Intracellular recording and morphology of tectal neurons activated by contralateral nucleus isthmi in toads

THE nucleus isthmi (NI) in lower vertebrates and its mammalian analogue, the nucleus para-bigeminalis, are all visual centres. They receive their tectal input ipsilaterally and project backipsilaterally in teleosts and birds, or bilaterally in amphibians and reptiles, as well as in mam-mals. It is well known that NI receives its visual excitation through the ipsilateral optic tec-tum (OT). NI mainly exerts inhibition on the ipsilateral OT in frogs.A recent study

大承气汤和大黄对豚鼠结肠带平滑肌细胞电活动的影响

应用本实验室建立的测量平滑肌细胞电活动的细胞内微电极记录方法。研究了大承气汤、大黄煎剂对豚鼠结肠带平滑肌细胞电活动的影响。结果表明,大承气汤、大黄均能促进细胞膜去极化,加快慢波电位发放,并能增加峰电位的发放频率。药物作用随浓度的增大而增强(浓度为1%时,P>0.05;浓度为10%、20%时,P<0.05)。大黄的作用比相同浓度的大承气汤的作用明显。提示大承气汤、大黄能直接增强肠管平滑肌细胞的电兴奋性,从而促进肠道收缩运动,这可能是药物泻下作用的一种细胞水平机理,其离子基础可能是药物降低了细胞膜上K^+通道电导。

P物质对GABA_A和GABA_B受体介导的DRG神经元膜反应的调制作用

实验在幼年大鼠ＤＲＧ标本上进行。应用细胞内记录观察了ＳＰ对ＧＡＢＡ反应的调制作用。结果证明：（１）单独滴加ＳＰ（５×１０（－６）－４×１０（－５）ｍｏｌ／Ｌ）或浴槽灌流ＳＰ（１０（－６）－５×１０（－６）ｍｏｌ／Ｌ）不引起膜电位的改变或仅有轻微的去极化，但却能使ＧＡＢＡ引起的去极化反应减小５０．８±２０．２％（±ＳＤ）（２０／３０）；（２）单独滴加ＳＰ可使多数受检细胞ＡＰＤ５０延长２８．７±９．１％（±ＳＤ）（１０／１８）；（３）在预加ＳＰ后，能使ｂａｃｌｏｆｅｎ所引起的ＡＰＤ５０缩短效应（２０．６±２．９％，±ＳＤ）完全消除（４／１２）或翻转成ＡＰＤ（５０）延长１９．３±８．９％（±ＳＤ）（８／１２）；（４）预加ＧＡＢＡＢ受体激动剂ｂａｃｌｏｆｅｎ（１０（－４）－１０（－３）ｍｏｌ／Ｌ）３０—９０ｓ后明显地抑制ｍｕｓｃｉｍｏｌ（１０－４－１０－３ｍｏｌ／Ｌ）引起的去极化反应，其抑制效应达５４．４±１８．８％（±ＳＤ）（１７／２０）。由于ＤＲＧ神经元的胞体通常可用来作为研究初级传入终末的模型，因而本文实验结果提示：介导伤害性刺激信息的Ｐ物质在背角的释放，可能作用于初级传入终末，从而产生对抗ＧＡＢＡ介导的突触?

白细胞介素对大鼠海马培养神经元膜电特性的影响

用细胞内微电极记录方法研究了重组人白细胞介素－１β（ｒｈＩＬ－１β）和重组人白细胞介素－２（ｒｈｉＬ－２）对分散培养的新生大鼠海马神经元膜电性质的影响。采用压力脉冲微量给药技术将白介素施加于所记录的细胞表面。结果发现：１００Ｕ／ｍｌ浓度的ｒｈＩＬ－１β使受作用的海马神经元超极化４．２０±１．８６ｍＶ；１００Ｕ／ｍｌ浓度的ｒｈＩＬ－２使５０％受作用的海马神经元去极化１１．１２±３．７１ｍＶ，并伴有强烈的自发放电反应，而１０００Ｕ／ｍｌ浓度的ｒｈＩＬ－２使１００％受作用的神经元超极化３．２５±０．６３ｍＶ，这些神经元的膜阻抗均无明显变化。本实验结果提示ｒｈＩＬ－１β和ｒｈＩＬ－２可显著影响体外培养海马神经元的膜兴奋性。

三七总皂苷抗大鼠心肌肥大的作用及其神经机制

目的 探讨三七总皂苷 (PNS)抗腹主动脉缩窄大鼠压力超负荷性心肌肥大的神经机制。方法 ①用腹主动脉缩窄法建立心肌肥大模型 ,将大鼠分为假手术对照组、腹主动脉缩窄组及低、中、高剂量组 ,3个剂量组分别每日腹腔注射5 0、10 0和 15 0mgPNS·kg-1。 3wk后处死大鼠检测全心重量/体重 (HW/BW )、左室重量指数 (LVI) ,左心室组织切片HE染色后测心肌纤维直径 (MD)。②细胞内生物电记录技术观察PNS对大鼠星状神经节 (SG)的快兴奋性突触后电位 (f EPSP)、膜电位、膜电阻及对外源性乙酰胆碱引起的膜除极化反应的影响。结果 ①高剂量组的HW /BW、LVI及MD显著低于缩窄组 ,P <0 0 1;中剂量组与缩窄组比较MD显著降低 ,P <0 0 5 ;低剂量组与缩窄组比较 ,HW/BW ,LVI和MD三项指标均无显著的变化。②PNS在 0 10～ 0 16g·L-1浓度范围内可使大鼠星状神经节f EPSP可逆性减小 ,PNS还可拮抗高钙对f EPSP的易化作用 ,但对膜电位、膜电阻及外源性ACh引起的膜除极反应无显著的影响。结论 PNS对f EPSP的抑制可能是其抗压力超负荷性心肌肥大的神经机制 ,而抑制作用则是通过突触前机制产生 ,且与拮抗Ca2 + 内流有关。

电生理学特性得到确定的大鼠脊髓背根神经节细胞内谷氨酸和P物质的共存

在离体灌流带脊髓和坐骨神经的标本上，对脊髓背根神经节（DRG）细胞的电生理学特性、对P物质（SP）受体激动剂的反应及谷氨酸（Glu）／SP共存的特点进行了研究。（1）对135个细胞进行了细胞内记录，并依纤维传导速度将其分为Aα／β（＞12m／s）和C（＜1．3m／s）两大类；它们的动作电位的快速后超极化（fAHP）有明显区别，C类的fAHP幅度小、时程长，Aα／β类的fAHP幅度大、时程短；（2）SP受体激动剂Sar－SP（10－6mol／L）诱导42％（5／12）的Aα／β细胞和80％（8／10）的C细胞发生去极化反应；（3）最后向给予SP受体激动剂的22个细胞内电泳biocytin，固定、切片后进行磷酸激活的谷氨酰胺酶（PAG）和SP免疫荧光组织化学染色并同时显示biocytin，观察到biocytin标记并呈PAG样和SP样阳性的三标细胞在Aα／β类为25％（3／12），C类为80％（8／10），两者差异显著（P＜0.05）。结果提示DRG中Aα／β细胞与C细胞的化学解剖和电生理特性不同，SP可能通过作用于节细胞上的自身受体易化冲动的发放。

大鼠初级听皮层神经元对声刺激反应的膜电位特征

目的探讨大鼠初级听皮层单个神经元对声刺激反应的膜电位特征。方法运用在体细胞内微电极记录技术观察麻醉大鼠初级听皮层单个神经元对声音刺激的细胞内反应,分析声音引发的各种兴奋性和抑制性反应的成分及其膜电位特征。结果在大鼠初级听皮层共记录到64个神经元,声音刺激引起其中33个神经元产生兴奋性听觉反应,24个产生抑制性反应,2个产生"on-off"双相听觉反应,其余5个神经元对声音刺激反应不明显。根据声音诱发的兴奋性突触后电位(EPSP)/抑制性突触后电位(IPSP)以及动作电位(AP)的特点,兴奋性听觉反应可分为4型:长时程EPSP型、短时程EPSP型、规律放电型、阈下EPSP型;抑制性听觉反应也可分为4型:AP-IPSP型、EPSP-IPSP型、IPSP型、AP-超极化型。声音诱发的IPSP的潜伏期(46.3±20.5)m s和上升相时程(10.1±4.4)m s显著长于EPSP[分别为(15.1±4.7)、(6.1±3.5)m s,P<0.05,P<0.01]。且"on-off"双相听觉反应的放电间隔与声音时长高度一致。结论大鼠初级听皮层神经元对相同自然声刺激可以产生多种类型的反应,且各型反应的成分和膜电位特征各异,这可能是初级听皮层神经元功能多样性的基础。

苦皮藤素Ⅳ和Ⅴ混合物对果蝇幼虫神经肌肉兴奋性接点电位的影响

利用细胞内微电极记录技术研究了杀虫植物苦皮藤Celastrus angulatusMax.中麻醉成分苦皮藤素Ⅳ和毒杀成分苦皮藤素Ⅴ混合物对果蝇Drosophila melanogaster3龄幼虫腹纵肌神经肌肉兴奋性接点电位(EJPs)的作用。结果表明,苦皮藤素Ⅳ比例较高(Ⅳ∶Ⅴ=3∶1)时对EJPs的影响与单用苦皮藤素Ⅳ差不多,而苦皮藤素Ⅴ比例较高(Ⅳ∶Ⅴ=1∶1和1∶3)时可使EJPs阻断时间明显延长。根据以上结果初步认为,虽然苦皮藤素Ⅳ和Ⅴ单独对EJPs的阻断作用基本相似,但它们对突触谷氨酸受体通道的影响存在明显差异。

山莨菪碱抑制离体交感神经节的胆碱能突触传递

了解山莨菪碱（Ａｍ）对交感神经节细胞烟碱型乙酰胆碱（Ａｃｈ）受体的作用。用离体蟾蜍椎旁神经节细胞内记录技术观察Ａｎｉ对胆碱能突触传递的影响。Ａｎｉ０．１～１．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１灌流１５～２０ｍｉｎ（ｎ＝２８），对电刺激交感节前纤维诱发的顺行动作电位，可有起始段上升速率减慢、超极化后电位增大、去极化后电位减小以及在１．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１使５７％的细胞（４／７）顺行动作电位发放率下降或完全取消等作用，其综合抑制有效率在０．１，０．３，１．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１分别为２０％，５０％和１００％。另外，Ａｎｉ还可逆地降低外源性Ａｃｈ电位的幅度并缩短时程（ｎ＝３）。结论：高浓度Ａｎｉ对交感神经节细胞的烟碱型Ａｃｈ受体有一定的阻断作用。

胞内记录猫体感皮层内脏伤害性感受神经元的电生理特性

为了从细胞水平探讨皮层内脏伤害感受的特性及机制，本文应用细胞内电位记录技术，观察了猫体感皮层内脏大神经皮层代表区的８５１个神经元对电刺激内脏大神经的诱发反应及电生理特性。其中４１２个单位为内脏伤害性感受神经元，其自发放电有多种形式，根据诱发反应现象分为特异性和非特异性伤害感受神经元，内脏伤害性诱发反应分为兴奋性反应（５１７％）、抑制性反应（３１３１％）及混合性反应（１７％）三类。在形式上具有潜伏期长、反应形式复杂等特点。实验发现８５个神经元为内脏及肋间神经的会聚反应细胞。部分神经元用神经生物素进行细胞内电泳标记以显示功能细胞所在层次及形态。结果说明皮层体感神经元具有内脏伤害性感受的作用，并从细胞及突触后电反应特点上探讨了内脏痛的感受机制。

大鼠下丘脑薄片视上核神经元的细胞内生物电记录

从成年Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠用振动切片机制备含有视上核的下丘脑冠状薄片（５００μｍ厚），并对视上核神经元（ｎ＝１７）进行常规细胞内生物电记录。测得静息电位－６０±８ｍＶ，膜输入电阻１７３±５８ＭΩ，时间常数１０．２±３．９ｍｓ，动作电位幅度６５±１２ｍＶ，阈电位－４４±７ｍＶ，由Ｉ─Ｖ曲线测得斜率电阻１５８±６２ＭΩ，大部分细胞还显示内向整流特性。在静息电位状态下，５７％细胞保持静息，４３％有自发锋电位发放。细胞的锋电位发放模式７８％为时相型，２２％为持续型。外源性去甲肾上腺素（ｎ＝７）或谷氨酸钠（ｎ＝５）可引起伴有膜电阻减小的去极化反应，并可导致锋电位的串发放。

扣带回前部内脏伤害感受神经元的生物电活动

为了从神经元水平探讨大脑皮层内脏伤害感受的特性及机制 ,应用玻璃微电极细胞内电位记录技术 ,研究 18只猫扣带回前部 312个神经元的自发生物电活动 ,及其对电刺激同侧内脏大神经的诱发反应 .其中 ,82个为内脏伤害感受神经元 ,其自发生物电活动有 5种主要形式 .根据诱发反应的潜伏期等特性 ,内脏伤害感受神经元分为特异性内脏伤害感受神经元 (76个 ,92 6 8% )和非特异性内脏伤害感受神经元 (6个 ,7 32 % ) .内脏伤害性诱发反应分为兴奋性 (6 5 86 % )、抑制性 (17 0 7% )及混合性反应 (17 0 7% ) 3种 .结果提示内脏大神经的传入通路投射到同侧扣带回前部 ;扣带回前部神经元具有内脏伤害感受作用 ,存有特异性与非特异性内脏伤害感受神经元 。

牛磺酸对GABA引起的大鼠DRG神经元膜去极化的抑制作用（英文）

目前已普遍认为牛磺酸可能是中枢神经系统中的一种抑制性神经递质或神经调质。本实验的目的在于观察牛酸是否使背根神经节神经元膜产生电位变化及其是否对GABA引起的背根神经节神经元膜去极化有调制作用。应用细胞内记录技术观察，标本灌流液中滴加牛磺酸（0．1～100μmol／L）未记录到可检测的膜电位改变，但牛磺酸对GABA（0．3～1000μmol／L）引起的去极化有明显的抑制作用，并对GABAA受体特异性激动剂muscimol（10～100μmol／L）和isoguvacine（10～100μmol／L）引起的去极化有同样的抑制作用，此作用具有明显的浓度依赖性。如10μmol／L的牛磺酸可使100μmol／LGABA引起的去极化抑制47．2％±13．8％（n=8）。牛磺酸对GABA引起去极化的抑制作用随预加牛磺酸与外加GABA之间间隔时间的延长而逐渐减弱，约间隔8～10min，GABA引起的去极化完全恢复。结果提示，牛磺酸在脊髓背角信息传递中起重要的调制作用。

八肽胆囊收缩素对大鼠背根神经节膜电位的影响

八肽胆囊收缩素(CCK-8S)作为一种脑肠肽参与许多重要的生理和病理生理过程,为探讨CCK-8S在痛觉信息传递中的作用,本研究应用细胞内微电极记录技术在急性分离的大鼠背根神经节(DRG)上,观察对DRG神经元膜电位的影响。结果显示:(1)灌流CCK-8S(10-8～10-6 mol/L)可以使部分DRG神经元(25.2%,36/143)引起具有浓度依赖性的DRG神经元去极化,EC50为1.7×10-7 mol/L。(2)选择性CCK-A受体拮抗剂prolumide(10-4mol/L,n=6)基本完全阻断CCK-8S引起的去极化反应,而CCK-B受体拮抗剂LY225910(10-4 mol/L,n=6)对CCK-8S介导的去极化则没有影响。上述结果提示CCK-8S通过CCK-A受体引起浓度依赖的DRG神经元去极化,参与痛觉信息传递或调节。

皮层SI区伤害感受神经元膜电生理特性研究

用细胞内记录技术， 在１６ 只成年健康猫， 研究了皮层第一躯体感觉区（ｐｒｉｍａｒｙ ｓｏｍａｔｏｓｅｎｓｏｒｙ ｃｏｒｔｅｘ ａｒｅａ ， Ｓ Ｉ区） 伤害感受神经元的电生理特性． Ｓ Ｉ区伤害感受神经元自发放电频率差异大， 放电形式多样． 极化电流绝对值≤１０ ｎ Ａ 时， 伤害感受神经元 Ｉ Ｖ极相关（ｒ ＝ ０９６） ， 整流作用不明显； 极化电流绝对值＞ １０ ｎ Ａ 时， 在两个方向上发生整流， Ｉ Ｖ （ 电流电压） 曲线表现为“ Ｓ”型， 其中伤害感受神经元整流作用较非伤害感受神经元明显． 伤害感受神经元 Ｒｍ 、τ、 Ｃｍ 明显大于非伤害感受神经元（ Ｐ＜ ００１ 或 Ｐ＜ ００５） ． 结果提示 Ｓ Ｉ区伤害感受神经元与非伤害感受神经元可能在细胞膜结构、细胞大小等方面存在有意义的差别， 从而反映其不同的生理功能．

脊神经节神经元对躯体与内脏刺激的会聚反应

本工作发现，６８个Ｓ１背根节（ＤＲＧ）神经元暨被阴部神经（Ｐｕ）刺激又被盆神经（Ｐｅ）刺激激动。Ｐｕ刺激引起的反应的平均传导速度（３８．１Ｍ／ｓ）显著快于Ｐｅ引起的平均传导速度（２１．８Ｍ／ｓ）．Ｐｕ与Ｆｅ刺激引起的锋电位相互碰撞。结果提示，躯体与内脏输入可经其分叉的外周实在单个Ａ型ＤＲＧ神经元上会聚。

新生大鼠脊髓薄片中的运动神经元对腹外侧索刺激的反应

在新生大鼠脊髓薄片细胞内记录了２５个经送行刺激鉴定的运动神经元（ＭＮ），发现腹外侧索刺激可在８０％的ＭＮ诱发去极化反应（ＥＰＳＰ）。在静息电位水平ＥＰＳＰ的潜伏期、达峰时间、幅度、半衰时间和时程分别为１．２±０．２ｍｓ，２．６±０．４ｍｓ，１３±３ｍＶ，５．３±１．６ｍｓ和３１±８ｍｓ。ＥＰＳＰ呈等级性和膜电位依赖性，平均翻转电位为－８ｍＶ，潜伏期在０．—５Ｈｚ频率的刺激时相对恒定，但刺激频率＞２０Ｈｚ时ＥＰＳＰ变小或被取消。ＥＰＳＰ在低钙高镁溶液中被阻抑叵在无镁溶液中增强。犬尿烯酸（０．５—１ｍｍｏｌ／Ｌ）可逆地阻断ＥＰＳＰ，但氯胺酮（５０—１００μｍｏｌ／Ｌ）仅部分抑制之。结果表明腹外侧索中的下行纤维可能释放兴奋性氨基酸而激活ＭＮ。

三七总皂甙对快兴奋性突触后电位作用及机制的实验研究

目的 :探讨三七总皂甙 (PNS)对大鼠星状神经节快兴奋性突触后电位的影响及机制。方法 :用细胞内生物电记录技术 ,测定 PNS对大鼠星状神经节 (SG)的快兴奋性突触后电位 (f- EPSP)、膜电位、膜电阻及对外源性乙酰胆碱引起的膜除极化反应的影响。结果 :PNS在 0 .10～ 0 .16 g/ L 浓度范围内可使 f- EPSP可逆性减小 (P <0 .0 1) ,但对膜电位、膜电阻及外源性氯化乙酰胆碱 (Ach)引起的膜除极反应均无显著的影响。结论 :PNS对大鼠星状神经节 f- EPSP有可逆性抑制作用 ,抑制是通过突触前机制产生。

离体背根神经节细胞膜电学特性的测量及其应用

本文介绍了蟾蜍及新生大鼠离体背根神经节神经细胞膜电位及诱发动作电位的细胞内记录方法以及膜电导,翻转电位等电学特性的测量。应用上述方法测得蟾蜍DRG细胞膜输入电阻为30～40MΩ,新生大鼠的输入膜电阻为45～70MΩ;α_1肾上腺素能受体激活引起DRG细胞膜去极化反应时,膜电导减小.而α_2-肾上腺素能受体激活引起细胞膜电位超极化反应时,膜电导增加。去甲肾上腺素引起DRG细胞膜去极化反应的平均翻转电位值为-88.5mV。这些方法为神经细胞的某些电学特性、神经递质及受体等方面的研究提供了基本的实验手段。

孤束核内鼓索传入味觉神经元的形态

用细胞内记录和细胞内注射方法标记71个吻侧孤束核味觉神经元。它们分布于耳蜗背核尾极尾侧400μm至吻侧500μm两平面之间的孤束核内．标记神经元经三维重组后，根据细胞体积、胞体面积、树突节段平均长度、膨体密度、树突棘密度和初级树突数量等六种形态学特征，进行统计学（ANOVA）定量分析，将标记细胞分为A、B、C、D、E、F六类，每类细胞至少有一种形态学特征与其它五种有显著的不同（P＜0．05）。A类（n＝22）细胞胞体最小，占标记细胞总量的31％；B类（n＝16）具有最密的树突膨体和较小的胞体，占23％；C类（n＝9）细胞的树突最长而树突棘最少，也可称为寡树突棘神经元，占13％；D类（n＝7）具有最多的初级树突分支，占9％；E类（n＝9）具有最多的树突棘而膨体却最少；占13％；F类（n＝8）细胞的胞体最大，而数量则最少，占11％。此结果提示除胞体的形态大小可作为细胞形态学分类的依据外，树突棘和膨体也是吻侧孤束核细胞分类的重要依据。