DCLK1和ITGA5在非小细胞肺癌患者中的表达及其与临床病理特征及预后的关系研究

目的 检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者血清双皮质素样激酶1(doublecortin-like kinase 1,DCLK1)和整合素α5(integrin alpha5,ITGA5)水平并讨论二者与临床病理特征及预后的关系。方法 选取2017年6月1日至2020年7月1日在我院收治的116例NSCLC患者(NSCLC组)作为研究对象,收集同期100例健康受试者作为对照组,采用酶联免疫吸附法检测NSCLC组和对照组受试者血清中DCLK1和ITGA5的水平;根据预后情况将患者分为生存组和死亡组,ROC曲线分析血清DCLK1、ITGA5的水平对NSCLC患者3年发生死亡的预测价值,多因素Cox回归分析影响NSCLC患者发生死亡的因素。结果 NSCLC组患者血清DCLK1、ITGA5的水平高于对照组(P<0.05);不同吸烟史、TNM分期、分化程度、肿瘤直径以及淋巴结转移的NSCLC患者血清DCLK1、ITGA5的水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);死亡组患者血清DCLK1、ITGA5的水平均高于生存组(P<0.05);血清DCLK1、ITGA5单独及联合预测患者发生死亡的AUC分别为0.895(95%CI=0.824~0.944)、0.828(95%CI=0.747~0.892)、0.926(95%CI=0.862~0.966);DCLK1、ITGA5及淋巴结转移是影响NSCLC患者发生死亡的独立危险因素(P<0.05)。结论 NSCLC患者血清DCLK1、ITGA5的水平异常升高,二者的表达水平与NSCLC患者临床病理特征和不良预后有关。

缺氧对人胰腺癌细胞整合素α5、β1表达的影响

目的探讨缺氧环境对人胰腺癌细胞株PANC1诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor1α，HIF-1α）、整合素α5（integrina，INFα5）和整合素β1（integrinβ1，INTβ1）表达及侵袭力的影响。方法以5％氧条件下培养PANC1，采用RT-PCR和Western blot检测HIF-1α、INTα5、INTβ1的mRNA和蛋白表达；采用Matrigel胶观测人胰腺癌细胞黏附侵袭能力的变化。并加入HIF-1a抑制剂YC-1缺氧培养PANC1，观察上述各指标的变化。结果HIF-1α蛋白表达从常规培养时0．497±0．011逐渐上升到缺氧培养24h的1．455±0．133（P〈0．05），应用YC-1后蛋白表达下降到0．465±0．073（P〈0．05），而HIF-1α mRNA表达无明显变化；INTα5蛋白从常规培养时0．964±0．032逐渐下降到缺氧培养24h的0．465±0．073（P〈0．05），应用YC-1后蛋白表达又上升到0．883±0．013（P〈0．05），INTα5mRNA的表达从0．212±0．023下降到0．018±0．002（P〈0．05），应用YC-1后再上升到0．069±0．011（P〈0．05）；INTβ1的蛋白和mRNA表达于缺氧培养及YC-1处理后均无明显变化。细胞侵袭力从常规培养时69．9±30．5逐渐上升到缺氧培养24h的105．0±14．9（P〈0．05），应用YC-1后又下降到79．7±20．9（P〈0．05）。结论缺氧微环境下HIF-1α过表达可能通过下调INTα5来调控胰腺癌细胞间和细胞与基质间的黏附能力，有利于进一步侵袭转移。

微创钻孔密闭引流术对慢性硬膜下血肿患者HIF-1α、Claudin-5、TGF-β及Smad2/3表达的影响

目的 探讨单孔与双孔钻孔密闭引流术对慢性硬膜下血肿患者血肿外膜中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、紧密连接蛋白5 (Claudin-5)、转化生长因子-β(TGF-β)及细胞信号转导因子(Smad2/3)表达的影响。方法 选取100例慢性硬膜下血肿患者,按随机数字表法分为单孔钻孔引流组和双孔钻孔引流组。分别统计两组患者手术前后血肿外膜中HIF-1α、Claudin-5、TGF-β及Smad2/3的表达量。结果 与术前比较,两组患者术后血肿外膜中HIF-1α、TGF-β、Smad2/3蛋白表达量均下调,且双孔组下调更明显(P <0. 05)。两组患者术后血肿外膜中Claudin-5蛋白表达量均升高(P <0. 05),且双孔组升高更明显,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论 单、双孔钻孔密闭引流术是治疗慢性硬膜下血肿行之有效的方法,可使患者血肿外膜中HIF-1α、TGF-β及Smad2/3蛋白表达量下调,Claudin-5的表达量明显升高,且双孔钻孔密闭引流术效果更显著。

A型流感病毒对小鼠肺部菌群及趋化因子CCL5和CXCL10的影响及麻杏石甘汤干预作用研究

目的探索麻杏石甘汤(Maxing Shigan Decoction,MSD)通过影响小鼠肺部菌群及趋化因子CCL5和CXCL10表达而防治流感病毒感染的潜在机制。方法通过鼻腔接种法建立A型流感病毒感染小鼠模型,经ig给药或生理盐水3、7 d后,计算肺指数和肺指数抑制率,HE染色检测肺组织病理变化,应用免疫组化、酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测肺组织中CCL5和CXCL10蛋白和mRNA表达变化,并取小鼠肺组织进行16S rRNA基因V3~V4可变区测序、物种注释及聚类,分析Alpha多样性和Beta多样性及组间差异物种,分析CCL5、CXCL10表达与肺部菌群变化的关系。结果给药3 d后,模型组肺指数明显高于对照组(P<0.01)和药物组(P<0.05、0.01),肺部炎性细胞浸润明显。麻杏石甘汤组肺部炎性细胞浸润明显减轻,肺指数抑制率与奥司他韦组相似,肺损伤的组织学定量评价指标(IQA)值较模型组明显降低(P<0.01)。模型组CCL5和CXCL10表达明显高于对照组(P<0.01),奥司他韦组和麻杏石甘汤组CCL5和CXCL10表达明显低于模型组(P<0.05、0.01)。16S rRNA基因测序结果显示,模型组拟杆菌属、埃希菌属、变形杆菌属相对丰度增加,粪球菌属相对丰度降低。奥司他韦和麻杏石甘汤能显著降低拟杆菌属、埃希菌属、变形杆菌属相对丰度,增加粪球菌属相对丰度;Alpha多样性分析结果显示各组ACE指数、Chao1指数、Shannon指数比较P>0.05,组间丰富度和多样性无差异。Beta多样性分析结果显示,给药3 d后,组间样品点无交集,组间肺菌群构成有差异。各组间有显著性差异物种。Spearman相关性分析显示,CCL5和CXCL10表达与埃希菌属、变形杆菌属、拟杆菌属丰度呈正相关,与粪球菌属丰度呈负相关。给药7 d后,各组间肺部菌群结构组成及CCL5、CXCL10表达无显著差异。结论麻杏石甘汤可能通过促进肺部有益菌生长改善肺部微生态环境及免疫微环境,对流感病毒引起的肺损伤有一定的保护作用。

补肾健脾解毒利咽法对IgA肾病模型大鼠归巢相关黏附分子的影响

目的:探讨补肾健脾解毒利咽法不同剂量中药对免疫球蛋白A(IgA)肾病模型大鼠小肠及骨髓中黏附分子整合素α_(4)β_(1)与血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)与趋化因子受体-4(CXCR4)表达的影响。方法:采用雄性SD大鼠120只,应用牛血清白蛋白(BSA)灌胃、CCl4皮下注射、脂多糖(LPS)尾静脉注射等方案的改良法制备IgA肾病大鼠模型后,验证模型成功后,随机将大鼠分为空白组、模型组、洛汀新组(63 mg·kg^(-1))、补肾健脾解毒利咽法(中药)低、中、高剂量组(10.4、20.81、41.62 g·kg^(-1)),每组16只,给药7周后处死大鼠,收集相关标本并检验,采用免疫组化检测大鼠小肠固有膜黏附分子α_(4)β_(1),VCAM-1,SDF-1和CXCR4的蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠骨髓中黏附分子α_(4)β_(1),VCAM-1,SDF-1和CXCR4 mRNA表达变化情况。结果:与空白组比较,第10、12、14、16周模型组大鼠的尿红细胞计数均显著升(P<0.01)。与模型组比较,第10、12、14、16周洛汀新组与中药各剂量组大鼠尿红细胞计数均明显降低(P<0.05),其中中药中剂量组对于大鼠尿红细胞计数改善更明显(P<0.05)。与空白组比较,模型组大鼠小肠固有膜黏附分子α_(4)β_(1),VCAM-1,SDF-1和CXCR4蛋白表达均明显升高(P<0.05)。与模型组比较,洛汀新组及中药各剂量组大鼠小肠固有膜α_(4)β_(1),VCAM-1,SDF-1和CXCR4蛋白表达均明显下降(P<0.05)。与模型组比较,中药中剂量组大鼠小肠固有膜SDF-1与CXCR4蛋白表达均明显下降(P<0.05)。与空白组比较,模型组大鼠骨髓黏附分子α_(4)β_(1),SDF-1 mRNA表达明显下降,VCAM-1,CXCR4 mRNA表达明显升高(P<0.05)。与模型组比较,洛丁新组与中药各剂量组大鼠骨髓黏附分子SDF-1,CXCR4 mRNA均明显下降(P<0.05)。结论:补肾健脾解毒利咽法通过调节小肠固有膜及骨髓中黏附分子α_(4)β_(1)与VCAM-1、SDF-1与CXCR4的表达,从而调节浆细胞的归巢效应,可能与Toll样受体介导的免疫应答激活有关,补肾健脾解毒利咽法中药可能通过减少相关黏附分子的表达量从而浆细胞在循环中的增殖,进而减轻IgA肾病肾脏损伤。

JMH血型抗原研究进展

JMH血型抗原是1984年发现的,抗原名取自于先证者John Milton Hagen(约翰·密尔顿·哈根)名字。该系统当时只发现有1个抗原,后来陆续共发现了有5个抗原。到2019年国际输血协会(ISBT)重新确认该系统有7个抗原。本文就JMH抗原在近几年来研究的新进展,做一简略介绍。