基因捕获元件int1和ISCR1在临床菌株中的分布及与细菌耐药性的关系研究

目的研究临床多种细菌中的Ⅰ型整合酶编码基因int1和ISCR1的分布情况,探究其与细菌多药耐药表型的关系。方法收集2011-2012年河北省某医院临床菌株,应用VITEK2COMPACT全自动微生物生化鉴定系统和16SrDNA序列分析进行种属鉴定,利用PCR方法进行int1基因和ISCR1筛查;两种可移动元件的携带情况和菌株的多药耐药表型之间的关系采用卡方检验进行统计计算。结果共收集临床菌株372株,包括325株革兰氏阴性菌和47株革兰氏阳性菌;int1基因和ISCR1在22种(属)175株和18种(属)90株革兰氏阴性细菌中检出,同时在17种(属)71株革兰氏阴性细菌中检出,革兰氏阳性细菌int1基因和ISCR1检测均为阴性;通过对数据分层对比,统计分析发现,在int1基因不存在时,ISCR1的存在与否与菌株是否为多药耐药的关系明显,差异有统计学意义(P<0.01),其存在亦能介导更广泛种类药物耐受,差异亦有统计学意义(P<0.01)。在int1基因存在时,ISCR1的存在能介导更广泛种类药物耐受,差异有统计学意义(P=0.02);在ISCR1不存在时,int1基因的存在与否与菌株是否多药耐药的关系明显,差异有统计学意义(P<0.01),其存在亦能介导更广泛种类药物耐受,差异亦具有统计学意义(P<0.01)。而在ISCR1存在的情况下,上述两种关系不明显。结论基因捕获元件int1基因及ISCR1在革兰氏阴性临床菌株中分布广泛,并与细菌的多重耐药、泛耐药明显相关,特别是ISCR1;应加强可移动元件int1基因或ISCR1流行状况的监测,为其在耐药基因捕获中的作用机制研究和控制多药耐药细菌在临床散播提供可靠的基础数据。

定时中断INT1CH的应用

通过在ＰＣ机上开发的定时监控、显示系统，部析了ＲＯＭＢＩＯＳ中ＩＮＴ１ＣＨ的定时原理；

白念珠菌anillin家族蛋白Int1调控septin细胞骨架组织的结构与功能研究

目的探究白念珠菌anillin家族蛋白Int1对septin细胞骨架组织的调控。方法构建白念珠菌Int1蛋白的全长及截短的系列片段质粒,使其与绿色荧光蛋白(GFP)融合表达,通过荧光显微镜观察其胞内定位,鉴定Int1中介导芽颈定位的区域。在模式生物酿酒酵母细胞中,对Int1全长及片段进行过量表达,观察其对细胞生长、细胞形态和septin组织的影响,从而确定Int1中介导与septin相互作用,发挥主要生物学效应的功能区段,研究这一区段与septin的共定位。结果 Int1全长1 661个氨基酸残基,鉴定出一段仅含有209个氨基酸的中间区段Int1-M4(739~947 aa),在小芽和大芽时期均可以定位在芽颈。过量表达Int1-M4导致细胞产生显著的生长缺陷、芽体变长的细胞形态和septin组织絮乱。在芽体变长的细胞中,Int1-M4与异常的septin结构存在明显共定位。结论 Int1中一段仅含有209个氨基酸的中间区段Int1-M4(739~947 aa)介导了其芽颈定位和与septin的相互作用,在调控septin组织过程中发挥重要功能。

483株肉鸡源大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ISCR1及int1基因的流行及耐药情况

目的 研究山东肉鸡源细菌中ISCR1和int1基因的流行及耐药情况。方法 于2014年6月，在山东某大型肉鸡养殖场中选择日龄在37 d的待宰肉鸡作为采样对象。将鸡舍分为东部、南部、西部、北部、中部5区，选取不同区域肉鸡，采用单纯随机方法，按照1∶50比例进行泄殖腔拭子采样，共得到肉鸡粪便样本400份，经分离共得到483株非重复性样本菌株，其中大肠埃希菌373株（77.2%），肺炎克雷伯菌110株（22.8%）；采用微量肉汤稀释法，测定菌株对8类10种抗菌药物的最低抑菌浓度；并对int1和ISCR1基因进行PCR扩增和测序；比较携带两种基因的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的耐药程度差异。结果 483株菌株中，共检测到携带int1基因的菌株为440株（91.1%），携带ISCR1基因的菌株为126株（26.1%），同时携带int1和ISCR1基因的菌株共有126株（26.1%）。37株同时不携带ISCR1和int1基因的大肠埃希菌耐受0~2、3~5、6~8类药物的比例分别为13.5%（5株）、78.4%（29株）和8.1%（3株），288株仅携带int1基因的大肠埃希菌耐受0~2、3~5、6~8类药物的比例分别为2.4%（7株）、74.7%（215株）和22.9%（6株），两者差异有统计学意义（P〈0.001）；26株仅携带int1基因的肺炎克雷伯菌耐受0~2、3~5、6~8类药物的比例分别为11.5%（3株）、76.9%（20株）和11.5%（3株），78株同时携带ISCR1和int1基因的肺炎克雷伯菌耐受0~2、3~5、6~8类药物的比例分别为0、35.9%（28株）和64.1%（50株），两者差异有统计学意义（P〈0.001）。结论 int1和ISCR1基因在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中的检出率较高，两类基因同时存在可介导更高程度的耐多药表型。

MGB探针标记-实时荧光PCR方法检测细菌int1基因和ISCR1元件方法的建立

目的 建立一种快速、准确检测细菌中ISCR1复合型Ⅰ型整合子的MGB探针二重实时荧光PCR方法。方法 根据ISCR1复合型Ⅰ型整合子中int1基因和ISCR1元件序列设计特异性引物和探针,在多种经常携带有2种多耐药相关基因元件的细菌中检测其特异性;使用含有2种基因元件特异性序列的重组质粒标准品评价建立方法的灵敏度。结果 建立的MGB二重探针实时荧光PCR检测方法特异性好,携带2种基因元件或单独含有ISCR1或者int1的实验菌株均出现相应特异性扩增曲线,对2种基因元件均不含的菌株进行试验扩增时,均未见出现特异性扩增曲线。对2种基因元件都存在的实验菌株的扩增中,亦不存在由于2套引物/探针相互影响而造成的干扰扩增。根据标准质粒样品构建的标准曲线可确定其对int1基因和ISCR1元件的检测灵敏度分别为5.89×10~1拷贝/μl和4.13×10~1拷贝/μl。结论本研究成功建立了MGB二重探针实时荧光PCR快速检测方法。

临床分离大肠杆菌磺胺敏感性及磺胺抗性相关基因的检测

对分离自中国东北牛(n=181)、猪(n=182)、鸡(n=146)和鹌鹑(n=55)的粪便及病变器官的564株大肠杆菌菌株进行磺胺敏感性与磺胺抗性基因检测。分别用肉汤微量稀释法和聚合酶链式反应检测磺胺敏感性和磺胺抗性基因。结果表明:在564株菌株中,235(41.7%)株对磺胺试剂敏感,329(58.3%)株对磺胺甲恶唑有抗性,190(33.7%)株对甲氧苄啶-磺胺甲恶唑有抗性;不同动物分离株的磺胺抗性比例不同,从牛、猪、鸡和鹌鹑中分离到的菌株int1基因的比例分别是12.2%、44.5%、40.4%、18.2%,sul1基因比例分别是5.5%、37.4%、28.1%、3.6%,sul2基因比例分别是39.2%、25.3%、29.5%、10.9%,但在牛、鸡、鹌鹑源菌株中未检测到sul3基因,在182株猪源大肠杆菌中检测到13株(7.1%)sul3基因阳性菌株。菌株的磺胺抗性与其包含的抗性基因之间不完全吻合。

防止非法设置开机口令

公用机房中,微机被非法设置开机口令一直困扰着管理人员,分析了非法设置开机口令的途径,给出了防止非法设置开机口令的方法及实用程序。

不动杆菌临床分离株耐药性相关基因研究

目的:研究北京大学第一医院不动杆菌临床分离株耐药表型与基因型。方法:琼脂稀释法和E-test法测定13种抗菌药物对31株不动杆菌的最低抑菌浓度(M IC),PCR检测8种耐药相关基因并测序分析。结果:18株不动杆菌呈现多重耐药;aacC1,aacA4,PER-1,AmpC和Int1阳性率分别为58.1%(18/31),3.2%(1/31),3.2%(1/31),54.8%(17/31)和67.7%(21/31),aacC2,OXA-23和Int2阴性;敏感组和耐药组Int1检出率分别为23.1%和100%。耐药基因与已知序列同源性均>98%。结论:北京大学第一医院不动杆菌耐药问题严重,对β内酰胺类和氨基糖苷类抗生素耐药性分别与AmpC和aacC1相关;Int1与多重耐药相关。

经皮冠状动脉介入对急性心肌梗死患者CXCL13、INTβ1表达的影响

目的分析静脉溶栓手术、经皮冠状动脉介入(PCI)两种方案治疗前后急性心肌梗死(AMI)患者血清中整合素(INT)β1、趋化因子(CXCL)13的变化及临床价值。方法 84例符合手术及溶栓标准的AMI患者中44例为手术组(PCI),余40例采取静脉内溶栓术为溶栓组,对照组选择30例具有非典型胸痛症状,其冠脉造影结果提示左右冠状动脉均未见异常,排除恶性肿瘤和肝肾功能异常者。观察3组超声心动检查、临床基本资料和一般情况及心功能情况、血清CXCL13与INTβ1变化。并在同时间对手术组与对照组进行Gensini评分评估。结果 3组基本病史、性别、年龄没有统计学差异(P>0.05);溶栓和手术组N末端B型利钠肽前体(NT-proBNP)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平与对照组有统计学差异(P<0.01);Gensini评分手术组与对照组差异显著(P<0.001),手术组和溶栓组NT-proBNP、LDL-C水平没有显著差异(P>0.05)。其他临床指标3组间无明显差异。入院时血清INTβ1在手术组和溶栓组较对照组显著增加,而入院后24 h表达较入院时显著减低,以手术组降低更明显;血清CXCL13在手术组和溶栓组入院时表达均明显低于对照组,而入院后24 h表达较入院时明显升高,尤以手术组增加显著(均P<0.05)。结论血清CXCL13、INTβ1表达可能共同作用于AMI发生与发展,且和心肌梗死范围大小有关。二者联合检测对心功能的结局预测有理论依据作用。

电力线OFDM通信处理器INT51X1及其应用开发

INT51X1是美国Intellon公司专为电力线OFDM通信推出的处理器,论述了它的功能结构及技术特点,并以该处理器为核心研究开发了中压配电网的OFDM电力通信系统。

基于电力线的OFDM配电自动化通信系统的设计与实现

本文介绍了一种基于电力线通信的配电自动化通信系统的设计,该系统适用于中压配电网,并以美国 Inetllon公司专为电力线 OFDM 通信生产的 INT51X1处理器为核心,实现了新型的配电自动化解决方案。

不同分期恶性肿瘤患者合并严重冠状动脉狭窄PCI术后CXCL13、INTβ1变化及远期预后

目的探讨不同分期恶性肿瘤患者合并严重冠状动脉狭窄经皮冠状动脉介入(PCI)术后趋化因子(CXCL)13、整合素(INT)β1变化及远期预后。方法收集186例恶性肿瘤合并严重冠状动脉狭窄行PCI手术患者的临床资料,患者手术前后均行血清CXCL13、INTβ1检测,出院后长期随访,专人对资料进行回顾性的整理分析。结果早中期与晚期恶性肿瘤患者在PCI术前时血清CXCL13、INTβ1水平比较差异无统计学意义(P>0.05),PCI术后3d CXCL13、INTβ1较术前下降,晚期患者高于早中期患者,比较差异有统计学意义(P<0.05);早中期与晚期恶性肿瘤患者主要终点事件发生率分别为33.68%、69.23%,次要终点事件发生率分别为55.79%、89.01%,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性显示:恶性肿瘤患者PCI术后CXCL13、INTβ1水平与患者终点事件发生率间呈正相关(P<0.05)。结论不同分期恶性肿瘤患者合并严重冠状动脉狭窄PCI术后CXCL13、INTβ1变化及远期预后存在差异,晚期恶性肿瘤患者在PCI术后预后更差,术后CXCL13、INTβ1变化在一定程度上能反应患者预后情况。

配电网OFDM通信系统研究和终端设计

研究开发配电网的电力线网络通信系统,提出了适于配网自动化的 OFDM 通信系统方案。以 OFDM 收/发器 INT51X1和嵌入式ARM 处理器为核心,完成了通信终端的具体设计。

畜禽粪便堆放地土壤中抗生素抗性基因和细菌群落的垂直分布特征

本文通过对养殖场猪粪和鸡粪堆放地0~100 cm土壤样品的采集和分析,研究了长期堆放畜禽粪便对土壤中抗生素抗性基因(简称"抗性基因")和细菌群落结构垂直分布的影响。定量PCR结果表明,与对照土壤相比,猪粪和鸡粪堆放增加了0~100 cm土壤中四环素类抗性基因(tetC、tetG、tetL、tetW)、磺胺类抗性基因(sulI、sulII)以及整合酶基因(intI1)的检出率和检出丰度,说明粪肥堆放造成堆放地土壤中抗性基因污染。聚类分析结果表明,抗性基因和intI1基因的丰度随土壤深度呈递减趋势,且主要集中在0~30 cm土层,表明堆放地土壤中抗性基因存在向下层土壤迁移的风险。相关性分析表明, intI1基因分别与抗性基因呈显著正相关,说明intI1基因可能在抗性基因传播中起着重要作用。同时高通量测序结果表明,与对照土壤相比,猪粪和鸡粪堆放显著降低了0~10 cm和10~30 cm土层细菌群落结构的多样性, 0~30 cm土层中,猪粪和鸡粪堆放地土壤中细菌群落结构与对照土壤的差异要高于深层土壤。此外,方差分解分析结果表明,土壤化学性质和细菌群落结构均影响了土壤中抗性基因的垂直分布,且细菌群落结构的变化是其主要的影响因素。本研究可为控制畜禽粪便堆放地土壤中抗性基因污染提供科学依据。

基于INT51X1内核的电力调制解调制器的设计与实现

介绍了一种基于INT51×1芯片的电力线通信系统设计。系统利用电力线网传输以太网数据,速率达到14Mbps。系统是以INT51×1为核心芯片,同时外围芯片采用93C46,AT89C51,AT8989UP/ADM8511。电力线通信系统具有较高的可靠性,为家庭网络的实现提供了新的方法。

基于INT51 X1芯片的调制技术在10kV配电网自动化通信系统中的应用

在10kV电力线上实现高速数据传输有着广阔的应用前景和经济价值,但是由于电力线信道存在着不可预期的高噪声、多径效应和信道衰落,严重制约了高速数据的传输。而近几年兴起的无线信道上实现高速数据传输的新技术,即OFDM(多载波正交频分复用)技术,是解决这些电力线通信问题的有效方法,文中提出了一种基于美国Intellon公司的INT51X1电力通信专用芯片并结合台湾Winbond公司32位ARM7TDMI内核的RISC微处理器W90N740的PLC通信系统的设计。

以INT51X1为核心的低压电力网载波调制解调器及其实现技术

根据中国接入网的现状,提出了一个以电力线通信(PLC)作为接入方式的拓扑结构。在对电力线信道模型分析的基础上,介绍了基于低压电力网数字通信的几种常见方式。最后以正交频分复用的原理与应用为例,具体阐述了以INT51X1芯片为核心的高速电力线接入设备的设计方案。

电力线MAC/PHY集成收发器INT51X1及其应用

介绍了美国Intellon公司的电力线MAC/PHY集成收发器INT51X1的功能结构和主要特点 ,介绍了它的引脚功能 ,同时以中压配电网OFDM通信系统的研究开发为例 ,给出了INT51XI的应用实例。

基于OFDM调制技术的配电自动化通信系统

OFDM是一种高效的、在电力线通信中比较理想的调制技术。文中提出了一种基于OFDM技术的配电自动化通信系统。

甲烷(煤矿井下)数据的采集方法

阐述了单片机在煤矿井下甲烷数据采集中的应用方法及其优缺点。