多糖（PG）、基质金属蛋白酶-3（MMP-3）、基质金属蛋白酶组织抑制因子-2（TIMP-2）的表达，并探讨其意义。方法新西兰大白兔42只，直立位下建立椎间盘退变模型，均分为实验组和对照组。两组分别于建模后4、8、12周各取7只动物，取 L4～5椎间盘组织采用高碘酸-希夫（PAS）染色检测髓核与纤维环组织中的 PG，以灰度值表示其相对表达量；免疫组化 SP法检测椎间盘纤维环和髓核组织中的 MMP-3及 TIMP-2，以平均光密度值（MOD）表示其相对表达量。结果实验组、对照组建模4、8、12周髓核组织中 PG灰度值均高于纤维环组织（P＜0．05）；两组建模12周时纤维环、髓核PG灰度值均高于8周时，且建模8周时髓核 PG灰度值高于4周时（P＜0．05）。随着建模时间的延长，实验组中MMP-3和TIMP-2的相对表达量均增加明显。髓核中，对照组及实验组同一时间点 MMP-3的平均 MOD值明显高于 TIMP-2。实验组纤维环中TIMP-2较 MMP-3表达变化明显。结论椎间盘退变过程中髓核中PG的含量变化早于纤维环，通过对 MMP-3/TIMP-2在椎间盘退变中所起作用的研究结合髓核 PG的变化可能会对临床诊断、基因治疗和组织工程技术的应用有一定帮助。而且对 MMPs和TIMPs的表达水平的调节来控制椎间盘基质代谢的平衡，可能会成为治疗椎间盘退变的新方向。

炔醇抑制剂/加成型液体硅橡胶体系的硫化动力学研究

采用动态流变学方法考察了1-乙炔基环己醇抑制剂对加成型液体硅橡胶(ALSR)体系硫化行为的影响,并采用凝胶模型和双Arrhenius黏度模型研究了体系硫化动力学。结果表明:1-乙炔基环己醇可大幅增加ALSR体系的硫化时间,硫化时间与炔醇含量的关系可由lnt_(gel)=4.65+25.44x表示;凝胶模型和双Arrhenius黏度模型算得的ALSR体系硫化反应活化能分别为94.7和89.1 k J/mol。