IL-6对M1型巨噬细胞向肿瘤相关M2型巨噬细胞转化过程的诱导作用

目的共培养小鼠M1型巨噬细胞RAW264·7与乳腺癌细胞4T1,观察白介素6(IL-6)在M1型巨噬细胞向肿瘤相关M2型巨噬细胞转化过程中的作用。方法实验共分为以下3组:A组(4T1细胞),B组(RAW264·7细胞),C组(RAW264·7与4T1以1∶4比例混合培养)。流式细胞技术检测M2型巨噬细胞比例,随后加入IL-6特异性抑制剂激活素A(ACTA,25μg/ml)或重组IL-6(rIL-6,10μg/ml)后再行检测。RT-PCR检测M1、M2型巨噬细胞功能相关细胞因子及IL-6、IL-6Rα的mRNA表达量。ELISA法检测3组细胞上清中IL-6的含量,随后改变两种细胞的混合比例后再行检测。结果RAW264·7和4T1细胞共培养后,M2型巨噬细胞比例显著增加,添加ACTA后该比例显著下降,而添加rIL-6后该比例增加。与B组比较,C组的M2型巨噬细胞相关细胞因子(CCL22、CCL2、YM1、PDGF-c、HIMP、MMP-9、IL-10)mRNA表达水平明显增高,M1型巨噬细胞相关因子(IL-12、IL-15、IL-18)mRNA表达水平明显降低。IL-6mRNA在A组呈微量表达,在B组无表达,在C组表达明显增高,而IL-6RαmRNA在3组中均呈高表达。与A、B组比较,C组细胞上清液中IL-6含量明显增加(P均<0·05);以不同比例将两种细胞混合后发现RAW264·7细胞数量的改变显著影响了共培养细胞上清中IL-6的水平。结论将4T1和RAW264·7细胞共培养后,前者能促进后者分泌IL-6,并诱导其向肿瘤相关M2型巨噬细胞转化。IL-6在转化过程中发挥重要作用,阻断其作用可以遏制转化。