Comparison of liquid-liquid extraction-thin layer chromatography with solid-phase extraction-high-performance thin layer chromatography in detection of urinary morphine

Liquid-liquid extraction-thin layer chromatography （LLE-TLC） has been a common and routine combined method for detection of drugs in biological materials. Solid-phase extraction （SPE） is gradually replacing the tra- ditional LLE method. High performance thin layer chromatography （HPTLC） has several advantages over TLC. The present work studied the higher efficiency of a new SPE-HPTLC method over that of a routine LLE-TLC method, in extraction and detection of urinary morphine. Fifty-eight urine samples, primarily identified as mor- phine-positive samples by a strip test, ＇were re-screened by LLE-TLC and SPE-HPTLC. The results of LLE-TLC and SPE-HPTLC were then compared with each other. The results showed that the SPE-HPTLC detected 74% of total samples as morphine-positive samples whereas the LLE-TLC detected 48% of the same samples. We further discussed the effect of codeine abuse on TLC analysis of urinary morphine. Regarding the importance of morphine detection in urine, the present combined SPE-HPTLC method is suggested as a replacement method for detection of urinary morphine by many reference laboratories.

建立HPLC-RID测定枸杞子中枸杞多糖含量研究

目的通过高效液相色谱-示差折光检测法(HPLC-RlD)摸索枸杞子中枸杞多糖(枸杞多糖以葡萄糖计)的提取方式和含量测定方法,达到检测方法准确可靠操作简便的目的。方法本法采取加水回流提取方式,利用高效液相色谱仪和示差折光检测器进行检测,色谱柱为LC026(Prevail Carbohyrate ES为填充剂250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(70∶30),检测器温度40℃,流速1.0 ml/min,柱温40℃。结果枸杞子在0.5~4.0 mg/ml线性范围内呈良好线性关系,R^(2)=0.9999,平均回收率为104.81%,RSD=1.10%。结论该方法操作简便,灵敏度高,重复性好,准确可靠,可用于测定药材枸杞子中枸杞多糖的含量,并有效控制枸杞子质量。

高效液相色谱法测定食用植物油中黄曲霉毒素B_(1)前处理方法的改进

改进GB 5009.22—2016《食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》中高效液相色谱法测定食用植物油中的黄曲霉毒素B_(1)的方法,将甲醇-水溶液(体积比70∶30)用量提高至25 mL,选择均质提取4 min作为前处理提取方式,加入5.0 g氯化钠消除乳化现象,取消氮吹过程,净化洗脱完后直接定容。该优化方法提取效率高,较好地减少了被检测含量的损失,净化过程较原有方法更简单、方便,回收率和精密度更满意,适用于植物油脂黄曲霉毒素B_(1)的检测分析。

SPE-HPLC双检测器法同时测定地表水中的苯并[a]芘和阿特拉津含量及不确定度评定

采用全自动固相萃取(SPE)-高效液相色谱(HPLC)双检测器法同时定量分析地表水中的苯并[a]芘(BaP)和阿特拉津(AT)含量,建立了BaP和AT含量不确定度的分析方法。从样品前处理过程、样品重复测定、标准溶液配制和标准曲线拟合等方面评定了不确定度分量的贡献。评定结果显示:在影响检测结果的4个分量中,HPLC测定地表水中BaP含量时,标准曲线拟合和样品前处理过程引入的不确定度对结果影响较大,当BaP质量浓度为2.01 ng/L时,其扩展不确定度(U)为0.24 ng/L(k=2);测定AT含量时,标准溶液配制和样品重复测定引入的不确定度对结果影响较大,当AT质量浓度为50.09 ng/L时,U=4.72 ng/L(k=2)。

高效液相色谱法在中药复方成分分析中的应用

随着越来越多学者对中药复方制剂有效成分的深入挖掘,高效液相色谱法(HPLC)作为一种高效、准确、灵敏度高的分析手段受到越来越广泛的应用。目前,高效液相色谱法多与其他分析手段如质谱、红外光谱、荧光检测器等技术联用便于对中药复杂成分的分析。

基于不同内参物的一测多评法测定黄刺玫中5种成分的含量

建立基于不同内参物的一测多评法测定黄刺玫中矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、芦丁、异槲皮苷、木犀草素和槲皮素5种成分的含量。分别以芦丁、异槲皮苷和木犀草素为内参物,计算另外4种成分的相对校正因子建立一测多评法,计算12批黄刺玫样品中5种成分的含量,并比较外标法和一测多评法测定结果之间的差异。结果表明外标法和一测多评法测定12批黄刺玫样品中5种成分的含量相对标准偏差均小于3.0%,表明两种方法的测定结果无明显差异。所建立的一测多评法同时测定黄刺玫中5种成分的含量与外标法结果无明显差异,可用于黄刺玫的质量控制和评价。

采用HPLC技术快速检测发酵大豆制品中异黄酮的含量

本文介绍了利用高效液相色谱(HPLC)技术快速检测发酵大豆制品中异黄酮含量的方法。在Lichrosper100RP-18(4.6mm×25cm×5μm)色谱柱上,以含有0.1%(v/v)冰醋酸的乙腈和水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为254nm,平均回收率达到99%以上。分析结果表明此分析方法灵敏、准确、重现性好。在上述条件下检测发酵大豆制品中异黄酮含量,结果表明发酵大豆制品中异黄酮主要以甙元形式存在。

川芎伍用丹参煎剂对川芎嗪药物动力学的影响

三维高效液相色谱（３Ｄ－ＨＰＬＣ）测定川芎煎剂及其灌胃大鼠后血清中均含有多种组分，其中一种用ＨＰＬＣ提纯后经紫外、红外光谱，质谱和核磁共振谱鉴定为川芎嗪（ＴＭＰ）。用ＨＰＬＣ法测定了大鼠灌胃川芎煎剂（Ｉ组，６只，３０ｇ／ｋｇ）和川芎丹参煎剂（Ⅱ组，６只，４０ｇ／ｋｇ，川芎：丹参＝３：１）后血清ＴＭＰ浓度，并研究了两组的药代动力学（药动学）。ＴＭＰ药动学参数中的一级吸收速度常数（Ｋａ）、与血药一时曲线下面积（ＡＵＣ）等值表明：Ⅱ组明显低于Ｉ组（Ｐ＜０．０５～０．０１），说明伍用丹参后引起ＴＭＰ吸收减慢和生物利用度降低。

二氧化硅-氧化石墨烯复合物固相萃取-高效液相色谱法检测植物油中黄曲霉毒素B_1、B_2

以二氧化硅-氧化石墨烯复合物为固相萃取材料,建立了植物油中黄曲霉毒素B1、B2的高效液相色谱（HPLC）检测方法。优化的条件为：复合材料的最佳用量为0.15 g,最佳萃取时间20 min,洗脱溶剂为乙腈,洗脱次数为2次。结果表明,在优化条件下,建立的二氧化硅-氧化石墨烯复合物固相萃取-高效液相色谱法对黄曲霉毒素B1、B2的检出限分别为0.17和0.05μg/L。将本方法应用于植物油实际样品的检测中,加标回收率在81.4%~105.3%之间,相对标准偏差为1.3%~8.6%。

分子印迹固相萃取-高效液相色谱法测定饲料中莱克多巴胺

以莱克多巴胺为模板分子,丙烯酰胺为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,合成了对莱克多巴胺具有高选择性的分子印迹聚合物。考察了甲醇、乙腈、丙酮和氯仿-甲醇与三乙胺构成致孔剂合成的聚合物性能及其形貌特征。通过正交试验优化的聚合反应配方为:1.0 mmol莱克多巴胺,4.0 mmol丙烯酰胺,20.0 mmol乙二醇二甲基丙烯酸酯,6.0 mL乙腈-三乙胺(30∶1,v/v),50.0 mg偶氮二异丁腈。建立的基于分子印迹固相萃取-高效液相色谱测定饲料试样中莱克多巴胺的方法,在0.50～100 mg/L质量浓度范围内有良好的线性关系(r=0.999 4);饲料试样中1.0、10及100 mg/kg 3个添加水平的莱克多巴胺平均回收率大于80%;批内、批间测定的相对标准偏差小于10%;检出限(信噪比为3)达到0.1 mg/kg。该方法灵敏、可靠,用于饲料等复杂基质中莱克多巴胺检测的效果优于相关标准分析方法。

高效液相色谱法测定银杏叶提取物中槲皮素的含量

采用反相高效液相色谱法分离银杏叶提取物中黄酮类化合物并测定其中槲皮素含量。ＹＷＧＣ１８（０４６ｃｍ×１５ｃｍ）色谱柱，流动相甲醇水磷酸（５０∶４９８∶０２），检测波长３６０ｎｍ。回收率在９５３％～１０３２％之间，ＲＳＤ为１８６％。

低聚糖阿魏酸酯含量的快速测定方法

分别以麦麸、玉米芯、玉米麸皮为原料,采用酶法制备低聚糖阿魏酸酯,探讨其快速检测方法,并通过高效液相色谱法验证该法的准确性。结果表明,采用Amberlite树脂分离纯化可除去样品中的低聚糖(不含结合态的阿魏酸)、双波长分光光度法(345nm和375nm)结合还原糖法可用于对低聚糖阿魏酸酯进行准确定量。

涂布2,4-二硝基苯肼的环形溶蚀器/滤膜系统和高效液相色谱法检测大气中二羰基化合物

建立了环形溶蚀器／滤膜系统（Annular denuder／filter packsy stem）和2，4-二硝基苯肼（DNPH）高效液相色谱法（HPLC）采集和检测大气中气相和颗粒相二羰基化合物的方法。DNPH作为吸附剂分别涂布在环形溶蚀器的内壁和3层滤膜上，当大气样品经过环形溶蚀器时，含有气相二羰基化合物的气体吸附到环形溶蚀管内壁上与DNPH发生反应，而颗粒相部分穿过环形溶蚀管，采集到滤膜上。样品经乙腈洗脱、浓缩后，采用HPLC进行分析。根据不同的采样流速、采样时间和DNPH的涂布量采集到的二羰基化合物的浓度，确定的最佳采样条件为：采样流速4L／min，采样时间4-5h，DNPH浓度0．47g／L。使用Tedlar bag验证环形溶蚀器乙二醛和甲基乙二醛的采集效率（分别为82％和85％）。利用此方法对实际大气中的二羰基化合物进行了检测。

高效液相色谱-串联质谱法测定牛羊组织中苯酚类和水杨酸苯胺类抗蠕虫药多残留

建立了高效液相色谱-串联质谱法同时测定牛、羊组织中硝碘酚腈、氯羟柳胺、氯氰碘柳胺、碘醚柳胺4种苯酚类和水杨酸苯胺类抗蠕虫药的多残留检测方法.样品用乙腈-丙酮（60∶40,V/V）（肌肉、肝脏和肾脏组织）或1％三乙胺乙腈（脂肪组织）超声提取,MAX阴离子固相萃取柱净化,液相色谱分离,采用多反应监测负离子模式对4种药物同时进行定性定量分析,在1～100μg/L范围内,4种药物与其对应峰面积的线性关系良好,相关系数均大于0.99.在牛、羊组织中的检出限（LOD）均为1μg/kg,定量限（LOQ）均为2.5 μg/kg.在LOQ、0.5倍最高残留限量（MRL）、MRL、2倍MRL添加水平下,4种药物的平均回收率在71％～112％之间,日内相对标准偏差（RSD）在1.1％～14.0％之间,日间RSD在6.4％～14.7％之间.采用本方法对市场上动物可食性组织进行抽样检测,共抽检40份样品,2份样品检测出苯酚类和水杨酸苯胺类抗蠕虫药残留.

高效液相色谱法测定盐酸环丙沙星血药浓度及其药动学研究

采用高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）测定盐酸环丙沙星的血药浓度。色谱条件为：紫外检测波长λ２７７ｎｍ；分析柱为ＨＰ－ＲＰ－ＯＤＳＣ１８柱，Φ４．６×２２０ｍｍ；流动相：乙腈∶（溴化四丁基铵０．００８ｍｏｌ·Ｌ－１＋磷酸二氢钾水溶液０．０１１ｍｏｌ·Ｌ－１）＝１４∶８６，配好后磷酸调ｐＨ至２．７４±０．０２。本法血清最低检出浓度０．０１μｇ·ｍｌ－１。对１０名受试者口服５００ｍｇ两种盐酸环丙沙星片后进行药动学和生物利用度研究。药－时曲线经拟合为二室开放模型，其Ｔ１／２β分别为４．６８±０．５３ｈ与４．４０±０．４７ｈ，Ｔｍａｘ分别为１．２８±０．０７ｈ与１．３３±０．０７ｈ，Ｃｍａｘ分别为６．４４±０．６１（μｇ·ｍｌ－１）与５．８８±０．４０（μｇ·ｍｌ－１），ＡＵＣ分别为１９．８８±１．８３（μｇ·ｈ－１·ｍｌ－１）和１９．２４±１．０８（μｇ·ｈ－１·ｍｌ－１）。供试品片剂的相对生物利用度为１０３．３２±４．８１％（９９．５８±４．６３％，经含量校正），经统计分析两种制剂具有生物等效性。

RP-HPLC法测定熟地黄中5-羟甲基糠醛的含量

目的：建立测定熟地黄中5-羟甲基糠醛（5-HMF）含量的方法．方法：采用反相高效液相色谱法，以ZODBAX—C18（4．6mm×150mm，5μm）为色谱柱，流动相为甲醇与0．01mol／L磷酸溶液（70：30），检测波长为284nm，流速0．8mL／min，柱温：25℃，进样量：20μL．结果：5-HMF在0．44—2．18μg范围内与峰面积线性关系良好，r=0．9999，5-HMF平均加样回收率为99．0％，RSD为0．8％（n=6）．结论：采用反相高效液相色谱法简便、快捷、可靠性高，准确性和重现性好，确定是一种值得推广应用的检测熟地黄中5-HMF的含量方法．

发酵液中克拉维酸含量的测定方法

介绍了3种测定克拉维酸含量的方法,即高效液相色谱法、紫外分光光度法与生物效价法,3种方法测定结果进行分析研究,得出三种方法之间具有较好的相关性。高效液相色谱法及紫外分光光度法均基于克拉维酸与咪唑反应衍生后的衍生物在312nm处有特征吸收,且衍生后的色谱图在反相高效液相色谱柱上可有效避免发酵液中其他组分的干扰;生物效价法采用KlebsiellapneumoniaeATCC29665作为指示菌。由于3种方法测定结果之间具有相关性,可以根据不同的实验条件及实验目的选用不同的检测方法。

大亚湾水域两种拟菱形藻的形态学鉴定及毒素分析

对2005年分离自广东大亚湾的两种潜在产毒拟菱形藻进行了形态学观察和毒性分析.通过透射电子显微镜(TEM)观察确认藻种为细弱拟菱形藻(Pseudo-nitzschia cuspidata)和多纹拟菱形藻(P.multistriata).采用高效液相色谱法(HPLC)对这两种藻的常规培养样进行软骨藻酸毒素检测,结果均未检测到软骨藻酸.鉴于以上两种拟菱形藻存在着潜在产毒特性,不同培养条件的诱导实验尚需继续.

红莲外皮原花青素的纯化与分析

原花青素作为多酚的一大类广泛存在于天然植物中。红莲外皮原花青素粗提取物采用大孔树脂AB-8和聚酰胺柱进行两次纯化。纯化物通过红外光谱(infrared spectrum,IR)和电子喷雾离子化质谱(electrospray ionization-mass spectroscopy,ESI-MS)对成分进行分析,并通过反相液相色谱-质谱(reverse phase high-performance liquid chromatography-mass spectroscopy,RP-HPLC-MS/MS)联用对组分进行分离鉴定。结果表明:纯化物中有9种原花青素单体和低聚体,其中包括儿茶素和表儿茶素(m/z 289)、棓儿茶素(m/z 305),4种原花青定二聚体的同分异构体(m/z 577)和2种原花青定四聚体的同分异构体(m/z 1 153)。

高血压病肝阳上亢证、阴阳两虚证代谢物差异研究

目的观察高血压病肝阳上亢证、阴阳两虚证的代谢物差异。方法选择2009年6月—2010年5月高血压中医临床研究基地门诊及住院高血压病患者26例,其中肝阳上亢证12例(肝阳上亢证组),阴阳两虚证14例(阴阳两虚证组),另选择附属社区健康志愿者14名作为对照组。通过液质联用技术检测分析各组血浆并进行主成分分析(PCA),通过Metlin数据库鉴定相关代谢物及代谢通路。结果主成分得分图中健康志愿者的数据离散度较大,而阴阳两虚证组和肝阳上亢证组的数据则呈聚集,进一步PCA结果显示,两证候组数据在空间上分离良好,组间存在较大差异;共鉴定出6种代谢物,其中肝阳上亢证组雌二醇、白三烯、葡萄糖神经酰胺、神经酰胺相对增多,而阴阳两虚证组中甘油三酯和甘油二酯相对增多。结论液质联用技术能初步区分并阐释高血压病肝阳上亢证及阴阳两虚证不同的代谢模式,在两种证候中代谢趋势不同的雌二醇、白三烯、葡萄糖神经酰胺、神经酰胺、甘油三酯及甘油二酯或能成为两种高血压病证候的鉴别点。