整合素α_5β_1在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的:研究整合素α5β1 在非小细胞肺癌(non -small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达以及与临床病理特征的关系。方法:用免疫组化SP法检测53例NSCLC组织及12 例正常肺组织的石蜡标本中α5β1 的表达情况。结果:整合素α5β1 在NSCLC组织中的表达(58. 49%)明显高于正常肺组织( 16 .67%),差异有统计学意义,P=0 .009;α5β1 的表达与病理分级负相关,高、中、低分化NSCLC 组织α5β1 的阳性率分别是28. 57%、68 .18%和70 .59%,病理分级越低,表达越高,差异有统计学意义,P=0 .031;α5β1 表达升高与淋巴结转移、临床分期有关,α5β1 在淋巴结转移阳性的NSCLC组织中的表达(67 .50%)高于淋巴结转移阴性组表达(30 .77%),差异有统计学意义,P=0 020,α5β1 在Ⅱ、Ⅲ期NSCLC组织中的表达(64. 29%、75 00%)高于Ⅰ期(30. 77%),差异有统计学意义,P=0 .042。结论:α5β1 高表达可能与NSCLC的恶性生物学特性有关,α5β1 在NSCLC的发生、发展中可能起了一定的作用。

整合素α5和caspase 3在肝细胞癌中的表达情况及意义

【目的】探讨整合素α5和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(caspase 3)在肝细胞癌(HCC)中的表达及其临床意义。【方法】收集2015年1月至12月40例在本院实施手术切除并经病理确诊为HCC病例的癌组织石蜡标本以及癌旁组织标本?备行免疫组织化学检查整合素α5、caspase 3于HCC中的表达情况;收集2016年1月至12月期间选择实施手术切除的HCC患者30例的新鲜HCC组织和对应的癌旁组织,备行荧光定量RTPCR和蛋白质印迹法检测整合素α5、caspase3的mRNA表达。【结果】肝癌组织中整合素α5表达率显著高于,caspase 3的阳性表达率低于癌旁组织(P<0.05);40例HCC患者的整合素α5蛋白质表达与TNM分期和肿瘤转移密切相关(P<0.05),caspase 3的蛋白质表达与HBsAg、TNM分期、肿瘤转移密切相关(P<0.05);肝癌组织中整合素α5和caspase 3的表达具有负相关性(P<0.05);肝癌组织中的整合素α5mRNA相对表达量明显高于癌旁组织,caspase 3 mRNA低于癌旁组织(P<0.05)。【结论】整合素α5与caspase 3呈负相关表达,其可能在肝癌细胞的凋亡期间进行参与,但它们对于肝癌细胞失巢凋亡的作用机制需要进一步的深入研究。

FN及其受体整合素α5在小鼠肾小体发育过程中的表达

目的观察细胞外基质的重要成分纤维粘连蛋白(FN)及其受体整合素5α在小鼠肾小体发育过程中的表达,探讨它们在肾小体发育过程中的作用和相互之间的关系。方法选取胚龄(E)12、14、16、18d和生后日龄(P)1、3、7d共7组小鼠,每组8只,E12d组小鼠取全胚,其余各组小鼠取左侧肾脏经固定、脱水、定向包埋等步骤后制备石蜡切片,行免疫组织化学染色和体视学分析。取各组小鼠右侧肾脏液氮速冻后,-80℃保存,用免疫印迹方法检测FN和整合素5α的含量。结果免疫组织化学染色结果显示,FN表达于除逗号小体以外的各期肾小体基膜。整合素α5在不同胚日龄小鼠肾小体的上皮细胞和内皮细胞都有一定程度表达。体视学测量结果显示FN表达的面密度值和整合素5α表达的体密度值都随着肾脏的发育逐渐增大。免疫印迹结果显示,FN和整合素5α蛋白的含量都随肾脏的发育而逐渐增加。结论 FN和整合素α5在小鼠肾小体的发育和成熟过程中具有一定的时空性表达,对肾小体基膜的发育起一定作用。

辛伐他汀对大鼠肾间质成纤维细胞增殖及α_5整合素表达的影响

目的研究辛伐他汀对培养的大鼠肾间质成纤维细胞TGF-β1激活后细胞增殖及表面α5整合素表达的影响。方法不同浓度辛伐他汀加入到含有TGF-β1培养液培养的大鼠肾间质成纤维细胞,分别采用MTT法及细胞流式仪检测细胞的增殖,RT-PCR法检测大鼠肾间质成纤维细胞表面α5整合素的表达。结果辛伐他汀能抑制由TGF-β1所引起的大鼠肾间质成纤维细胞的增殖,阻止细胞由G1期进入S期。辛伐他汀能显著抑制TGF-β1对大鼠肾间质成纤维细胞表面α5整合素的表达促进作用,同时随着辛伐他汀浓度的增加,抑制作用明显增强。结论辛伐他汀能抑制由TGF-β1所引起的大鼠肾间质成纤维细胞的增殖及细胞表面α5整合素的表达。

牙龈蛋白酶在诱导成骨细胞凋亡过程中对整合素α5、β1表达的影响

目的探讨牙龈蛋白酶在诱导成骨细胞凋亡过程中对整合素α5、β1的调节机制，为牙周炎发病机制的研究提供理论依据。方法标准厌氧环境下培养牙龈卟啉单胞菌W83，分离提纯牙龈蛋白酶。用8．348U／L牙龈蛋白酶处理小鼠成骨细胞MC3T3-E148h，末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法4’，6-二脒基．2一苯基吲哚[transferase—mediateddeoxyuridinetriphosphate—biotinnickendlabeling-（4-Amidinophenyl）-6-indolecarbamidinedihydrochloride，TUNEL—DAPI]双染色法检测细胞凋亡；蛋白质印迹法检测整合素α5、β1蛋白的表达水平。结果精氨酸．蛋白酶活性为（41．74±2．11）U／L，赖氨酸一蛋白酶活性为（1．02±0．25）U／L。TUNEL—DAPI染色显示牙龈蛋白酶作用于MC3T3一E1细胞48h后诱导细胞发生凋亡。在短时间内（≤72h）牙龈蛋白酶呈时间依赖性下调整合素α5、β1的表达水平，48h时整合素α5、β1相对表达量分别为（0．485±0．039）、（0．504±0．002），72h时分别为（0．398±0．058）、（0．179±0．001），与对照组（蛋白相对表达量分别为1．000±0．000、1．000±0．000）相比差异均有统计学意义（P〈0．05）；72h后，整合素α5表达水平与对照组相比差异无统计学意义，但整合素B1仍持续下调（96、120h时相对表达量分别为0．604±0．003、0．357±0．002），均显著低于对照组（1．000±0．000）（P〈0．05）。牙龈蛋白酶特异性抑制剂甲苯磺酰．L．赖氨酰．氯甲基酮（tosyl．CL—clysine-chloromethyl—ketone，TLCK）可有效抑制蛋白酶活性，使整合素α5、β1蛋白表达量分别从（0．398士0．058）、（0．179±0．001）显著上升至（0．7814-0．012）、（0．857±0．060）（P〈0．05），但TLCK本身不改变整合素α5、β1的表达水平（P〉0．05）。同时牙龈蛋白酶还呈剂量依赖性下调整合索α5、β1的表达水平，20．8700U／L牙龈蛋白酶作用下整合素α5、B1相对表达量达最低值（0．105±0．004、0．0204-0．000），与对照组（1．000±0．000）相比差异有统计学意义（P〈0．05）。牙龈蛋白酶直接处理成骨细胞膜蛋白提取物，与对照组相比各组间整合素α5 β1相对表达量差异无统计学意义（P〉0．05），提示牙龈蛋白酶不直接降解整合素α5、β1结论牙龈蛋白酶在诱导成骨细胞凋亡过程中呈时间和剂量依赖下调整合素α5、β1的表达，下调途径不是通过该蛋白酶的直接蛋白水解发挥作用。