马铃薯后代材料晚疫病的抗性鉴定

为筛选出农艺性状优良且抗病性较好的后代材料,本试验对60份马铃薯“青薯9号”与“大西洋”杂交后代材料的离体叶片进行4种不同菌株的接种,分析4种菌株接种后的病斑面积及抗性等级,并利用LAMP技术对接种不同天数的离体叶片进行扩增检测。结果表明在60份后代材料中,高抗有6份,抗性有11份,中抗有17份,感病有24份,高感有2份。表现抗病的后代材料一共有34份,均具有广谱性,其中18份后代材料对4种菌株均产生抗病,16份后代材料对3种或2种菌株产生抗病,对4种菌株表现抗性的后代材料的广谱性比对3种或2种菌株表现抗性的后代材料高。利用LAMP技术检测接种1~5 d内及5 d后离体叶片的晚疫病菌,其扩增检测结果一致,均呈蓝色,为阳性。综上,本研究筛选的马铃薯后代材料可为抗病育种提供品种参考,LAMP技术能够对马铃薯晚疫病达到早期鉴定及预警的目的,为马铃薯晚疫病早期防治提供技术支持。

超声波-微波辅助提取杜仲叶多糖工艺优化及其体外抗凝血活性分析

为开发我国丰富的杜仲叶资源,研究超声波-微波辅助提取杜仲叶多糖的最优工艺条件及其理化性质和体外抗凝血活性。首先通过单因素实验确定超声波功率、提取温度、微波功率、料液比、提取时间等影响多糖得率因素的范围,然后通过Plackett-Burman试验筛选关键影响因素,再采用Box-Behnken试验对工艺条件进行优化,分析了所得杜仲叶精制多糖的分子量、单糖组成等理化性质及活化部分凝血酶原时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)等抗凝血指标。结果表明,料液比、提取时间、提取温度为关键影响因素,最优提取工艺条件为超声波功率130 W、提取温度49℃、微波功率200 W、料液比1:30(g:m L)、提取时间20 min。在此条件下,杜仲叶多糖的实际得率为4.02%±0.03%,与理论得率4.08%接近。所得杜仲叶精制多糖的重均分子质量(M_(w))为1653 kDa,单糖组成及摩尔比为果糖37.3%、葡萄糖35%、N-乙酰-D氨基葡萄糖14.6%、半乳糖8.6%、阿拉伯糖4.4%。分析结果显示,杜仲叶多糖为β型酸性多糖。与阴性对照相比,杜仲叶多糖能极显著延长APTT(P<0.01),而当杜仲叶多糖浓度为8 mg/mL时,PT、TT亦能极显著延长(P<0.01),说明杜仲叶多糖主要通过内源性途径影响凝血系统,同时也能够通过外源性、共同途径来影响凝血过程。此研究可为我国丰富的杜仲叶资源的高值化开发利用提供理论依据和技术参考。

甜瓜蔓枯病离体接种方法初步研究

以感病品系"白皮脆"和抗源"PI 140471"的离体叶片为试验材料,初步研究甜瓜蔓枯病离体接种方法。离体接种后将叶片置于26±1℃、16 h光照/8 h黑暗及90%的相对湿度条件下培养,2 d后感病品系的离体叶片出现褐化病斑,发病率达60%左右,4 d后病斑开始扩大,离体叶片发病率为100%;抗病材料和对照则没有被浸染,未出现病斑。采用离体叶片和苗期活体两种接种方法,对10个厚皮甜瓜新品种进行蔓枯病抗性鉴定筛选,结果表明两种方法接种后的发病率和病情指数均呈正相关,病情指数的相关系数达0.44,两种方法的鉴定结果基本一致。因此,离体叶片接种方法可用于快速鉴定甜瓜蔓枯病抗病性。

不同茄子品种对灰霉病的室内抗病性鉴定

采用离体叶片接种法,鉴定比较了20种圆形果类和20种棒形果类茄子品种对灰霉病的抗病能力。结果表明:供试的不同茄子品种对茄子灰霉病的抗病性存在显著差异,分为4种抗病类型,其中圆果类茄子中"六叶茄"、"黑皇后"、"鄂茄一号"、"特优牛心茄"4个品种为高感品种,"大叶白花"等5个品种为中感品种,"园杂5号"等4个品种为高抗品种,"茄杂快圆王"等7个品种为中抗品种;棒形果类的20个品种中,"渝早茄二号"、"早二红茄"以及"黑骑士长茄"3个品种为高感品种,"金满地紫红长茄"、"尼克长茄"、"香蕉茄"以及"渝早茄四号"为中感品种,"渝研二号"、"宫崎早茄"、"美茄一号"、"天使丽人"等8个品种为中抗品种,"黑龙王长茄"等5个品种属于高抗品种。

毛竹叶柄多糖体外抗氧化作用研究

研究毛竹叶柄多糖(polysaccharide from moso bamboo leaves,简称PMBL)的体外抗氧化作用。以芦丁和VC为对照,测定PMBL对二苯代苦味酰自由基(DPPH)、超氧阴离子自由基(O2-·)和羟自由基(·OH)的清除能力,同时用硫代巴比妥酸(TBA)法测定其对亚油酸过氧化的抑制作用。结果表明,PMBL对O2-·和·OH均具有较强清除作用,其IC50分别为5.98mg/L和5.55mg/L,效果优于VC和芦丁;对DPPH(IC50=36.08mg/L)的清除能力略弱于VC和芦丁;TBA实验表明PMBL抗脂质过氧化效果不够理想。

芒果叶提取物体外抗菌作用研究

目的研究芒果叶提取物的体外抗菌效果。方法采用琼脂二倍稀释法,观察芒果叶提取物对临床常见呼吸道感染菌的抑制作用。结果芒果叶提取物对6种常见的呼吸道感染菌(铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯杆菌、鲍氏不动杆菌、金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌)有较强的体外抑制作用,其最低抑菌浓度(MIC)为0.107～0.320mg/mL;细菌接种量增加和培养基pH值降低均可使芒果叶提取物的MIC增加1～3倍。结论芒果叶提取物对6种常见呼吸道感染菌具有较强的体外抗菌作用。

利用体外瘤胃发酵法评价桑叶与羊草的组合效应

本试验旨在利用体外瘤胃发酵法研究不同比例的桑叶与羊草之间的组合效应,从而筛选出两者之间的最佳组合比例。将桑叶和羊草分别以0∶100(T0组)、20∶80(T20组)、40∶60(T40组)、60∶40(T60组)、80∶20(T80组)、100∶0(T100组)的比例混合后作为底物,进行连续72 h的体外产气培养和体外批次培养试验。结果表明:1)随着底物中桑叶比例的提高,理论产气量、累积产气量、培养液微生物蛋白(MCP)浓度和体外有机物消化率(IVDOM)都有升高的趋势;2)在72 h时,T100组的理论最大产气量、累积产气量和IVDOM都显著高于其他各组(P<0.05),T60和T100组的培养液M CP浓度显著高于其他各组(P<0.05);3)在48和72 h时,T60、T80和T100组培养液pH显著低于其他各组(P<0.05);4)在72 h时,T60、T80和T100组培养液的总挥发性脂肪酸(TVFA)、乙酸浓度没有显著差异(P>0.05),但都显著高于其他各组(P<0.05);5)在6、12和72 h时,T60、T80和T100组的培养液氨氮(NH3-N)浓度显著高于其他各组(P<0.05);6)T60组的多项组合效应(MFAEI)要高于其他各组。综上所述,桑叶与羊草的组合能够改善体外瘤胃发酵特性,即存在正组合效应,其中桑叶与羊草的最佳比例为60∶40。

植物激素和接种方式对广西金线莲壮苗生根的影响

该文以广西野生金线莲无菌播种离体茎段为材料,采用单因素对比试验,研究了植物激素(NAA、IBA、6-BA、GA 3、KT、ZT、TDZ、2-IP)以及接种方式(竖直接种和水平接种)对壮苗生根培养的影响。结果表明:与对照相比,生长素有利于壮苗生根,NAA的效果优于IBA;细胞分裂素对壮苗生根的效果依次为6-BA>TDZ>KT=ZT>2-IP>CK,其中6-BA诱导平均株高8.4 cm,3.6条根,茎粗为2.84 mm,植株生长健壮,诱导效果最好;赤霉素GA 3诱导出的植株高且直,但植株细弱,且抑制根系生长,不利于壮苗生根培养;在激素组合6-BA 0.5 mg·L-1、NAA1.0 mg·L-1处理中,组培苗生长健壮且根数量较多,效果最佳;水平接种能诱导出更多的根系,且便于接种操作,可以节省接种时间。因此,确定广西金线莲最适宜的壮苗生根培养基配方为1/2MS+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA 1.0 mg·L-1+香蕉汁100 g·L-1+AC(活性炭)1.0 g·L-1+蔗糖20 g·L-1,最佳接种方式为水平接种。

芦荟离体快速高效增殖技术的研究

以美国大叶芦荟为材料 ,就激素配比和接种方式进行芦荟离体快速增殖技术的研究 ,结果表明 :细胞分裂素配合低浓度的生长素可使芦荟的增殖系数净增约 60 % ,最佳增殖培养基为 MS+4.0 mg/ L BA+0 .2 mg/ L IAA;研究采用的 4种接种方式增殖系数跨度在 1 1 .2～ 1 7.5之间 ,其中方式 3和方式 4为理想的接种方式 ,增殖系数是已有报道水平的 3～ 4倍 ;最佳的生根培养基为 1 / 2 MS+0 .5～ 1 .0 mg/ L NAA或 1 / 2 MS+0 .5～ 1 .0 mg/ L IAA。另外 。

利用马铃薯离体叶片结薯的新途径

通过2007—2009年的研究发现,在马铃薯植株生长到现蕾期或开花前期,通过适当的温度控制,利用脱毒马铃薯离体羽状复叶的腋芽,以一定浓度的萘乙酸(NAA)、吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA)刺激,经过4～5周后,能够诱导出有效微型小块茎。其个体一般为3.0～8.0 g,最高可达10.0 g以上,后代植株生长健壮,不退化,产量高。采用马铃薯离体叶片腋芽结薯,时间短、成本低、操作简便、繁殖系数高,提高了单薯粒重,开辟了马铃薯微型薯生产的新途径。

体外产气法评价榆树叶在反刍动物日粮的应用

利用体外产气法探讨不同精粗比下榆树叶与苜蓿、精料间不同配比对饲粮组合效应(Associative effects,AE)的影响。28个饲粮组合培养0、2、4、6、9、12、24、36、48、72 h时记录产气量(Gas production,GP),计算GP72h的AE。72 h后收集上清液及残渣用以测定pH、挥发性脂肪酸(Volatile fatty acids,VFA)、氨态氮(NH3-N)、干物质降解率(Dry matter digestibility,DMD)和有机物降解率(Organic matter digestibility,OMD),计算单项AE指数、综合AE指数。结果表明,80.20.0、60.40.0、60.10.30、50.20.30、50.10.40、40.40.20、40.30.30、30.55.15、30.40.30、20.20.60组GP72h、DMD、OMD、NH3-N含量以及GP、DMD、OMD、TVFA、NH3-N AE值显著或极显著高于同精粗比下其他各组(P<0.05或P<0.01),30.55.15组AE最优。30.55.15、40.40.20、50.20.30、20.20.60、60.10.30、80.20.0组的单项AE指数、综合AE指数最大,组合效果最佳,可按此配比将榆树叶应用于反刍动物饲粮。

不同来源向日葵菌核病分离物致病性分化研究

为进一步揭示核盘菌种群内是否存在着致病性分化现象,采用离体叶片菌饼接种法,以向日葵品种龙食葵3号为供试寄主,对采集于内蒙古和黑龙江省不同地区的20个向日葵核盘菌分离物进行了致病性测定。结果表明:接种72h后,除4个分离物不能致病外,其余16个分离物均能致病,但各分离物所致病斑直径差异很大,为1.00～80.00mm。说明不同来源核盘菌菌株间致病性存在着显著的差异,且这种致病性分化与菌株来源没有明显的相关性。

剑麻离体叶片接种剑麻茎腐病菌方法的研究

以剑麻茎腐病菌为接种病原菌,以H.11648离体叶片为接种对象,研究了5种接种方法、6种分生孢子浓度以及不同温度条件下和植株不同部位叶片的接种效果。结果表明,叶面打孔法或切口滴108个/ml的分生孢子悬浮液接种效果最好。采用该方法,20℃～42℃才能接种成功,30℃～35℃是接种后的最适培养温度;中部叶片的接种效果好于下部叶片,上部叶片接种效果最差。

体外产气法评价发酵桑叶对湖羊瘤胃发酵参数的影响

【目的】研究发酵桑叶在湖羊瘤胃中的产气效果及降解率,为发酵桑叶的推广应用提供理论基础。【方法】选用苜蓿和羊草作为试验对照,采集3头健康成年湖羊瘤胃液,利用体外产气法评估发酵桑叶在瘤胃中48 h内的产气发酵参数。【结果】发酵桑叶48 h体外产气总量为187.25 mL·g^-1,与苜蓿体外产气总量差异不显著(P>0.05),但极显著高于羊草(P<0.01);发酵桑叶总可挥发性脂肪酸浓度为46.78 mmol·L^-1,极显著高于羊草组(P<0.01);其中发酵桑叶的乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、异丁酸和异戊酸浓度分别为29.76、10.18、4.12、1.54、0.48和0.70 mmol·L^-1,除丙酸外,其他酸浓度均显著高于羊草(P<0.01);其中丁酸和戊酸浓度显著高于苜蓿(P<0.01)。发酵桑叶、苜蓿和羊草发酵液中氨态氮(NH3-N)含量分别为1.03、1.75和0.71 mmol·mL^-1,组间差异极显著(P<0.01);发酵桑叶的乙酸丙酸比值为2.92,极显著高于苜蓿和羊草(P<0.01);发酵桑叶的干物质降解率为46.76%,极显著低于苜蓿和羊草(P<0.01),中性洗涤纤维降解率为70.25%,极显著高于苜蓿和羊草(P<0.01)。【结论】发酵桑叶能促进反刍动物瘤胃产气发酵,可以在反刍动物饲料中应用推广。

冬瓜和节瓜疫病的离体叶片接种方法研究

【目的】评估离体叶片接种法对冬瓜疫病抗性鉴定的可行性,建立一种快速高效的冬瓜疫病抗性鉴定方法,并筛选抗疫病的冬瓜和节瓜品种,为培育及利用抗病品种提供参考。【方法】以注射灌根接种法为对照,采用离体叶片接种法对9份冬瓜品种进行抗病性鉴定和比较,评估离体叶片接种法的可行性;并采用所建立的离体叶片接种法对23份冬瓜品种和18份节瓜品种进行抗病性鉴定,从中筛选抗、耐疫病的冬瓜和节瓜品种。【结果】离体叶片接种后,发病症状主要表现为叶片呈现暗绿色水渍状病斑,后期变成黑色病斑,有的会长出白色霉层。9份供试冬瓜品种中,铁柱168、B184和P33等7份冬瓜品种分别采用两种方法进行抗感性评价,反应类型结果完全一致。两种鉴定方法对冬瓜疫病的抗性鉴定结果一致性高达77.78%:注射灌根接种法发病率的平均值是54.6%,病情指数的平均值是29.6;离体叶片接种法发病率的平均值是60.2%,病情指数的平均值是31.5。对两种接种法的发病率和病情指数进行相关性分析,结果表明注射灌根接种法和离体叶片接种法的相关性达极显著水平(P<0.01),两种接种方法的发病率与病情指数相关系数分别为0.953和0.993。节瓜普遍比冬瓜更抗疫病,初步筛选出3份高抗冬瓜品种,分别是连环杂交大冬瓜、铁心999黑皮冬瓜和黑娃四号小冬瓜,病情指数分别为5.9、9.2和1.7;5份高抗节瓜品种,分别是佳庆338节瓜、玲珑节瓜、翠秀节瓜、新粤农8号和5号黑毛节瓜,病情指数分别为4.2、5.0、5.8、6.7和7.5。【结论】与注射灌根法相比,离体叶片接种法具有发病症状明显、操作方便、速度快、不伤害植物等优点,离体叶片接种法可作为冬瓜品种疫病抗病性鉴定的辅助手段,用离体叶片接种法筛选出3份高抗冬瓜品种和5份高抗节瓜品种可作为培育及利用抗病品种的资源。

不同添加剂对菊芋茎叶青贮品质及营养价值的影响

为了合理开发和利用菊芋(Helianthus tuberosus)茎叶资源,本研究以成熟期菊芋茎叶为原料,研究添加0.28%乳酸菌(乳酸菌组)和0.28%菊粉(菊粉组)对菊芋茎叶青贮品质的影响。采用两极离体法评定其营养价值,以期为菊芋茎叶的饲料化利用提供参考依据。试验结果表明,1)与对照组(无添加剂)相比,乳酸菌组和菊粉组的感官评定为优级。2)与对照组相比,乳酸菌组pH、丁酸、氨态氮占总氮量(NH3-N/TN)均显著低于对照组(P<0.05),而乙酸、乳酸含量显著高于对照组;菊粉组pH显著低于对照组(P<0.05),乙酸、乳酸含量显著高于对照组;乳酸菌组与菊粉组相比,乳酸菌组pH、丁酸含量显著低于菊粉组(P<0.05),而乙酸含量和NH3-N/TN则显著高于菊粉组。3)与对照组相比,乳酸菌组和菊粉组的粗灰分含量显著降低(P<0.05),水溶性碳水化合物显著升高。4)与对照组相比,乳酸菌组干物质、中性洗涤纤维消化率显著升高(P<0.05),菊粉组干物质消化率显著升高而酸性洗涤纤维消化率显著降低;乳酸菌组中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维消化率显著高于菊粉组,而干物质消化率差异不明显(P>0.05);综上所述,添加0.28%乳酸菌和0.28%菊粉均可提高菊芋茎叶青贮饲料的发酵品质和营养价值,且同等浓度下,乳酸菌的改善效果更优。

Box-Behnken响应面法优化航天杂交构树叶多糖提取工艺及体外抗氧化活性研究

以多糖得率为指标,采用加热回流提取法,通过单因素试验结合Box-Behnken响应面法优化构树(Broussonetia papyrifera)叶多糖的最佳提取工艺;体外测定对DPPH(DPPH·)、ABTS阳离子(ABTS^(+)·)、羟基自由基(·OH)和超氧阴离子(O2^(-)·)的清除率及铁还原能力。结果表明,构树叶多糖的最优提取工艺为料液比1∶40(g/mL)、提取时间2.5 h、提取3次,多糖得率为(8.37±1.03)%;构树叶多糖体外对DPPH·、ABTS^(+)、·OH和O2^(-)·的半数抑制浓度(IC50)分别为2.62、0.067、0.94、2.07 mg/mL,且对铁的还原力随着浓度的升高而增大。该工艺条件适用于构树叶多糖的制备,构树叶多糖具有良好的体外抗氧化活性,可作为新型抗氧化剂和自由基清除剂。

紫苏叶黄酮的提取工艺优化及其体外抗氧化活性的研究

试验旨在优化紫苏叶黄酮的提取工艺,研究紫苏叶黄酮的抗氧化活性。采用单因素试验结合正交试验,研究微波辅助法的不同工艺条件对紫苏叶黄酮提取率的影响。结果显示:影响紫苏黄酮提取率因素排序为:乙醇浓度>提取时间>微波功率。最优工艺参数为:乙醇浓度80%、微波功率300 W和提取时间30 min,此工艺条件下的紫苏叶黄酮提取率为5.21%。体外抗氧化试验结果表明,紫苏叶黄酮对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、羟自由基(OH·)和超氧阴离子自由基(·O_(2)^(-))均具有较好的清除效率。研究表明,紫苏叶黄酮具有较好的抗氧化能力,是一种优质的天然抗氧化物质。

小麦白粉病离体叶段筛选方法初探

本研究用小麦离体叶段法测定8种药剂各4个浓度对小麦白粉病的防效,结果表明,离体叶段法可用于新化合物对小麦白粉病菌的活性筛选.

一种TMV抗性离体快速鉴定方法及其在烟草育种上的应用

烟草普通花叶病,由烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)引起,是烟草生产中的常见病害之一,培育和种植抗病品种是解决该病害的主要途径,育种材料的抗性鉴定是抗病育种的关键环节。为提高TMV抗性鉴定效率,本研究根据TMV与N基因作用的原理设计了一种烟草苗期离体接种快速鉴定TMV抗性的方法。该方法为研磨病害严重程度为5级的新鲜病叶(10 g)并过滤,往过滤液中加纯净水(100 m L)稀释为病毒液;摘取6~7叶期烟苗的叶片(从上往下数第3叶)进行离体摩擦接种;3 d后观察坏死斑发生情况。应用此鉴定方法对20份烟草材料的TMV抗性进行鉴定,结果表明13份材料出现免疫斑;同时,对20份烟草材料的N基因进行了检测,结果表明13份材料含有N基因。出现免疫斑的材料与含N基因的材料相一致,证明了苗期离体接种方法鉴定TMV抗性的可行性。将此方法应用于21524份育种中间材料(7047株BC_(1)F_(3)、10013株BC_(1)F_(4)、4464株BC_(1)F_(5))的TMV抗性鉴定中,结果得到9829株(3103株BC_(1)F_(3),4762株BC_(1)F_(4),1964株BC_(1)F_(5))抗性植株。鉴定结果基本符合10761株抗性植株(3523株BC_(1)F_(3),5006株BC_(1)F_(4),2232株BC_(1)F_(5))的理论值,进一步证明了此方法的可靠性。本研究对大量烟草育种中间材料的TMV抗性鉴定具有重要的应用价值。