一种中药单体小复方对变应性鼻炎模型小鼠的免疫调节作用

目的:探讨3种中药单体淫羊藿苷、黄芩苷、黄芪甲苷经优化配比组成的小复方对变应性鼻炎模型小鼠的免疫调节作用。方法:采用卵清蛋白腹腔注射与滴鼻结合的方法建立变应性鼻炎小鼠模型,分离小鼠脾淋巴细胞后体外培养,并将细胞分为空白对照组、刀豆素A组、复方组3组,在不同时间点运用细胞增殖-毒性检测试剂盒连续观察各组细胞的增殖情况,流式细胞术检测各组细胞周期变化,荧光定量分析仪结合荧光探针Fluo-3检测细胞内游离钙离子浓度变化。结果:中药单体小复方可以有效抑制刀豆素A诱导的变应性鼻炎小鼠脾淋巴细胞增殖(P<0.01),且呈现出一定的时效关系,抑制率随时间的延长而增强,在48h达最大值。流式细胞术检测各组细胞的细胞周期变化发现,刀豆素A可以通过降低G0/G1期百分比,升高S期与G2/M期的百分比而促进细胞进入分裂期,复方组与刀豆素A组相比,则在4个时间点均可以升高G0/G1期比例,并降低S期与G2/M期的比例,作用在24h最显著(P<0.05或P<0.01)。荧光定量分析仪检测发现,前24h,刀豆素A诱导后的淋巴细胞荧光强度随时间延长而逐渐增强,而复方组可以明显抑制刀豆素A导致的荧光强度升高,降低细胞内游离钙离子浓度(P<0.01)。结论:中药单体小复方可以抑制刀豆素A诱导的变应性鼻炎模型小鼠脾淋巴细胞增殖,其作用机制可能为通过降低细胞内游离钙离子浓度,从而抑制细胞由G0/G1期进入S和G2/M期。

丹酚酸B镁抑制ATP和KCl诱导大鼠主动脉平滑肌细胞内钙的升高

目的 研究丹酚酸B镁（Magnesium lithospermate B，MLB）对去内皮离体血管舒缩反应以及对血管平滑肌细胞内游离钙浓度[Ca^2＋]i的影响。方法 去内皮大鼠胸主动脉血管环等张收缩实验和采用钙离子荧光指示剂Fluo-3，运用F-4500阳离子测定系统动态检测胸主动脉平滑肌细胞[Ca^2＋]i。结果 血管舒缩实验显示，无钙或常钙条件下MLB对血管基础张力均无作用。MLB 50～200μmol·L^-1预给药组抑制无钙条件下苯肾上腺素（PE）μmol·L^-1诱导的血管收缩以及常钙条件下KCl60mmol·L^-1诱导的血管收缩，并呈浓度相关性。而钙离子通道阻滞剂维拉帕米（Ver）10μnol·L^-1则完全阻断KCl诱导的血管收缩。在复钙实验中观察到，MLB50～200μmol·L^-1不仅抑制PE1μmol·L^-1“诱导的内钙依赖性血管收缩，而且对复钙后外钙依赖性的血管收缩也有抑制作用。细胞内钙测定实验表明。MLB预孵育的AVSMCs静息态[Ca^2＋]i没有变化。无钙条件下，MLB50、100和200μmol·L^-1抑制ATP20μmol·L^-1诱导内钙释放引起的[Ca^2＋]i升高，抑制率分别为17．4％、32．4％和61．1％，显示较好的浓度相关性。AVSMCs于常钙条件下用Thapsigargin耗竭钙库后，KCl60mmol·L^-1诱发外钙内流，引起[Ca^2＋]i升高，10μmol·L^-1的Ver则能完全阻断这种外钙内流。在MLB预给药组，KCl诱导的[Ca^2＋]；升高降低，抑制率分别为20．0％、32．8％和52．6％。结论 MLB能够抑制PE、高K^＋和复Ca^2＋诱导的血管收缩，并能抑制ATP和KCl诱导的血管平滑肌细胞内钙的升高，提示MLB对血管平滑肌细胞内钙的影响可能与抑制细胞内钙释放和电压依赖性钙通道有关。