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单增李斯特菌(LM90)inlA单基因及inlB/inlA双基因缺失株的构建及其生物学特性初步研究
被引量:
6
1
作者
任静静
杨铭伟
+2 位作者
王鹏雁
蒋建军
剡根强
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第4期294-300,共7页
为探究内化素inlA、inlB基因缺失对单核细胞增生性李斯特菌(LM)生物学特性的影响,本研究采用同源重组技术构建了inlA基因缺失株(LM90-inlA)和inlB、inlA双基因缺失株(LM90-ΔinlB/ΔinlA),并对其生物学特性进行了初步研究。结果显示:PC...
为探究内化素inlA、inlB基因缺失对单核细胞增生性李斯特菌(LM)生物学特性的影响,本研究采用同源重组技术构建了inlA基因缺失株(LM90-inlA)和inlB、inlA双基因缺失株(LM90-ΔinlB/ΔinlA),并对其生物学特性进行了初步研究。结果显示:PCR和测序结果证实成功构建了目的基因(inlA、inlB)缺失株;菌落PCR和测序结果显示2种缺失株在体外连续培养20代过程中均能稳定遗传;生长特性实验表明2种缺失株与亲本株生长差异无统计学意义(t_(LM90/LM90-ΔinlA=0.34),p>0.05;t_(LM90/LM90-ΔinlB/ΔinlA)=0.324,p>0.05;t_(LM90-ΔinlA/LM90-ΔinlB/ΔinlA)=0.008,p>0.05)且inlA缺失后2缺失株对小鼠的LD_(50)分别升高了0.64、1.26个对数数量级。研究结果表明inlA基因和inlB基因对LM90的部分生物学特性具有一定的调控作用,这对于阐明LM毒力因子的致病机理提供了参考依据,也为研究内化素介导LM穿越血脑屏障(BBB)的作用机制奠定了科学基础。
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关键词
单核细胞增生性李斯特菌
inla
基因
inlB基因
基因突变株
生物学特性
下载PDF
职称材料
InlA/InlB基因的双缺失对单增李斯特菌毒力的影响
被引量:
2
2
作者
陈云飞
王丽娜
+2 位作者
王鹏雁
蒋建军
魏丽
《石河子大学学报(自然科学版)》
CAS
2015年第4期432-437,共6页
为了探讨InlA/InlB对单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)毒力的影响,本研究利用同源重组技术在LM△InlA菌株的基础上构建LMInlA/InlB基因双缺失株。通过小白鼠肝脾脑细菌计数、LD50和溶血实验,研究LM在InlA/InlB基因缺失...
为了探讨InlA/InlB对单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)毒力的影响,本研究利用同源重组技术在LM△InlA菌株的基础上构建LMInlA/InlB基因双缺失株。通过小白鼠肝脾脑细菌计数、LD50和溶血实验,研究LM在InlA/InlB基因缺失后毒力上的差异。结果显示:LM△InlA/△InlB基因双缺失株与LM菌株相比,双缺失株的LD50升高2个数量级;与LM△InlA、LM△InlB菌株相比,双缺失株的LD50均升高1个数量级;双缺失菌株在小白鼠肝脏、脾脏和脑组织内的载菌量均显著减少(P<0.05);但没有改变其溶血特性。结果提示,InlA/InlB基因双缺失后,LM菌株的毒力能够明显减弱,但不改变其溶血特性。
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关键词
单核细胞增生李斯特菌
inla
基因
InlB基因
同源重组
缺失株
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职称材料
单增李斯特菌inl A/inl B双基因缺失株生长特性观察及对小鼠致病性研究
被引量:
4
3
作者
任静静
杨铭伟
+2 位作者
陈云飞
蒋建军
王鹏雁
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第6期529-534,共6页
目的探究单增李斯特菌inl A/inl B双基因缺失株的生物学特性。方法通过体外胁迫培养条件下OD600测定以及小鼠感染试验,对Lm90-△inlAB和Lm90的抗胁迫能力及细菌致病力进行研究。结果低温(4℃、30℃)环境下,Lm90和Lm90-△inlAB生长差异...
目的探究单增李斯特菌inl A/inl B双基因缺失株的生物学特性。方法通过体外胁迫培养条件下OD600测定以及小鼠感染试验,对Lm90-△inlAB和Lm90的抗胁迫能力及细菌致病力进行研究。结果低温(4℃、30℃)环境下,Lm90和Lm90-△inlAB生长差异无统计学意义(t4℃=0.057,P>0.05;t30℃=0.441,P>0.05),适温37℃及42℃高温环境下,Lm90-△inlAB较Lm90生长受到抑制,生长差异具有统计学意义(t37℃=0.763,P<0.05;t42℃=1.147,P<0.05);体外耐酸碱试验中,Lm90-△inlAB耐酸性未明显改变,而耐碱能力强于亲本株Lm90,生长差异具有统计学意义(pH=9时t=2.837,P<0.05);在含有3.5%酒精的BHI培养基及含5%NaCl高渗BHI培养基中,Lm90-△inlAB增长趋势明显低于Lm90,生长差异具有统计学意义(t酒精=1.422,P<0.05;tNaCl=1.382,P<0.05),Lm90-△inlAB对酒精及高盐的耐受力显著低于Lm90;小鼠毒力测定结果表明,Lm90-△inlAB与Lm90半数致死量分别为106.94 CFU、105.68 CFU,Lm90-△inlAB毒力下降明显,在不同检测时间点Lm90-△inlAB在小鼠肝脏和脾脏内的载菌量均少于Lm90,载菌量差异具有统计学意义(t肝=2.454,P<0.05;t脾=2.443,P<0.05)。结论 Lm的抗胁迫能力可能随着基因的缺失发生显著改变,内化素InlA/InlB与单增李斯特菌侵染宿主的能力有一定的调控作用。缺失株生物学特性测定对研究Lm胁迫环境生存及毒力因子的致病机理提供了科学依据。
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关键词
单核细胞增生性李斯特菌
inla
基因
inlB基因
环境耐受
毒力
下载PDF
职称材料
题名
单增李斯特菌(LM90)inlA单基因及inlB/inlA双基因缺失株的构建及其生物学特性初步研究
被引量:
6
1
作者
任静静
杨铭伟
王鹏雁
蒋建军
剡根强
机构
石河子大学动物科技学院
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第4期294-300,共7页
基金
国家自然科学基金(31260606)
文摘
为探究内化素inlA、inlB基因缺失对单核细胞增生性李斯特菌(LM)生物学特性的影响,本研究采用同源重组技术构建了inlA基因缺失株(LM90-inlA)和inlB、inlA双基因缺失株(LM90-ΔinlB/ΔinlA),并对其生物学特性进行了初步研究。结果显示:PCR和测序结果证实成功构建了目的基因(inlA、inlB)缺失株;菌落PCR和测序结果显示2种缺失株在体外连续培养20代过程中均能稳定遗传;生长特性实验表明2种缺失株与亲本株生长差异无统计学意义(t_(LM90/LM90-ΔinlA=0.34),p>0.05;t_(LM90/LM90-ΔinlB/ΔinlA)=0.324,p>0.05;t_(LM90-ΔinlA/LM90-ΔinlB/ΔinlA)=0.008,p>0.05)且inlA缺失后2缺失株对小鼠的LD_(50)分别升高了0.64、1.26个对数数量级。研究结果表明inlA基因和inlB基因对LM90的部分生物学特性具有一定的调控作用,这对于阐明LM毒力因子的致病机理提供了参考依据,也为研究内化素介导LM穿越血脑屏障(BBB)的作用机制奠定了科学基础。
关键词
单核细胞增生性李斯特菌
inla
基因
inlB基因
基因突变株
生物学特性
Keywords
Listeria monocyto
gene
s
inla
gent
inlB
gene
gene
mutant
biological characteristics
分类号
S852.4 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
InlA/InlB基因的双缺失对单增李斯特菌毒力的影响
被引量:
2
2
作者
陈云飞
王丽娜
王鹏雁
蒋建军
魏丽
机构
石河子大学动物科技学院
中国农业科学院兰州兽医研究所
出处
《石河子大学学报(自然科学版)》
CAS
2015年第4期432-437,共6页
基金
国家自然科学基金项目(31260606)
家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放课题项目(SKLVEB2011KFKT007)
石河子大学高层次人才科研启动项目(RCZX201104)
文摘
为了探讨InlA/InlB对单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)毒力的影响,本研究利用同源重组技术在LM△InlA菌株的基础上构建LMInlA/InlB基因双缺失株。通过小白鼠肝脾脑细菌计数、LD50和溶血实验,研究LM在InlA/InlB基因缺失后毒力上的差异。结果显示:LM△InlA/△InlB基因双缺失株与LM菌株相比,双缺失株的LD50升高2个数量级;与LM△InlA、LM△InlB菌株相比,双缺失株的LD50均升高1个数量级;双缺失菌株在小白鼠肝脏、脾脏和脑组织内的载菌量均显著减少(P<0.05);但没有改变其溶血特性。结果提示,InlA/InlB基因双缺失后,LM菌株的毒力能够明显减弱,但不改变其溶血特性。
关键词
单核细胞增生李斯特菌
inla
基因
InlB基因
同源重组
缺失株
Keywords
Listeria monocyto
gene
s
inla gene
InlB
gene
homologous recombination
mutant strain
分类号
S852.6 [农业科学—基础兽医学]
Q93 [生物学—微生物学]
下载PDF
职称材料
题名
单增李斯特菌inl A/inl B双基因缺失株生长特性观察及对小鼠致病性研究
被引量:
4
3
作者
任静静
杨铭伟
陈云飞
蒋建军
王鹏雁
机构
石河子大学动物科技学院
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第6期529-534,共6页
基金
国家自然科学基金项目(No.31260606)
家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金课题项目(No.SKLVEB2011KFKT007)
石河子大学高层次人才科研启动项目(No.RCZX201104)联合资助~~
文摘
目的探究单增李斯特菌inl A/inl B双基因缺失株的生物学特性。方法通过体外胁迫培养条件下OD600测定以及小鼠感染试验,对Lm90-△inlAB和Lm90的抗胁迫能力及细菌致病力进行研究。结果低温(4℃、30℃)环境下,Lm90和Lm90-△inlAB生长差异无统计学意义(t4℃=0.057,P>0.05;t30℃=0.441,P>0.05),适温37℃及42℃高温环境下,Lm90-△inlAB较Lm90生长受到抑制,生长差异具有统计学意义(t37℃=0.763,P<0.05;t42℃=1.147,P<0.05);体外耐酸碱试验中,Lm90-△inlAB耐酸性未明显改变,而耐碱能力强于亲本株Lm90,生长差异具有统计学意义(pH=9时t=2.837,P<0.05);在含有3.5%酒精的BHI培养基及含5%NaCl高渗BHI培养基中,Lm90-△inlAB增长趋势明显低于Lm90,生长差异具有统计学意义(t酒精=1.422,P<0.05;tNaCl=1.382,P<0.05),Lm90-△inlAB对酒精及高盐的耐受力显著低于Lm90;小鼠毒力测定结果表明,Lm90-△inlAB与Lm90半数致死量分别为106.94 CFU、105.68 CFU,Lm90-△inlAB毒力下降明显,在不同检测时间点Lm90-△inlAB在小鼠肝脏和脾脏内的载菌量均少于Lm90,载菌量差异具有统计学意义(t肝=2.454,P<0.05;t脾=2.443,P<0.05)。结论 Lm的抗胁迫能力可能随着基因的缺失发生显著改变,内化素InlA/InlB与单增李斯特菌侵染宿主的能力有一定的调控作用。缺失株生物学特性测定对研究Lm胁迫环境生存及毒力因子的致病机理提供了科学依据。
关键词
单核细胞增生性李斯特菌
inla
基因
inlB基因
环境耐受
毒力
Keywords
Listeria monocyto
gene
s
inla gene
inlB
gene
environment tolerance
virulence
分类号
R378.99 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
单增李斯特菌(LM90)inlA单基因及inlB/inlA双基因缺失株的构建及其生物学特性初步研究
任静静
杨铭伟
王鹏雁
蒋建军
剡根强
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
6
下载PDF
职称材料
2
InlA/InlB基因的双缺失对单增李斯特菌毒力的影响
陈云飞
王丽娜
王鹏雁
蒋建军
魏丽
《石河子大学学报(自然科学版)》
CAS
2015
2
下载PDF
职称材料
3
单增李斯特菌inl A/inl B双基因缺失株生长特性观察及对小鼠致病性研究
任静静
杨铭伟
陈云飞
蒋建军
王鹏雁
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
4
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职称材料
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