低浓度的哇巴因引起豚鼠心室肌细胞内钙增高的可能途径

目的观察哇巴因（ouabain，OUA）对豚鼠心室肌细胞内游离钙浓度（[Ca^2＋]i）的影响。方法酶解分离豚鼠心室肌细胞，负载Flu03-AM，激光共聚焦显微镜术测定单个心室肌细胞[Ca^2＋]。的荧光密度，结果用相对荧光强度（FI—FI0）／FI0（％）表示，其中，FI0：给药前的荧光密度值，FI：给药后的荧光密度值。结果在正常台氏液及无钙台氏液中，OUA（1×10^-9-1×10^-6mol·L^-1）浓度依赖性地升高细胞内钙浓度，在正常台氏液分别为16．7±6．8（P〈0.01）、26.0±4.7（P〈0.01）、183.0±101．0（P〈0.01）、295.0±172.0（P〈0.01），而在无钙台氏液中OUA升高[Ca^2＋]，不如在正常台氏液中，分别为9．19±4、73（P〈0.05）、20.75±5、2（P〈0.05）、85.79±64.7（P〈0.05）、231.0±26．0（P〈0.05）。肌浆网钙通道抑制剂理阿诺碱Ryanodine（1×10^-5mol·L^-1）可部分抑制正常台氏液时OUA的效应5、3±2、1（P〈0.01）。在无钠无钾台氏液中，OUA（1×10^-9-1×10^-6mol·L^-1）对心室肌细胞[Ca^2＋]．的影响分别为16.5±6.5、25.0±5.0、162．0±45．0.280．0±96.0与正常台氏液比较无差别（P〉0．05）。蛋白酪氨酸激酶抑制剂三羟异黄酮（genistein，GST；1、10、50、100μmol·L^-1）可浓度依赖性地抑制正常台氏液中的OUA效应，分别为17．5±3．1、14.2±8.9、0.8±7．6（P〈0.05）、-1．9±6．7（P〈0．01）。L-型钙通道激动剂Bay K8644，肌浆网钙通道开放剂Ryanodine（1×10^-7mol·L^-1）在正常台氏液中均可提高[Ca^2＋]；为13．3±3.2（P〈0．05）、6．4±5.6（P〈0．05）。三羟异黄酮可取消其效应为-13．0±21．0（P〈0．01）、-1.6±5．9（P〈0.01）。结论低浓度的OUA升高豚鼠心室肌细胞内游离钙浓度，此作用与其开放钙通道及促进内钙释放有关，且信号转导通过此二途径起作用。