IL-35、Beclin-1在乳腺癌患者外周血中的水平及意义

目的探讨白细胞介素(IL)-35、自噬相关蛋白Beclin-1在乳腺癌患者外周血中的水平及意义。方法选取2022年5-10月在上海市嘉定区妇幼保健院诊治的原发性乳腺癌女性患者44例(乳腺癌组)、乳腺良性肿瘤女性患者40例(乳腺良性肿瘤组)及体检的健康者40例(健康对照组)作为研究对象。采用酶联免疫吸附试验检测并比较各组外周血中IL-35和Beclin-1水平,同时检测乳腺癌患者糖类抗原15-3(CA15-3),比较不同临床病理特征的乳腺癌患者IL-35、Beclin-1、CA15-3水平;分析乳腺癌患者外周血IL-35、Beclin-1、CA15-3水平之间的相关性。结果乳腺癌组和乳腺良性肿瘤组外周血IL-35水平均高于健康对照组(P<0.05),Beclin-1水平均低于健康对照组(P<0.05)。乳腺癌组外周血IL-35水平高于乳腺良性肿瘤组(P<0.05),Beclin-1水平低于乳腺良性肿瘤组(P<0.05)。不同病理分级、淋巴结转移情况的乳腺癌患者外周血IL-35、Beclin-1水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);不同雌激素受体(ER)检测结果的乳腺癌患者外周血IL-35水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),而Beclin-1水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。乳腺癌患者外周血IL-35水平与Beclin-1水平呈负相关(r=-0.484,P<0.05);IL-35、Beclin-1水平与CA15-3水平均无相关性(均P>0.05)。结论乳腺癌患者外周血IL-35水平升高、Beclin-1水平降低。不同病理分级、淋巴结转移情况的乳腺癌患者外周血IL-35、Beclin-1水平有明显差异。乳腺癌患者外周血IL-35水平与Beclin-1水平呈负相关,而IL-35、Beclin-1水平与肿瘤标志物CA15-3水平均无关。

白介素-35在M2型巨噬细胞中的表达及其对前列腺癌细胞的增殖、侵袭和上皮间质转化的影响

目的探讨白介素(IL)-35在巨噬细胞中的表达及其对前列腺癌(PCa)细胞增殖、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响和机制。方法检测巨噬细胞标记分子CD68、M1型标记分子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β和M2型标记分子CD206、IL-10在人单核/巨噬细胞系THP-1细胞诱导分化后的M0、M1与M2型巨噬细胞中的表达。使用不同类型的巨噬细胞-源条件培养液(CM)处理PCa细胞系PC-3,并将其分为:M0-CM组、M1-CM组、M2-CM组和预先使用IL-35中和抗体(IL-35 NA)干预的M2-CM处理组(M2-CM+IL-35 NA组)。检测各组中PC-3细胞的增殖活力、侵袭、EMT,以及细胞内JAK/STAT信号通路p-JAK2/JAK2与p-STAT3/STAT3比值的差异。结果与未刺激的THP-1细胞比较,M0、M1和M2型巨噬细胞中CD68 mRNA表达升高(P<0.01);与M0型巨噬细胞比较,TNF-α、IL-1βmRNA在M1型巨噬细胞中升高(P<0.01),而CD206、IL-10 mRNA在M2型巨噬细胞中升高(P<0.01);与M0-CM组比较,M2-CM组PC-3细胞增殖活力、侵袭、EMT和细胞内p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值升高(P<0.05),M2-CM+IL-35 NA组PC-3细胞的增殖活力、侵袭、EMT和细胞内p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值均显著降低(P<0.05),M1-CM组PC-3细胞的增殖活力、侵袭、EMT和细胞内p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值均无显著改变(P>0.05);与M2-CM组比较,M1-CM组和M2-CM+IL-35 NA组增殖活力、侵袭、EMT和细胞内p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值降低(P<0.05)。结论M2型巨噬细胞可通过分泌IL-35来促进PC-3细胞的增殖、侵袭和EMT,这可能与IL-35能上调JAK2/STAT3信号通路的活化相关。

结直肠癌组织高表达IL-35对Th1和Th17可塑性的作用

目的 探讨结直肠癌组织中高表达的抑制性细胞因子白细胞介素(IL)-35对辅助性T细胞1(Th1)和辅助性T细胞17(Th17)可塑性的作用。方法 选取2019年3月—2020年2月上海交通大学医学院附属新华医院结直肠癌患者90例(结直肠癌组)和健康体检者28名(正常对照组)。采用流式细胞术检测结直肠癌组和正常对照组外周血Th1百分比(Th1%)和Th17百分比(Th17%)。基于Kaplan-Meier Plotter数据库分析γ-干扰素(IFN-γ)和IL-17A高表达对结直肠癌患者总生存期和预后不良的影响。采用免疫组化法检测结直肠癌患者癌组织和癌旁组织(距肿瘤边缘≥2 cm)中IL-35的表达。采用酶联免疫吸附试验检测结直肠癌患者和正常对照者血清IL-35水平。采用体外诱导Th1分化实验观察IL-35对Th1分泌IL-17A和IFN-γ的影响。结果与正常对照组比较,结直肠癌组Th1%显著降低(P=0.019),Th17%显著升高(P<0.001)。结直肠癌组Th1%与Th17%的r2值(0.393 4)与正常对照组(0.041 0)比较差异有统计学意义(P=0.007)。基于KaplanMeierPlotter数据库的分析结果显示,IFN-γmRNA低表达是结直肠癌患者总生存期缩短的危险因素[风险比(HR)=0.74,95%可信区间(CI)为0.58~0.94,P=0.013],IL-17A mRNA高表达是结直肠癌患者总生存期缩短的危险因素(HR=1.26,95%CI为1.02~1.59,P=0.020)。结直肠癌患者癌组织IL-35表达显著高于癌旁组织(P<0.001)。Ⅰ~Ⅱ期(早期)和Ⅲ~Ⅳ期(晚期)结直肠癌患者血清IL-35水平均显著高于正常对照者(P<0.05)。体外诱导Th1分化实验结果显示,IL-35可降低Th1中IFN-γ表达,提高IL-17A表达。结论 结直肠癌患者外周血Th1和Th17呈异常变化,且IL-35表达增加。高表达的IL-35可降低Th1中IFN-γ表达,提高IL-17A表达。

血清白细胞介素-35表达水平与前列腺癌全雄激素阻断治疗预后的相关性分析

目的 探究血清白细胞介素-35(IL-35)表达水平与前列腺癌全雄激素阻断(MAB)患者预后的相关性。方法 收集2017年4月至2020年4月在本院接受MAB治疗的60例前列腺癌患者为研究对象。测定患者治疗前血清IL-35水平。依据随访结果,用受试者工作特征(ROC)曲线确定IL-35最佳截断值,并以此将纳入者分为低IL-35组和高IL-35组。比较2组病理特征,Kaplan-Meier生存曲线和Cox回归模型分析血清IL-35与患者预后的相关性。结果 以3年随访是否死亡为结局绘制ROC曲线,所得IL-35最佳截断值147.73 pg/ml[曲线下面积(95%CI)=0.667(0.517,0.818,P<0.001)],并以此为临界点将患者分为低IL-35组(<147.73 pg/ml)和高IL-35组(≥147.73 pg/ml)。高IL-35组中Gleason评分>7分(58%和29%)、肿瘤T分期中T4期(74%和44%)和伴淋巴结转移(68%和39%)者占比均显著高于低IL-35组(P<0.05)。KaplanMeier生存曲线显示,低IL-35组患者无进展生存(PFS)[(32±4)个月和(23±4)个月]和总生存[(32±3)个月和(24±4)个月]情况均优于高IL-35组患者(χ^(2)=11.988、8.617,P<0.05);单因素和多因素Cox回归模型分析显示,血清IL-35水平[HR值(95%CI)=1.044 (1.017,1.073)]、[HR值(95%CI)=1.035(1.006,1.064)];Gleason评分[HR值(95%CI)=2.218 (1.449,6.307)]、[HR值(95%CI)=3.056 (1.649,9.447)];临床T分期[HR值(95%CI)=2.056(1.553,5.984)]、[HR值(95%CI)=1.900(1.237,11.622)]和伴淋巴结转移[HR值(95%CI)=2.415(2.084,7.445)]、[HR值(95%CI)=4.147(1.081,15.910)]均是影响MAB治疗的前列腺癌患者无进展生存期(PFS)和总生存情况的独立危险因素(P<0.05)。结论 治疗前血清IL-35水平异常升高是影响前列腺癌患者MAB治疗预后的独立危险因素。

重组人白细胞介素35早期干预对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的保护作用研究

目的探讨重组人白细胞介素35(interleukin 35,IL-35)早期干预对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的保护作用。方法采用随机数字表法将40只雄性SD大鼠分成正常组、致伤组、对照组和治疗组,每组各10只(其中每个观察点5只)。正常组大鼠不作处理,其余3组大鼠麻醉后经暴露的气管滴注10 mg/kg LPS建立大鼠ALI模型。造模后,治疗组大鼠尾静脉注射重组人IL-352μg,每天给药1次,连续给药3天;对照组大鼠尾静脉注射同等剂量无菌生理盐水,每天1次,连续3天;正常组和致伤组大鼠不进行药物干预。观察各组大鼠干预后第1、3天肺组织病理学变化及评分、动脉血氧分压(arterial partial pressure of oxygen,PaO_(2))和二氧化碳分压(partial pressure of carbon dioxide,PCO_(2))变化。采用酶联免疫吸附分析(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测大鼠肺组织匀浆上清液中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)和白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)含量。结果与正常组比较,致伤组、对照组和治疗组大鼠建模后第1天的肺组织病理评分均显著升高、PaO_(2)显著降低(P均<0.05);治疗组大鼠第3天肺组织病理评分显著低于致伤组和对照组、PaO_(2)显著高于致伤组和对照组,致伤组、对照组和治疗组大鼠第3天PCO_(2)较正常组显著升高(P均<0.05)。与正常组相比,致伤组、对照组和治疗组大鼠第1、3天TNF-α、IL-10含量明显升高(P均<0.05);治疗组大鼠第1、3天TNF-α含量明显低于对照组(P均<0.05),第1天IL-10含量明显低于致伤组和对照组,但第3天IL-10含量明显高于致伤组和对照组(P均<0.05)。结论重组人IL-35具有减轻LPS致大鼠肺损伤的作用,可降低肺损伤组织TNF-α水平,提高IL-10水平的作用。

术前NLR、IL-35及MTA2与前列腺癌患者术后复发及转移的相关性

目的探讨术前中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、白细胞介素-35(IL-35)及转移相关蛋白2(MTA2)对前列腺癌患者术后复发及转移的预测价值。方法选取2019年6月-2022年6月在河北北方学院附属第二医院接受手术治疗的160例老年前列腺癌患者作为研究对象,根据术后有无复发或转移分为发生组(68例)和未发生组(92例)。比较两组一般资料,采用logistic回归分析NLR、IL-35、MTA2与前列腺癌患者术后复发及转移风险的相关性,ROC曲线评估各指标对前列腺癌患者术后复发及转移风险的预测价值。结果两组TNM分级、Gleason评分,NLR、IL-35及MTA2比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示,在校正多个混杂因素后,NLR、IL-35水平及MTA2评分均是前列腺癌患者术后复发及转移发生的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线显示,NLR、IL-35水平及MTA2评分对前列腺癌患者术后复发及转移具有一定的预测价值。结论NLR、IL-35水平及MTA2评分对前列腺癌术后发生复发及转移具有一定的预测价值,对早期前列腺癌术后复发及转移的高危患者的判断和改进患者预后具有重要的临床价值。

射干麻黄汤辨证加减联合舒利迭治疗儿童支气管哮喘冷哮的疗效及血清IL-17、IL-35水平变化

目的探讨儿童支气管哮喘(BA)冷哮采用射干麻黄汤辨证加减联合舒利迭治疗的疗效及血清白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-35(IL-35)水平变化.方法选取2022年11月—2023年10月聊城市第二人民医院收治的120例BA急性发作患儿为研究对象,按照随机数字表法将其分为研究组与对照组,各60例.对照组采用舒利迭治疗,研究组采用射干麻黄汤辨证加减联合舒利迭治疗.对比两组患者的临床疗效、肺功能指标及炎症因子水平.结果研究组治疗总有效率为95.00%,高于对照组的81.67%,差异有统计学意义(P<0.05).治疗前,两组第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、肺活量(FVC)、呼气高峰流量变异率(PEFR)比较,组间差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,研究组FEV_(1)、FVC、PEFR均大于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05).治疗前,两组血清IL-17、IL-35水平比较,组间差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,研究组IL-17水平为(162.03±22.68)pg/mL,低于对照组的(182.67±29.76)pg/mL,IL-35水平为(25.03±4.15)pg/mL,高于对照组的(22.67±4.21)pg/mL,组间差异有统计学意义(P<0.05).结论射干麻黄汤辨证加减联合舒利迭应用于儿童BA治疗中,能够提高临床疗效,改善肺功能指标,降低IL-17水平,提高IL-35水平.

KIH结构在人白介素-35体外重组表达中的应用

白细胞介素35(interleukin-35,IL-35)是非常重要的免疫抑制性细胞因子,被证实在多种疾病的免疫应答中发挥作用。本研究通过克隆人IL-35基因编码序列,构建单亚基表达载体pXC17.4-p35和pcDNA3.1(+)-EBI3,共转染CHO-K1细胞体外表达IL-35,经检测未发现p35亚基与EBI3亚基的结合。Knobs-into-Holes(KIH)可解决异源抗体重链错配的问题,因此,在原始序列的基础上融合KIH结构构建表达载体pXC17.4-p35-Fch和pcDNA3.1(+)-EBI3-Fck来表达KIH-IL-35重组融合蛋白质;同时交换2个亚基的表达载体来验证不同表达载体对KIH-IL-35表达量的影响。经过多种蛋白质检测方法的分析,显示KIH-IL-35结构的正确表达率明显提高。大量表达后对KIH-IL-35进行亲和纯化,采用ELISA法检测纯化后的KIH-IL-35与糖蛋白130(gp130)分子的结合活性,结果表明,KIH-IL-35与gp130的结合呈浓度依赖性。采用细胞活性检测方法检测KIH-IL-35与M1细胞的间接活性,结果表明,M1细胞的抑制率与KIH-IL-35的浓度呈剂量依赖性增长。此外,本研究成功建立了一种利用激活的人外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)对IL-35进行活性检测的方法,结果显示,激活的PBMCs与KIH-IL-35的浓度呈剂量依赖性增长。总之,本研究利用KIH-IL-35模型,提高了重组人IL-35的正确表达率,并验证其在体外的高活性,为IL-35的研究及类似异源二聚体细胞因子的重组表达提供新思路。

半乳糖凝集素-3、白细胞介素35、白细胞介素17在支气管哮喘病儿血清中的水平及与肺功能的相关性

目的探究半乳糖凝集素-3(Galectin-3)、白细胞介素35(IL-35)及白细胞介素17(IL-17)在支气管哮喘病儿血清中的水平及临床意义。方法选取2021年8月至2022年8月徐州医科大学附属医院诊治的哮喘病儿77例,分为轻中度哮喘急性发作组(40例)及哮喘缓解组(37例),选择同期徐州医科大学附属医院健康体检儿童26例为对照组。采用酶联免疫法测定血清Galectin-3、IL-35、IL-17水平。应用肺功能仪进行肺功能检查,记录第1秒用力呼气容积/1 s用力呼气量预计值百分比(FEV1%)、1 s用力呼气量占用力肺活量比值(FEV1/FVC)、最大呼气50%瞬间流量(FEF50%),最大呼气75%瞬间流量(FEF75%)指标。结果轻中度急性发作组Gal-3、IL-17水平分别为(50.89±7.90)ng/L、(60.95±8.14)ng/L,明显高于缓解组的(33.93±9.49)ng/L、(42.94±6.67)ng/L及对照组的(24.8±5.84)ng/L、(35.45±8.68)ng/L,差异有统计学意义(P<0.05)。轻中度急性发作组IL-35水平为(101.28±9.44)ng/L明显低于缓解组(125.91±7.79)ng/L及对照组(148.83±8.09)ng/L,差异有统计学意义(P<0.05)。轻中度急性发作组FEV1%、FEV1/FVC水平分别为(67.22±12.11)%、(67.56±12.60)%明显低于缓解组的(95.4±10.63)%、(95.58±10.95)%和对照组的(108.21±10.49)%、(108.9±10.03)%,均差异有统计学意义(P<0.05),FEF50%、FEF75%在轻中度急性发作组分别为(46.22±11.80)%、(38.42±9.94)%,与缓解组的(50.11±11.53)%、(42.76±12.39)%比较,差异无统计学意义(P>0.05),与对照组(91.75±12.43)%、(93.84±12.07)%比较差异有统计学意义(P<0.05)。Gal-3与IL-17呈正相关(P<0.05),IL-35与IL-17呈负相关(P<0.05),Gal-3、IL-17与FEV1%、FEV1/FVC、FEF50%、FEF75%呈负相关(P<0.05),IL-35与FEV1%、FEV1/FVC、FEF50%、FEF75%呈正相关(P<0.05)。结论哮喘病儿Gal-3表达上调,IL-35表达下调,引起IL-17促表达增强、表达抑制作用减弱,IL-17水平升高从而导致气道炎症加重,可能是轻中度哮喘急性发作的发病机制之一;亦可能是哮喘缓解期部分病儿小气道炎症持续存在的可能机制之一。Gal-3、IL-35、IL-17水平测定有助于预测轻中度哮喘急性发作风险及指导调整吸入糖皮质激素(ICS)用药。

血清白细胞介素-35、乳酸脱氢酶在骨髓增生异常综合征120例中的临床意义

目的分析血清白细胞介素(IL)-35、乳酸脱氢酶(LDH)在骨髓增生异常综合征(MDS)中的临床意义,为探究MDS的潜在靶点提供参考依据。方法选取青岛市胶州中心医院2019年5月至2020年5月收治的128例MDS病人作为研究对象,所有病人均根据指南在医院接受个体化治疗,于治疗6个月疗程时评估病人治疗效果,分为治疗失败组(n=28)和治疗有效组(n=92)。于治疗前检测研究相关指标[白细胞(WBC)、血小板(PLT)、中性粒细胞绝对计数(ANC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、IL-35、LDH]并统计病人临床资料,分析血清IL-35、LDH与MDS病人治疗效果的关系,并检验IL-35、LDH联合预测MDS病人治疗失败的最佳阈值。结果128例MDS病人随访期间共剔除8例,120例MDS病人,治疗6个疗程时,治疗失败占23.33%(28/120),治疗有效组占76.67%(92/120);治疗失败组WHO分型预后积分系统(WPSS)评分、修订的国际预后积分系统(IRSS-R)均高于治疗有效组,较高危病人占比多于治疗有效组(P<0.05);治疗失败组全血ANC,血浆Hb、PLT低于治疗有效组,血清IL-35、LDH表达量高于治疗有效组(P<0.05)。经logistics回归分析显示,MDS病人治疗失败与全血ANC,血浆Hb、PLT低表达,血清IL-35、LDH高表达有关(P<0.05)。绘制ROC曲线图发现,血清IL-35、LDH单独及联合预测MDS病人治疗失败风险截断值分别为129.70 ng/L、324.28 U/L。限制性立方样条分析显示,血清IL-35、LDH与MDS病人治疗失败风险呈线性剂量反应关系。结论血清IL-35、LDH水平与MDS病人治疗失败风险呈线性剂量反应关系,检测血清IL-35、LDH有助于预测MDS病人治疗失败风险。

血清IL-35、SDF-1在儿童腹型过敏性紫癜诊断中的临床意义

目的 探讨血清白细胞介素(IL)-35、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)在儿童腹型过敏性紫癜(HSP)诊断中的临床意义。方法 选取2018年2月至2020年2月在该院治疗的160例早期HSP患儿作为研究对象,根据是否为腹型HSP分为腹型HSP组(80例)和其他类型HSP组(80例)。根据腹型HSP患儿早期病情程度分为轻度组26例、中度组26例和重度组28例。选取同期80例健康儿童作为对照组。采用酶联免疫吸附试验检测血清IL-35和SDF-1水平。采用Pearson相关分析腹型HSP患儿血清IL-35水平与SDF-1的相关性;采用多因素Logistic回归分析腹型HSP发生的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清IL-35和SDF-1对腹型HSP的诊断价值。结果 腹型HSP组血清IL-35水平明显低于其他类型HSP组、对照组(P<0.05),腹型HSP组血清SDF-1水平明显高于其他类型HSP组、对照组(P<0.05)。随着腹型HSP患儿病情程度的加重,血清IL-35水平明显降低(P<0.05),SDF-1水平明显升高(P<0.05)。腹型HSP患儿血清IL-35水平与SDF-1呈负相关(r=-0.594,P<0.05)。IL-35水平升高是发生腹型HSP的保护因素(P<0.05),SDF-1水平升高是发生腹型HSP的危险因素(P<0.05)。血清IL-35、SDF-1以及二者联合诊断腹型HSP的曲线下面积(AUC)分别为0.783、0.765、0.805,二者联合诊断的AUC优于血清IL-35、SDF-1单独诊断。结论 腹型HSP患儿血清IL-35水平降低,SDF-1水平升高,血清IL-35和SDF-1联合检测可更好地诊断腹型HSP。

血清RANTES、IL-35对儿童急性阑尾炎伴穿孔的辅助诊断价值

目的探讨血清T淋巴细胞激活性低分泌因子(RANTES)、白细胞介素-35(IL-35)对儿童急性阑尾炎伴穿孔的辅助诊断价值。方法选取2021年8月至2023年8月在唐山市丰南区医院就诊的132例急性阑尾炎患儿作为研究对象,根据是否发生阑尾穿孔分为穿孔组43例,未穿孔组89例。采用酶联免疫吸附试验检测血清RANTES、IL-35水平。采用Pearson相关分析血清RANTES、IL-35水平之间的相关性;采用多因素Logistic回归分析急性阑尾炎患儿发生阑尾穿孔的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清RANTES、IL-35对急性阑尾炎患儿阑尾穿孔的诊断效能。结果与未穿孔组相比,穿孔组的白细胞计数(WBC)、血小板计数(PLT)、中性粒细胞计数(NEUT)明显升高(P<0.05)。与未穿孔相比,穿孔组的血清RANTES水平明显升高(P<0.05),IL-35水平明显降低(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,急性阑尾炎患儿血清RANTES水平与IL-35水平呈负相关性(r=-0.474,P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,血清RANTES水平、WBC、NEUT、PLT升高是急性阑尾炎患儿发生阑尾穿孔的危险因素(P<0.05),IL-35水平升高是急性阑尾炎患儿发生阑尾穿孔的保护因素(P<0.05)。血清RANTES、IL-35联合诊断急性阑尾炎患儿阑尾穿孔的曲线下面积(AUC)优于RANTES、IL-35单独诊断的AUC(P<0.05)。结论急性阑尾炎患儿血清RANTES水平升高及IL-35水平降低与阑尾穿孔有关,二者联合检测可更好地辅助诊断急性阑尾炎患儿是否发生阑尾穿孔。

辅助T细胞17、白细胞介素-17、白细胞介素-35与特应性皮炎的相关性分析

目的探讨辅助T细胞17(Th-17)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-35(IL-35)与特应性皮炎的相关性。方法选取2021年9月至2022年12月于江西省皮肤病专科医院收治的80例特应性皮炎患儿作为研究对象,将其纳为观察组,根据皮炎严重程度采用特应性皮炎评分指数将其划分为重度、中度、轻度3个亚组,另选取同时期80名健康体检儿童为对照组,检测两组Th-17、IL-17、IL-35水平,比较不同病情程度患儿Th-17、IL-17、IL-35水平的差异,进行单因素及多因素logistic分析,评估影响特应性皮炎病情的独立因素,展开Pearson相关性分析,评价三项指标与病情的相关性。结果观察组的Th-17、IL-17水平高于对照组,IL-35水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。单因素分析结果显示,轻度皮炎组、中度皮炎组、重度皮炎组的性别、年龄、住院时间比较,差异无统计学意义(P>0.05);但三组的Th-17、IL-17、IL-35水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic分析结果显示,Th-17、IL-17、IL-35水平均为特应性皮炎的独立影响因素(β=1.157、2.143、1.793,OR=3.180、8.525、6.007,95%CI=1.166~8.676、1.157~62.818、1.064~33.909,P<0.05),且特应性皮炎病情严重程度与Th-17、IL-17水平呈正相关,与IL-35水平呈负相关(r=0.404、0.402、-0.405,P<0.05)。结论Th-17、IL-17、IL-35水平均为儿童影响特应性皮炎病情程度的独立影响因素,且三项指标与特应性皮炎病情严重程度之间存在一定相关性,当临床出现Th-17、IL-17水平下降或IL-35水平升高时,需警惕患儿免疫功能水平降低及病情进展,及时采取针对性干预措施。

NETs、IL-35及凝血四项在新生儿呼吸窘迫综合征患儿中的变化及与预后的关联性

目的探究中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)、白细胞介素(IL)-35及凝血四项在新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS)患儿中的变化及与预后的关联性。方法回顾性纳入2021年2月至2023年2月在恩施土家族苗族自治州中心医院接受治疗的NRDS患儿87例作为研究组,并随机选取87名健康新生儿作为对照组,比较组间受试对象的NETs[游离DNA(cf-DNA)、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、IL-35及凝血四项指标[凝血活酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(FIB)]情况。并对研究组患儿进行随访,将21例住院期间发生死亡的患儿纳入死亡组,其他66例患儿纳入生存组,分析组间NETs、IL-35及凝血四项指标情况,并采用受试者操作特征(ROC)曲线分析NETs指标及IL-35水平对患儿预后死亡的预测效能。结果研究组儿童的cf-DNA、NE、IL-6、TNF-α水平分别为(144.26±33.12)ng/mL、(325.15±18.26)pg/mL、(41.12±5.16)pg/mL、(41.02±5.11)pg/mL,均高于对照组,研究组的IL-35水平为(55.79±11.06)mg/L,低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组儿童的APTT、PT、FIB水平分别为(34.33±5.12)s、(18.45±4.15)s、(3.56±0.67)g/L,均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),组间TT水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。死亡组患儿的cf-DNA、NE、IL-6、TNF-α水平分别为(161.12±18.46)ng/mL、(344.26±23.12)pg/mL、(43.55±3.11)pg/mL、(45.12±6.12)pg/mL,均高于生存组,死亡组IL-35水平为(33.79±6.11)mg/L,低于生存组,差异均有统计学意义(P<0.05)。生存组和死亡组患儿组间TT、APTT、PT、FIB水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。经ROC曲线分析,可知cf-DNA、NE、IL-6、TNF-α、IL-35均对患儿的预后死亡具有较高的预测价值,其曲线下面积(AUC)值分别为0.799、0.830、0.983、0.752、0.924,预测效能较高(P<0.05)。结论NETs、IL-35及凝血四项在NRDS患儿中具有显著变化,且NETs指标及IL-35水平对患儿预后的预测效能较高,可作为评估NRDS患儿预后的重要生物标志物。

冠心病患者血清转化因子-β1、白细胞介素-35水平与冠状动脉病变程度的相关性研究

目的:观察冠心病患者血清转化因子-β1、白细胞介素-35水平与冠状动脉病变程度的相关性。方法:选取2018年7月—2021年12月潍坊市第二人民医院心内科收治的患者125例作为研究对象,根据冠状动脉造影结果分为冠心病组与对照组(无冠心病),并根据冠状动脉病变程度将冠心病组分为单支血管病变组、双支血管病变组、多支血管病变组。比较各组血清转化因子-β1和白细胞介素-35水平。结果:冠心病组血清转化因子-β1、白细胞介素-35水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。冠心病组各亚组血清转化因子-β1、白细胞介素-35水平比较,单支血管病变组>双支血管病变组>多支血管病变组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:血清转化因子-β1、白细胞介素-35参与冠心病发生发展,且与冠状动脉狭窄严重程度密切相关,可作为评价冠状动脉狭窄严重程度的参考指标。

白细胞介素-35对肝细胞癌患者CD4^(+)CD25^(+)CD127^(dim/-)调节性T细胞的调控作用

目的 观察肝细胞肝癌(HCC)患者外周血白细胞介素-35(IL-35)水平和CD4^(+)CD25^(+)CD127^(dim/-)调节性T细胞(Treg)比例,评估IL-35对Treg数量和功能的影响。方法 共有51例HCC患者和25例对照者,分离外周血单个核细胞(PBMC)和血浆,实时定量PCR法检测PBMC中IL-35亚基mRNA相对表达量,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测外周血IL-35水平,流式细胞术检测PBMC中CD4^(+)CD25^(+)CD127^(dim/-)Treg比例。使用重组人IL-35(1 ng/ml)刺激HCC组PBMC 24 h,观察Treg比例和EBI3、IL-12p35 mRNA相对表达量的变化。分选17例HCC患者的Treg,经重组人IL-35刺激后与自体PBMC共培养48 h,通过检测细胞增殖和细胞因子表达评估IL-35对Treg功能的影响。组间比较采用t检验或配对t检验。结果 HCC组血浆IL-35水平显著高于对照组[(1024±218.0)pg/ml比(297.6±77.78)pg/ml,t=16.12,P<0.0001)],HCC组PBMC中EBI3和IL-12p35 mRNA相对表达量均显著高于NC组(P<0.0001)。HCC组CD4^(+)CD25^(+)CD127^(dim/-)Treg比例显著高于对照组[(6.35±1.46)%比(4.55±0.90)%,t=5.641,P<0.0001)],HCC组中CD4^(+)CD25^(+)CD127^(dim/-)Treg比例与血浆IL-35水平呈显著正相关(γ=0.400,P=0.0036)。HCC组PBMC经IL-35刺激后CD4^(+)CD25^(+)CD127^(dim/-)Treg比例较无IL-35刺激升高(P=0.041),EBI3和IL-12p35 mRNA相对表达量亦升高(P<0.001)。HCC患者纯化的CD4^(+)CD25^(+)CD127^(dim/-)Treg经IL-35刺激后,免疫检查点受体表达升高(P<0.05),抑制自体PBMC增殖的能力增强,共培养系统中细胞数量减少(P=0.023)。IFN-γ分泌水平在经IL-35刺激的Treg中显著降低(P=0.0002),而IL-10和IL-35分泌水平在经IL-35刺激的Treg中显著升高(P<0.05)。结论 HCC患者中IL-35水平升高,增强Treg免疫抑制活性。

IL-35亚基EBI3、P35对系统性硬化症小鼠肺部和皮肤炎症及肺纤维化的影响

目的:研究白细胞介素(IL)-35亚基对系统性硬化症(SSc)小鼠肺部和皮肤炎症及肺纤维化的影响。方法:将24只雌性BALB/c小鼠随机分为4组:正常对照组、SSc模型组、SSc+EB病毒诱导的基因3抗体(SSc+EBI3 mAb)组和SSc+IL-12A P35抗体(SSc+P35 mAb)组,除正常对照组外,其余各组小鼠注射博来霉素构建SSc模型。造模后,SSc+EBI3 mAb组和SSc+P35mAb组分别腹腔注射100μL的EBI3 mAb、P35 mAb。采用苏木精—伊红(HE)染色观察小鼠皮肤和肺组织炎症病理改变,Masson染色观察肺纤维化程度,免疫组化法检测皮肤和肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清IL-35、IL-6、IL-10水平。结果:与对照组相比,SSc模型组小鼠皮肤厚度增加,肺纤维化评分、皮肤和肺组织炎症评分、血清IL-35水平及皮肤和肺组织α-SMA表达水平均升高,血清IL-10水平降低(均P<0.05)。与SSc模型组比较,SSc+EBI3 mAb组和SSc+P35 mAb组小鼠皮肤厚度增加,血清IL-10水平及皮肤、肺组织α-SMA表达水平升高,血清IL-35水平降低(均P<0.05);SSc+P35 mAb组小鼠肺纤维化评分较SSc模型组升高(P<0.05)。与SSc+EBI3 mAb组相比,SSc+P35 mAb组小鼠血清IL-10水平升高(P<0.05)。结论:IL-35可能通过EBI3和P35亚基抑制SSc小鼠模型皮肤和肺部的纤维化病变,而对炎症无明显作用,P35亚基在肺纤维化中的作用更明显。

下调IL35通过上调自噬相关蛋白表达而抑制肝细胞癌侵袭和迁移

目的探讨白细胞介素35(interleukin 35,IL35)在肝癌中的表达及其临床意义、潜在的分子机制。方法收集手术确诊的肝细胞肝癌和癌旁组织40对。采用RT-qPCR和Western blot检测IL35在肝癌和癌旁组织中的表达,并分析IL35与各临床指标的相关性。Western blot检测IL35在肝癌细胞中的表达。慢病毒转染下调IL35。CCK-8和集落形成检测细胞增殖,Transwell实验检测侵袭和迁移,Western blot检测细胞自噬和EMT相关指标。结果IL35高表达于肝癌组织中(P<0.01);与HL7702肝细胞相比,IL35蛋白表达在Hep3B、Huh7、SMMC7721、Bel7402细胞中升高,且Hep3B表达最高(P<0.01);高表达与血管侵犯相关(P=0.0033);Transwell实验表明下调L35能有效抑制肝癌细胞侵袭和转移(P<0.01);CCK8和平板克隆实验表明,下调IL35能有效抑制肝癌细胞增殖(P<0.01);Western blot结果显示,下调IL35能促进LC3BII、Beclin1表达,抑制p62表达(P<0.01),同时促进E-cadherin表达并抑制N-cadherin、Vimentin的表达(P<0.01)。结论IL35高表达于肝细胞肝癌组织和肝癌细胞中,其表达与肝癌的血管侵犯相关;下调IL35能通过诱导自噬达到抑制肝癌细胞的侵袭和迁移的目的。

白细胞介素-35和叉头样转录因子3在大鼠根尖周炎中的表达

目的:观察大鼠实验性根尖周炎中白细胞介素-35(interleukin-35,IL-35)与叉头样转录因子3(foxhead box p3,Foxp3)的动态表达情况,探讨IL-35在根尖周炎中的作用。方法:选取40只SPF级SD大鼠,随机分为5组,单侧下颌第一磨牙开髓进行根尖周炎造模,分别于术后0、7、14、21、28 d各随机处死一组,下颌骨拍摄X线片,观察根尖周变化情况。取下颌第一磨牙根尖周组织进行苏木精-伊红染色(HE)观察其组织病理变化。实时荧光定量PCR反应(real-time qPCR,RT-qPCR)动态检测根尖周病损组织中IL-35和Foxp3 mRNA的表达情况。结果:X线和HE染色显示随着牙髓暴露时间的延长,根尖部炎症程度逐渐加重,待髓腔开放21~28 d时炎症则趋于稳定,从临床表现和组织病理学两方面证实了大鼠根尖周炎造模成功。RT-qPCR结果显示:IL-35和Foxp3 mRNA相对表达量在术后不同时期均呈波动性升高趋势(P<0.01),术后0~7 d迅速上升,7~21 d表达量呈下降趋势(P<0.05),21~28 d又呈上升趋势(P<0.05);Pearson相关分析显示:IL-35mRNA与Foxp3mRNA相对表达量呈正相关关系(r=0.609,P<0.05)。结论:IL-35在大鼠根尖周炎中的表达量与炎症程度成反比,可能通过调控Treg的表达参与根尖周炎的发生发展。

IL-35对sCD40L刺激后的人脐静脉血管内皮细胞黏附功能的影响

目的 探讨白细胞介素(IL)-35对可溶性CD40配体(sCD40L)刺激后血管内皮细胞黏附功能的影响。方法 选取2020年1月至12月于滨海县人民医院诊治的30例下肢深静脉血栓急性期患者(DVT组)和30例健康体检者(HC组)。采集外周静脉血,ELISA检测血清IL-35、sCD40L、血管细胞间黏附分子(VCAM-1)、细胞间黏附分子(ICAM-1)、P-选择素和血管性血友病因子(vWF)的水平。体外培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs),分为对照组、sCD40L组和IL-35组。ELISA检测细胞培养上清液中VCAM-1、ICAM-1、P-选择素和vWF的水平;Western blot检测细胞VCAM-1、ICAM-1、P-选择素和vWF蛋白的表达;免疫荧光法检测血小板和外周血单个核细胞对HUVECs的黏附。结果 DVT组血清中IL-35表达显著低于对照组(P<0.05),sCD40L、VCAM-1、ICAM-1、P-选择素和vWF的表达显著高于对照组(P<0.05)。体外实验表明,IL-35能显著抑制sCD40L刺激后HUVECs VCAM-1、ICAM-1、P-选择素和vWF的表达(P<0.05),且抑制血小板和外周血单个核细胞对HUVECs的黏附。结论 IL-35能降低sCD40L刺激后HUVECs的黏附功能,其可能对DVT患者血栓形成有抑制作用。