右美托咪定抑制化学性低氧引起的PC12细胞炎症反应

目的探讨右美托咪定(dexmedetomidine,DEX)能否抑制化学性缺氧引起的PC12细胞炎症反应。方法用氯化钴(CoCl2)处理PC12细胞,建立化学性低氧诱导的细胞损伤实验模型;ELISA法检测细胞培养液中白介素6(IL-6)、白介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-ɑ)的水平;以CCK-8法检测细胞存活率。结果 CoCl2处理PC12细胞能产生明显的炎症反应,导致IL-6、IL-1β和TNF-ɑ释放增多;IL-6、IL-1β和TNF-ɑ的中和抗体能抑制CoCl2导致的细胞存活率下降。DEX和活性氧(ROS)抑制剂N-乙酰半胱胺酸(NAC)不但能抑制CoCl2引起的上述炎症因子的释放,而且使PC12细胞存活率升高。结论 DEX可通过抑制炎症反应和抗氧化作用对抗化学性缺氧引起的PC12细胞毒性。

甲强龙在骨髓间充质干细胞治疗大鼠脊髓损伤中的作用及对肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-1β表达的影响

目的探讨甲强龙(MP)在骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗大鼠脊髓损伤(SCI)中的作用及对局部肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1β表达变化的影响。方法采用改良Allen法制备40只T10脊髓损伤雄性大鼠模型,随机数字表法随机分为对照组、MP组、BMSCs组和MP+BMSCs组4组,每组10只。按上述分组分别在脊髓损伤后立即尾静脉缓慢推注30 mg/kg MP和/或在脊髓损伤后2 h于脊髓损伤部位注射全贴壁法培养并以Brd U标记的BMSCs。术后1、7、14 d,采用BBB运动评分法评价大鼠后肢运动功能恢复。14 d后处死各组大鼠并取出脊髓样本,分别进行TNF-α、IL-1β免疫组织化学染色和Tunel染色,各组统计视野内TNF-α、IL-1β表达阳性细胞数并检测细胞凋亡率;采用Brd U单染观察BMSCs组和MP+BMSCs组中Brd U阳性率。结果术后1 d,各组BBB评分差异无统计学意义(χ2=1.0756,P=0.7829)。术后7 d,各组大鼠双后肢运动功能较前明显恢复,其中MP组(χ2=8.3265,P=0.0325)和BMSCs组(χ2=14.1166,P=0.0036)的BBB评分明显高于对照组;MP+BMSCs组的BBB评分明显高于MP组(χ2=17.7186,P=0.0002)和BMSCs组(χ2=15.8110,P=0.0024)。术后14 d,各组大鼠双后肢运动功能明显恢复,MP+BMSCs组BBB评分明显高于MP组(χ2=24.7259,P<0.0001)和BMSCs组(χ2=25.6014,P<0.0001),MP组(χ2=13.5060,P=0.0062)和BMSCs组(χ2=8.9613,P=0.0299)的BBB评分明显高于对照组。术后14 d,对照组、MP组、BMSCs组和MP+BMSCs组的细胞凋亡率分别为(48.47±5.70)%、(31.95±3.58)%、(41.39±2.33)%和(23.48±2.69)%,其中,MP组(q=14.84,P<0.0001)和BMSCs组(q=6.716,P=0.0002)明显低于对照组,MP+BMSCs组明显低于MP组(q=7.332,P=0.0001)和BMSCs组(q=15.460,P<0.0001)。术后14 d,免疫组织化学染色结果显示,MP组(q=14.710,P<0.0001;q=6.710,P<0.0001)和BMSCs组(q=6.502,P=0.0001;q=2.849,P=0.0514)的TNF-α及IL-1β阳性细胞数均明显低于对照组,MP组(q=5.573,P=0.0004;q=4.596,P=0.0025)和BMSCs组(q=13.780,P<0.0001;q=8.456,P<0.0001)的TNF-α及IL-1β阳性细胞数明显高于MP+BMSCs组。术后14 d,Brd U染色结果显示,BMSCs组的Brd U阳性率为(6.600±0.3399)%,明显低于MP+BMSCs组的(9.300±0.5175)%(t=4.361,P=0.0004)。结论 MP可明显提高BMSCs移植治疗SCI的大鼠后肢运动功能恢复,二者可协同降低局部TNF-α和IL-1β表达水平,并且MP有效提升了移植BMSCs的存活。

威灵仙浸膏外敷联合电针齐刺法对膝关节骨性关节炎患者HA、IL-1β及MMP-1水平的影响

目的观察威灵仙浸膏外敷联合电针配穴齐刺手法治疗膝关节骨性关节炎的疗效及对患者HA、IL-1β及MMP-1水平的影响。方法将286例膝关节骨性关节炎住院患者随机分为治疗组和联合组,每组143例。治疗组给予电针配穴齐刺手法及超短波理疗+口服盐酸氨基葡萄糖胶囊治疗,联合组在此基础上外敷自制威灵仙浸膏,2组疗程均为21 d。检测2组治疗前后关节液透明质酸(HA)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量,病理检查软骨MMP-1细胞阳性表达率,对2组患者进行疼痛VAS评分,计算WOMAC骨关节炎指数,观察2组临床疗效及不良反应发生情况,随访6个月复发情况。结果治疗后2组HA含量均明显高于治疗前(P均<0.05),且联合组明显高于治疗组(P<0.05);2组IL-1β含量均较治疗前明显降低(P均<0.05),且联合组明显低于治疗组(P<0.05)。治疗组治疗前后MMP-1阳性表达率比较差异无统计学意义,联合组治疗后MMP-1阳性表达率明显低于治疗前及治疗组(P均<0.05)。2组治疗后WOMAC、VAS评分均较治疗前明显降低(P均<0.05),且联合组明显低于治疗组(P<0.05)。联合组总有效率明显高于治疗组(P<0.05),复发率明显低于治疗组(P<0.05)。结论自制威灵仙浸膏外敷联合电针配穴齐刺法治疗膝关节骨性关节炎疗效好,可明显降低复发率,是一种安全、可靠、有效的联合治疗方案。

基于化瘀通痹方干预活动期类风湿关节炎效果观察及血清TNF-α、IL-1β、CRP变化机制探究

目的研究化瘀通痹方干预活动期类风湿关节炎效果及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、C反应蛋白(CRP)变化机制。方法选取2017年2月—2019年1月医院活动期类风湿关节炎患者192例,采用SPSS 20.0软件,产生随机数字,将纳入患者分为观察组和对照组(各96例)。两组患者均采用同样的药物基础干预,观察组联合化瘀通痹方;且观察两组患者第1个疗程结束时(T1)、第3个疗程结束时(T2)临床治疗效果,检测治疗前(T0)、T1和T2类风湿因子(RF)和血清TNF-α、IL-1β、CRP水平,统计晨僵、关节疼痛等症状、体征变化状况及用药安全性。结果 T1时,观察组临床总有效率67.71%(65/96)与对照组60.42%(58/96)比较,差异无统计学意义(P>0.05);T2时,临床总有效率94.79%(91/96)高于对照组70.83%(68/96),差异有统计学意义(P<0.05)。T0、T1、T2时,两组患者晨僵时间、关节压痛数、肿胀数和休息痛评分、患者自评/总体状态评分以及RF、TNF-α、IL-1β、CRP水平均呈下降趋势,差异有统计学意义(P<0.05);T2时,观察组晨僵时间、关节压痛数、肿胀数和休息痛评分、患者自评/总体状态评分及RF、TNF-α、IL-1β、CRP水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组药品不良反应事件6例(发生率6.25%)低于对照组的15例(发生率15.63%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论化瘀通痹方通过降低血清TNF-α、IL-1β、CRP水平,利于削弱活动期类风湿关节炎炎症反应程度而减轻关节损伤,其增效减毒作用显著。

DATS通过p38MAPK通路抑制LPS诱导的小鼠MH-S细胞TNF-α及IL-1β表达

目的探讨p38MAPK在二烯丙基三硫(DATS)抑制脂多糖(LPS)诱导小鼠肺泡巨噬细胞促炎细胞因子表达中的作用。方法体外培养MH-S细胞,用DATS和(或)LPS进行干预,Western blot检测细胞p38及磷酸化p38(p-p38)的表达;用LPS和(或)SB203580孵育细胞,反转录PCR检测细胞中TNF-α、IL-1βmRNA表达,Western blot检测细胞磷酸化(p-IκB)及非磷酸化IκB的表达。结果 LPS刺激MH-S细胞可导致p-p38表达增加,呈时间依赖性;用DATS(0.1、0.5、2.5、5.0 mg.L-1)预处理细胞30 min后再给予LPS刺激,p-p38表达呈剂量依赖性下降;单独DATS对p-p38表达无明显影响。p38特异性抑制剂SB203580可剂量依赖性地抑制LPS诱导的p-IκB蛋白、TNF-α及IL-1βmR-NA表达。结论 DATS可通过抑制p38MAPK通路抑制IκB磷酸化及NF-κB活化,进而下调LPS诱导小鼠肺泡巨噬细胞TNF-α、IL-1βmRNA表达。

平脉定悸方对快速型心律失常患者血清IL-1β、NF-κB及心率变异性的影响

目的 探讨平脉定悸方加减治疗快速型心律失常的疗效及对血清白细胞介素-1β(IL-1β)、核因子-κB(NF-κB)和心率变异性的影响。方法 选取78例重度快速型心律失常急发患者,按照随机数字表法分为两组各39例,经急诊处理,生命体征平稳后,对照组给予常规西药治疗,研究组加用平脉定悸方。观察两组治疗前后的血清IL-1β、NF-κB及心率变异性指标变化,比较两组的治疗效果。结果 相比治疗前,两组治疗后LVEF水平升高,LVEDd、LVESd水平降低,并且组间对比研究组的LVEF更高,LVEDd及LVESd水平更低(P<0.05)。相比治疗前,两组治疗后的SDANN、SDNN、RMSSD水平均升高(P<0.05),组间对比研究组的SDANN、SDNN、RMSSD水平更高(P<0.05)。两组治疗后的血清IL-1β、NF-κB水平均较治疗前明显降低,且组间对比研究组的血清IL-1β、NF-κB水平更低(P<0.05)。研究组总有效率为92.31%,显著高于对照组的76.92%(P<0.05)。研究组随访期间的复发率显著低于对照组(P<0.05)。结论 在快速型心律失常的临床治疗中,平脉定悸方的加用可进一步减轻机体炎症反应,保护血管内皮功能,改善心率变异性,从而提高治疗效果。

黄体酮对鼠脑外伤后脑组织炎性信号因子表达的干预作用

目的观察黄体酮对脑外伤后脑组织内炎症反应信号转导因子核因子-κB(NF-κB)、炎症细胞因子如肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)水平的影响,探讨其对创伤性脑外伤(TB I)继发性脑损伤的保护作用及可能的作用机制。方法采用Freeney法造成大鼠脑挫裂伤模型,在伤后1、3、5、7天不同时相点用ELISA法、免疫组化法分别检测4组大鼠脑组织中NF-κB、TNF-α、IL-1β水平的变化。结果伤后注射黄体酮治疗组脑组织NF-κB、TNF-α、IL-1β3种炎性因子水平均比脑创伤组低(P<0.05)。结论注射黄体酮能降低脑外伤后炎性信号因子表达,减轻脑外伤后脑组织的炎症反应,对脑组织起一定的保护作用。

局部亚低温对脑出血后血清细胞间粘附分子-1和白细胞介素-1β的影响

目的研究局部亚低温治疗对脑出血患者血清细胞间粘附分子-1(ICAM-1)和白细胞介素-1β(IL-1β)的影响。方法随机将70例脑出血患者分为局部亚低温组(35例)和常规治疗组(35例),同时设健康对照组19例;常规治疗组应用药物治疗,局部亚低温组在药物治疗基础上加用局部亚低温治疗,观察两组患者发病第1、3、7天血清ICAM-1和IL-1β水平的变化。结果两组患者发病第1天血清ICAM-1和IL-1β水平均高于健康对照组(P<0.01);第3天常规治疗组ICAM-1和IL-1β水平达高峰,局部亚低温组下降,明显低于常规治疗组(P<0.05);在发病第7天,局部亚低温组血清ICAM-1和IL-1β仍明显低于常规治疗组(P<0.05)。结论颅脑局部亚低温治疗可显著降低脑出血后患者血清ICAM-1和IL-1β的浓度,减轻脑出血后的炎症反应,发挥其脑保护作用。

沉香精油通过抑制p-STAT3和IL-1β/IL-6产生抗炎作用

目的沉香是常用名贵药材,因具有多种药效且药用资源稀缺,是目前研究的热点。沉香精油(Chinese eaglewood essential oil,CEEO)是其主要有效成分,本实验旨在研究CEEO的抗炎作用及分子机制。方法采用小鼠耳肿胀实验和大鼠足肿胀实验评价CEEO的抗炎活性;通过脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞模型研究CEEO对白细胞介素(IL)-1β、IL-6等的影响;采用Western blot方法研究CEEO对大鼠组织蛋白p-STAT3,p-IκBα/p-NF-κBp65的影响;通过气相色谱-质谱联用(GCMS)方法分析CEEO的化学成分。结果CEEO(60~960 mg·kg^-1,ig)剂量依赖地抑制二甲苯所致耳肿胀(P<0.001),最高抑制率为73%;CEEO(680 mg·kg^-1,ig)明显抑制角叉菜胶所致足肿胀(P<0.001),最高抑制率为51%。ELISA和RTPCR结果显示,CEEO(10、5、2.5μg·m L-1)显著抑制IL-1β和IL-6的产生及其mRNA水平(P<0.001),最高抑制率分别为68%和39%,64%和52%。Western blot结果显示,CEEO(680 mg·kg^-1,ig)明显抑制p-STAT3蛋白的表达,抑制率为21%(P<0.05)。通过GC-MS鉴定了沉香中的117个化合物,其主要成分为倍半萜类(68.83%)。结论本实验首次发现中国沉香精油灌胃给药具有显著的抗炎活性,其机制可能是通过降低p-STAT3的过表达,进而抑制前炎症细胞因子IL-1β和IL-6的产生和释放,从而抑制炎症的发生与发展。沉香精油的抗炎作用可能与其所含的主成分倍半萜有关。

秦艽对尿酸钠痛风模型大鼠的保护作用

目的:观察秦艽乙醇提取物对尿酸钠痛风模型大鼠的保护作用。方法:大鼠按体重随机分为6组,分别为空白对照组、模型组、秦艽乙醇提取物1.0g/kg剂量组、秦艽秦艽乙醇提取物0.5g/kg组、痛风舒组、别嘌呤醇组。除对照组外,其他各组采用0.2ml尿酸钠溶液(25μg/ml)注入右侧踝关节腔内,形成痛风性关节炎模型。造模后连续给药7天,每天测量两侧踝关节同一部位的周长。实验结束后处死大鼠,颈总动脉取血,测定生化指标和分子生物学指标。结果:(1)秦艽乙醇提取物1.0g/kg可以明显抑制两侧踝关节肿胀程度。(2)秦艽乙醇提取物1.0g/kg和0.5g/kg可以显著降低尿酸钠痛风模型大鼠血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平。结论:秦艽乙醇提取物可以减轻尿酸钠痛风模型大鼠关节损伤,其机理与下调血清TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE2和MMP-3表达有关。