常规染色体畸变分析法对AT细胞高辐射敏感性的研究

目的 研究毛细血管扩张性共济失调症(ataxia-telangiectasia,AT)患者皮肤的成纤维细胞系AT5BIVA(AT细胞)的高辐射敏感性。方法 以源于正常人皮肤的成纤维细胞系GM0639(GM细胞)为对照,用常规染色体畸变分析法,在AT细胞和GM细咆经60COγ射线0、1、2、3、4 Gy照射后,观察比较AT细胞和GM细胞之间染色体畸变率(CAF)的差异,并分别进行曲线拟合。结果 在0、1、2、3、4 Gy剂量下,AT细胞染色体畸变率明显高于GM细胞(P<0.05);AT和GM细胞染色体畸变率与剂量成正相关,均可拟合成剂量效应直线方程Y=a+bX,且AT细胞剂量效应直线回归方程斜率明显大于GM细胞(P<0.05)。结论 AT患者AT细胞的辐射敏感性显著高于GM细胞,具有高辐射敏感性。

辐射所致残存染色体易位与放射敏感性关系研究

目的 :应用荧光原位杂交 (FISH)方法研究人肿瘤细胞放射敏感性与染色体残存易位关系及临床应用的可行性。方法 :采用 3种放射敏感性不同的人肿瘤细胞系 :鼻咽鳞癌 (CNE)、肺腺癌 (SPC)和乳腺腺癌 (MCF 7)。通过克隆形成方法测定 2Gy、4Gy、6Gy和 8GyX线照射剂量下肿瘤细胞的存活率。采用常规染色体制片过程和 2号染色体涂染探针及FISH方法 ,测定 2Gy、4Gy和 6GyX线照射2 4h后 ,肿瘤细胞 2号染色体内在和诱导的畸变量。结果 :未照射的对照细胞 2号染色体存在不同程度的内在畸变。 2Gy、4Gy和 6Gy照射后 2 4h ,CNE、SPC和MCF 7细胞诱导生成的残存染色体畸变与剂量关系一致 ,能够反映细胞的放射敏感性 ,所有细胞系诱导 2号染色体生成的畸变与细胞存活率均存在良好相关性 (rs=0 96)。结论 :诱导的残存染色体畸变与照射剂量呈线性关系 ,采用FISH方法计数照射诱导的残存染色体畸变 。

~60Coγ射线诱发小鼠卵母细胞和骨髓细胞染色体畸变的量效关系比较

用不同剂量（０～３Ｇｙ）６０Ｃｏγ射线一次全身性照射雌性ＩＣＲ小鼠，观察ＭⅡ（第二次减数分裂中期）卵母细胞和骨髓细胞染色体损伤效应，用ＷＨＯ推荐的４个模式进行剂量效应曲线的拟合，选出最优的拟合模式，并对ＭⅡ卵母细胞和骨髓细胞的量效关系式进行了比较。结果表明，ＭⅡ卵母细胞和骨髓细胞均为辐射的敏感指标。骨髓细胞的辐射敏感性高于ＭⅡ卵母细胞。

放射敏感性与染色体诱导易位的线形关系及其应用研究

应用荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）方法，研究人类恶性肿瘤细胞放射敏感性与照射后染色体易位 畸变关系及其临床应用的可行性．采用３个放射敏感性不同的人类恶性肿瘤细胞株：鼻咽鳞癌 （ＣＮＥ）、肺腺癌（ＳＰＣ－Ａ１）和乳腺腺癌（ＭＣＦ－７）．用常规集落形成方法，测定不同照射 剂 量下、不同敏感性肿瘤细胞的存活率．经秋水仙素阻断细胞分裂周期，低渗、固定等常规染色 体制片过程和采用２， ８号染色体涂染探针及ＦＩＳＨ方法，测定照射后２４ ｈ肿瘤细胞２， ８号染色 体内在的和辐射诱导的易位畸变量．结果发现，未照射的对照细胞内， ２， ８号染色体都存在不 同程度的内在易位畸变．经分别照射２， ４， ６ Ｇｙ后２４ ｈ，ＣＮＥ，ＳＰＣ－Ａ１和ＭＣＦ－７细胞诱导生 成的残存染色体易位畸变与照射剂量相关性强，能够反映细胞的放射敏感性；此外，所有细 胞株中诱导生成的２， ８号染色体易位畸变与细胞存活率也存在良好相关性，相关系数分 别为 ０．９７和０．９８．该结果同时表明照射诱导易位畸变存在染色体簇性，与染色体大小无关． 由此可见，诱导的残存染色体易位畸变与照射剂量呈线形关系．采用ＦＩＳＨ方法计数照射诱导 的残存染色体易位畸变，在预测不同的?

用染色体畸变研究AT细胞系辐射敏感性和适应性反应

目的探讨毛细血管扩张运动共济失调症(ataxiatelangiectasia,AT)细胞系的辐射敏感性和对低剂量辐射能否诱导细胞遗传学适应性反应。方法用2cGy60Coγ射线预先照射进入G1期的AT5B1VA(AT)细胞和GM0639(GM)细胞,培养6h后再照射1.0Gy或3.0Gy60Coγ射线,分析染色体畸变。结果G1期的GM细胞在预照射2cGy60Coγ射线的诱导剂量后能非常显著地降低随后照射1.0Gy或3.0Gy60Coγ射线诱发的染色体畸变率,染色体畸变的观察值非常显著地低于预期值(P<0.001),而对AT细胞则没有观察到这种现象,染色体畸变的观察值与预期值差异无统计学意义(P>0.05);另外,1.0Gy或3.0Gy60Coγ射线诱发AT细胞的各种畸变率(包括着丝粒畸变、无着丝粒畸变和染色单体型畸变)均显著地高于GM细胞(P<0.001)。结论低剂量电离辐射不能诱导AT细胞产生细胞遗传学适应性反应;AT细胞对电离辐射诱发染色体畸变高度敏感,可能是由于不能正确修复DNA双链断裂的结果。

荧光原位杂交法预测肿瘤放射敏感性的初步研究

目的 研究应用荧光原位杂交 (FISH)方法预测人肿瘤细胞放射敏感性及其应用的可行性。方法 用 3种放射敏感性不同的人肿瘤细胞株 [鼻咽鳞癌 (CNE)、肺腺癌 (SPC)和乳腺癌 (MCF 7) ],常规克隆形成方法测定不同剂量照射后的存活分数和照射后 2 4h经秋水仙素阻断细胞分裂周期 ,低渗、固定、常规染色体制片后 ,采用 8号染色体涂染探针和FISH方法测定肿瘤细胞 8号染色体诱导的畸变量。结果 2、4、6Gy照射后 2 4h ,CNE、SPC和MCF 7细胞诱导生成的残存染色体畸变能够反映细胞的放射敏感性 ,所有细胞株诱导染色体畸变与细胞存活分数分别存在良好相关性(r=0 .98) ,3种细胞株SF2和相应残存染色体畸变也存在良好相关性 (r=0 .96 )。结论 采用FISH方法计数照射诱导的残存染色体畸变 。