针刺调控缺氧诱导因子-1α信号通路改善缺血性脑血管病的作用机制

缺血性脑血管疾病是常见的神经系统疾病之一,具有高致残率,高死亡率的特点,加剧了世界范围内的医疗卫生经济负担。缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是低氧响应的关键因子,在缺血性脑血管病发生和发展过程中发挥重要作用,而针刺在缺血性脑血管病的治疗中同样显示出显著优势。针刺调控HIF-1α信号通路可能是针刺产生疗效的关键机制之一。既往研究初步表明针刺对HIF-1α的调控作用可能不仅与疾病的损伤类型相关,还可能与HIF-1α的表达的时效效应以及针刺的介入时机相关。

中药三七抗缺血再灌注损伤作用的研究进展

缺血再灌注损伤(IRI)在组织损伤中非常常见,其病理过程较为复杂,可通过多种细胞因子及相关信号通路参与细胞损伤,对机体损伤严重。中医认为缺血再灌注损伤乃气血瘀滞所致,而中药三七具有活血化瘀、且毒副作用小的特点,其活性成分药理作用广泛,参与改善微循环、调节代谢、减轻应激及自噬等过程,从而改善重要器官缺血再灌注损伤。本文主要对近年来三七及其活性成分对缺血再灌注损伤的保护机制进行简要综述,为以后的研究提供参考。

银杏内酯A对小鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用及其抑制NF-κB信号通路下调p53、Caspase-3表达的机制

目的探讨银杏内酯A(Ginkgolide A,GA)对缺血/再灌注脑损伤小鼠的保护作用及其可能的作用机制。方法采用小鼠短暂性大脑中动脉阻塞(transient middle cerebralartery occlusion,tMCAO)模型观察GA(10,20 and 40 mg.kg-1)对小鼠脑梗死范围、脑含水量及神经症状的影响,并进行病理组织学检查;采用实时荧光定量PCR技术检测缺血大脑皮层p53 mRNA的表达;应用Western blot法检测缺血大脑皮层IκBα、pIκBα及Caspase-3蛋白水平的表达。结果 GA对缺血/再灌注小鼠神经症状有明显的改善作用,能明显降低脑梗死范围,降低脑含水量,脑组织病理组织学也显示了GA对神经细胞的保护作用。Western blot结果显示:小鼠脑缺血/再灌后,IκBα蛋白水平明显降低,GA能明显升高IκBα的蛋白水平,降低pIκBα和Caspase-3的蛋白水平。PCR结果表明:小鼠脑缺血/再灌后,p53 mRNA水平升高,GA能下调p53 mRNA的表达。结论 GA对缺血/再灌注小鼠脑损伤有明显保护作用,该作用可能与其抑制NF-κB信号通路,下调p53、Caspase-3的表达有关。

西红花素对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及神经行为学影响

目的:研究西红花素对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:采用大鼠脑缺血再灌注模型,隔日西红花素腹腔注射,术后每周进行神经症状评分和行为学实验。28 d后取脑检测缺血侧海马和皮层脑源性神经营养因子(BDNF)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性。结果:西红花素给药显著降低脑缺血再灌注大鼠的神经症状评分,增加十字高架迷宫试验的开臂停留时间,减少旷场试验中央区活动时间。同时,西红花素腹腔注射明显上调缺血侧海马和皮层GDNF、皮层BDNF的表达,降低MDA的产生,提高SOD、GSH-Px活性(P<0.05),差异具有统计学意义。结论:西红花素可缓解脑缺血再灌注大鼠的焦虑情绪,提高空间辨识和学习记忆能力,其机制可能与西红花素促进神经营养因子的分泌和抗氧化活性物质的产生有关。

M_3受体激动剂毛果芸香碱对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究M3受体激动剂毛果芸香碱对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用Langendorff灌注系统,建立离体大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。观察毛果芸香碱5μmol.L-1对复灌后冠脉流量、心肌丙二醛(MDA)含量、心肌超氧化物歧化酶(SOD)活性和心肌梗死面积的影响。结果毛果芸香碱改善缺血再灌注后的冠脉流量,其中5 min(P<0.01)和10min(P<0.05)的冠脉流量增加显著;降低心肌MDA含量(P<0.05)并提高心肌SOD活性(P<0.05);缩小心肌梗死面积(P<0.05)。上述作用可被选择性M3受体阻断剂4-diphenylacetoxy-N-methylpiperidine-methiodide(4-DAMP)3 nmol.L-1所逆转。结论M3受体激动剂毛果芸香碱通过激动心肌M3受体而对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤起保护作用。

甘氨酸纳米脂质体的制备及其在脑缺血/再灌注中的神经保护作用研究

甘氨酸（glycine，Gly）是近年来研究较多的一类具有细胞保护作用的氨基酸。已有研究发现甘氨酸能对抗肺、肾、肠、骨骼肌等器官和组织的缺血／再灌注损伤发挥细胞保护作用。有研究表明脑内有NMDA受体Gly位点，且国外学者在细胞水平上发现，Gly通过非离子通道激活NMDA受体，有明显的神经细胞保护作用。

姜黄素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察姜黄素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法结扎大鼠冠状动脉左前降支,使心肌缺血60m in,再灌注30 m in,制成急性心肌缺血再灌注损伤模型,缺血前5 m in,舌下静脉推注姜黄素,观察在急性缺血和再灌注状态下血流动力学的变化。再灌注结束时测量心肌梗死面积。结果姜黄素(20,40 mg.kg-1)能剂量依赖地改善大鼠心肌缺血再灌注后的血流动力学变化,LVSP、±dp/dtm ax均较缺血再灌注对照组升高,LVEDP有所降低;同时可减少心肌梗死面积。结论姜黄素对心肌缺血再灌注损伤有保护作用。

前列腺素E_1对大鼠移植肺再灌注损伤的保护作用

目的:探讨前列腺素E1(PGE1)对大鼠移植肺再灌注损伤的保护作用及机制。方法:SD大鼠36只随机分为3组,每组12只,即对照组、肺移植组和肺移植加PGE1处理组,观察受体大鼠肺移植前后注射PGE1对移植肺再灌注损伤的保护作用。肺功能指标包括肺湿干重比、肺通透性指数、支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞计数和分类。比色法检测各组肺组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量。ELISA法检测受体大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNFα)含量。结果:肺移植术后1 h,肺湿干重比、肺通透指数、BALF中中性粒细胞百分比和MDA含量显著高于对照组(P<0.01),肺组织中SOD活性明显低于对照组(P<0.01);给予受体大鼠静脉注射PGE1可明显改善上述指标(P<0.01);肺移植组血清TNFα含量较对照组显著升高(P<0.01),PGE1可明显降低血清TNFα水平(P<0.01)。结论:PGE1对移植肺缺血／再灌注损伤有显著的保护作用,与其抗氧化自由基损伤、抑制中性白细胞激活和炎性因子TNFα分泌有关。

Danhong injection A modulator for Golgi structural stability after cerebral ischemiareperfusion injury

The cerebral ischemia-reperfusion model was established using the suture occlusion method, and rats were intraperitoneally given 8 mL/kg Danhong injection once a day prior to model establishment Rat brain tissues were harvested at 6, 24, 48, 72 hours after reperfusion. Immunohistochemical staining showed that transforming growth factor-J31 expression increased, while Golgi matrix protein GM130 expression decreased after cerebral ischemia-reperfusion. Danhong injection was shown to significantly up-regulate the expression of transforming growth factor-131 and GM130, and expres- sion levels peaked at 7 days after reperfusion. At 7 days after cerebral ischemia-reperfusion, Golgi morphology was damaged in untreated rats, while Golgi morphology breakage was not observed after intervention with Danhong injection. These experimental findings indicate that Danhong injec- tion can up-regulate the expression of transforming growth factor-131 and GM130, and maintain Golgi stability, thus playing a neuroprotective role in rats after cerebral ischemia-reperfusion.

急性缺血性脑卒中患者血清钙调蛋白水平与脑梗死面积、NIHSS评分的关系

目的研究急性缺血性脑卒中（Is）患者钙调蛋白（CAM）水平与脑梗死面积、NIHSS评分的关系。探讨CAM值与急性期病情是否呈正相关。方法2012年6月-2014年12月海军总医院急诊科将136例急性Is患者作为观察组，与来院进行体检的136例健康人群作为对照组进行血清CAM值比较，并将观察组患者依据Adamas分类法分为三个亚组：大梗死组（33例）、小梗死组（45例）、腔隙性脑梗死（58例），按NIHSS评分分为NIHSS评分〉5分组（59例）和NIHSS评分≤5分组（77例）两个亚组。分别比较CAM值、NIHSS评分、脑梗死面积。结果观察组患者血清CAM值（188．69±25．25），对照组（87．8±74．12）比较有统计学意义（t=14．48，P〈0．001）；IHSS评分〉5分组CAM（239．21±59．01），NIHSS评分≤5分组（138．33±54．17），不同NIHSS评分组间患者血清CAM值比较有显著差异（t=11．54，P〈0．001）；大梗死组CAM（281．17±51．46），小梗死组CAM（188．65±16．13），腔隙性脑梗死组CAM（128．37±14．40），不同脑梗死面积组CAM值比较有显著差异（F=256．74，P〈0．001）。进一步经Pearson相关分析发现Is患者血清CAM值与NIHSS评分呈正相关（r=0．318，P〈0．005），与梗死面积均呈正相关（r=0．569，P〈0．05）。结论血清CAM值与NIHSS评分、脑梗死面积呈正相关，可作为一重要指标反映IS患者急性期病情的严重性。

不同吸入麻醉方式对局灶性大脑中动脉缺血-再灌注模型制作的影响

目的比较保留自主呼吸的面罩全身麻醉和气管插管呼吸机控制呼吸全身麻醉两种吸入麻醉方式对局灶性大脑中动脉缺血-再灌注大鼠模型制作过程中各项生理参数(血压、pH值、动脉血氧分压和二氧化碳分压、血糖、脑温、直肠温度)以及脑梗死病变的影响。方法采用健康雄性成年SD大鼠制作改良ZeaLonga局灶性大脑中动脉缺血-再灌注模型,室温20～22°C,相对湿度60%。先采用面罩吸入诱导麻醉,随后A组大鼠行气管插管吸入全身麻醉,由呼吸机控制呼吸;B组大鼠施以面罩吸入全身麻醉,保留自主呼吸。监测模型制作过程中大鼠平均动脉血压、动脉血氧分压和二氧化碳分压、pH值、血糖、脑温(皮质、纹状体)和直肠温度的变化;观察再灌注前30min、再灌注后24h和48h的神经功能缺损程度评分,以及再灌注后48h两组大鼠存活率和脑梗死范围的差异。结果动物模型制作过程中两组大鼠不同时限动脉血氧分压和二氧化碳分压、pH值及血糖水平的变化,组间差异无统计学意义(均P>0.05),但A组不同时限平均动脉血压高于B组,差异有统计学意义(均P<0.05);而再灌注前后脑温和直肠温度略低于B组,但差异无统计学意义(均P>0.05)。两组再灌注前30min、再灌注后24h和48h神经功能缺损程度评分和再灌注后48h存活率差异无统计学意义(均P>0.05)。再灌注后48h,A组大鼠梗死体积[(56.70±4.20)%]低于B组[(64.30±3.50)%],差异有统计学意义(t=-5.105,P=0.000)。结论吸入麻醉方式不同对局灶性大脑中动脉缺血-再灌注模型大鼠的脑温、直肠温度、pH值、血糖及动脉血氧分压和二氧化碳分压无明显影响,但可造成大鼠在手术过程中平均动脉血压和梗死范围的差异。

pH值对低温肺保护液减轻体外循环未成熟肺损伤的影响

目的 :观察不同pH值低温肺保护液对体外循环 (CPB)未成熟肺急性肺损伤的保护作用 ,探求最适pH值的低温肺保护液。方法 :实验用幼犬 36只 ,随机分为 6组 :A组 :单纯体外循环组 ;B至F组在体外循环阻断主、肺动脉期间分别用不同pH值的肺保护液进行肺动脉灌注 ,B组～F组pH值分别为 6 .6、7.0、7.4、7.8、8.2。阻断主、肺动脉 6 0min ,再灌注 6 0min后 ,取标本 ,分别采用髓过氧化酶法、硫代巴比妥酸法和硝酸还原酶法测定髓过氧化物酶 (MPO)、丙二醛 (MDA)和一氧化氮 (NO) ,测定肺组织含水量和进行肺组织超微结构观察。结果 :C、D、E、F组的MPO和MDA均较A组明显降低 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1,P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,其中E组最低 ;NO含量明显上升 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1,P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ;肺组织含水量降低 ,其中D、E组相差显著 (P <0 .0 1,P <0 .0 1) ,同时发现灌注组的Ⅱ型上皮细胞、肺血管内皮细胞损伤减轻。结论 :低温肺保护液可减轻体外循环未成熟肺损伤 ,其中pH为 7.8的肺保护液 ,效果最好。

蝮蛇毒蛋白C激活物对全脑缺血再灌注损伤大鼠血液粘度变化的影响

目的:探讨全脑缺血再灌注损伤后外周血液粘度的变化及蝮蛇毒蛋白C激活物(PCA)对其的影响。方法:SD大鼠30只随机分为对照组、全脑缺血再灌注损伤模型组和PCA预处理组。采用三动脉夹闭法复制大鼠全脑缺血再灌注损伤模型,PCA预处理组按0.3mg/100g体重于造模前尾静脉注射PCA,模型组给予等量生理盐水。以锥板式粘度计检测分析各组大鼠全血高切粘度、中切粘度、低切粘度和血浆粘度;用温氏法检测分析各组大鼠红细胞比积(HCT);用干湿重法测脑组织含水量,并比较其差异。结果:全脑缺血再灌组大鼠的全血粘度、血浆粘度、HCT和脑组织含水量均明显高于对照组(P<0.01),PCA预处理组与模型组相比,血液粘度、HCT明显降低(P<0.01),脑组织含水量也有显著下降。结论:蝮蛇毒蛋白C激活物(PCA)降低全脑缺血再灌注损伤引起的血液粘度增加,改善血液流变学特性,减轻脑水肿,具有一定的抗脑缺血再灌注损伤作用。

缺血预处理减轻白细胞致肾急性缺血再灌注损伤的作用

采用家兔急性肾缺血再灌注损伤模型,研究缺血预处理(ischemic preconditioning,IPC)减轻白细胞致肾损伤的作用。实验分:IPC、缺血再灌注(inchemic reperfusion,IR)和对照组。均去右肾,检测在缺血前、缺血60min和再灌注60min、120min时混合静脉血中的白细胞总数和再灌120min时左肾系数(Left renal coefficient,LRC)、肾组织中的白细胞数以及过氧化脂质(Lipid peroxides,LPO)含量,并在光镜下对再灌120min时的肾小管的病理变化进行评分。结果表明:IR组在再灌注120min时,以上指标同对照组和IPC组比较,差异显著(P<0.05～0.01),血中白细胞数与LPO、LRC、肾小管评分的改变呈正相关(P<0.05),肾组织中白细胞数与LRC、肾小管评分呈正相关(P<0.05),IPC组肾组织中白细胞数显著低于对照组(P<0.01)。提示:白细胞在急性肾缺血再灌注损伤中是一个重要因素,IPC具有减轻白细胞所致的肾损伤作用。

大黄素对大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的保护作用

目的探讨大黄素(emodin)对大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的保护作用及其机制。方法健康成年♂SD大鼠24只,随机分为4组:对照组(control)、大黄素组(emodin)、大黄素+格列本脲组(glibenclamide,Gli)和大黄素+5-HD组(5-hydroxydecanoate,5-HD)。通过Langendorff离体心脏灌流技术建立心肌缺血/再灌注模型和描记左室功能;紫外分光光度法测定冠脉流出液中LDH含量及心肌组织中SOD活性和MDA含量;TTC法测定心肌梗死面积。结果 (1)大黄素可明显改善缺血/再灌注后大鼠离体心脏左心室发展压(left ventricular develop pressure,LVDP)、左心室压力最大变化速率(maximal positive and negative velocity of left ventricular pressure,±LVdp/dt max)、左心室舒张末压(left ventricular end-diastolic pressure,LVEDP)和冠脉流量(coronary flow,CF)的恢复;降低冠脉流出液中LDH含量;减少心肌梗死面积;升高心肌组织中SOD活性,减少MDA含量;(2)大黄素对离体心脏缺血/再灌注损伤的保护作用可被非特异性ATP敏感钾通道拮抗剂Gli和线粒体膜ATP敏感钾通道拮抗剂5-HD所取消。结论大黄素可改善离体大鼠心脏缺血/再灌注损伤,此作用可能通过增强心肌的抗氧化能力、激活开放细胞膜与线粒体膜ATP敏感钾通道所实现。

丹龙醒脑片对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的影响

目的研究丹龙醒脑片对大鼠脑缺血再灌注海马区神经细胞凋亡的影响。方法采用大脑中动脉栓塞(MCAO)再通法建立大鼠脑缺血再灌注模型,进行海马区病理组织形态学观察,利用末端标记法(TUNEL),检测海马区神经细胞凋亡的变化。结果与假手术组相比,模型组神经细胞凋亡指数(AI)和凋亡神经细胞积分光密度(IOD)明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05),海马区存活细胞数明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,丹龙醒脑片组神经细胞AI和凋亡神经细胞IOD明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05),海马区存活细胞数明显增多,差异具有统计学意义(P<0.05),病理损害减轻。结论抑制由缺血再灌注损伤诱导的脑神经细胞凋亡可能是丹龙醒脑片脑保护作用的机制之一。

前列地尔对体外培养类缺血再灌注损伤模型视网膜神经节细胞的影响

目的探讨前列地尔对体外培养类缺血再灌注损伤模型视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGC)生长的影响及其作用机制。方法以原代培养SD大鼠RGC为研究对象,将培养的细胞随机分为正常组、模型组、模型+前列地尔组。建立类缺血再灌注损伤模型,模型+前列地尔组在缺血期与再灌注期均加入浓度分别为15μg·L-1、45μg·L-1、135μg·L-1前列地尔。类缺血模型建立后24h、48h、72h应用MTT比色法分别测定各组细胞的吸光度值(A值),确定前列地尔的最佳有效作用浓度与时间;采用荧光定量PCR方法分别测定各组细胞中Bax、Bcl-2的相对表达量。结果 RGC培养48h后,可见RGC伸出突起,随着培养时间的延长,细胞突起变长,部分细胞突起相互连接。使用抗大鼠Thy-1单克隆抗体对RGC进行细胞免疫组织化学检测,可见RGC胞浆及轴突染成棕黄色。模型建立后24h、48h、72h时,与正常组、模型+前列地尔组比较,模型组A值均明显降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05);模型建立后24h时,模型+45μg·L-1前列地尔组A值与正常组差异无统计学意义(P>0.05),而正常组、模型+45μg·L-1前列地尔组与模型+15μg·L-1前列地尔组、135μg·L-1前列地尔组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05),模型+15μg·L-1前列地尔组与模型+135μg·L-1前列地尔组组间差异无统计学意义(P>0.05);模型建立后48h、72h时,正常组、模型+前列地尔组之间A值差异均无统计学意义(均为P>0.05)。正常组Bcl-2的相对表达量为0.999±0.035,模型组为0.657±0.012,模型+45μg·L-1前列地尔组为1.715±0.016(P<0.05);正常组Bax相对表达量为1.001±0.048,模型组为1.712±0.089,模型+45μg·L-1前列地尔组为1.508±0.061(P<0.05)。结论前列地尔对体外培养类缺血再灌注损伤模型RGC具有保护作用;前列地尔可能通过上调细胞内Bcl-2的表达,同时下调Bax的表达,进而发挥细胞保护作用。

大鼠心肌间质缺血再灌损伤及维拉帕米抗缺血再灌损伤作用的实验研究

用15只大鼠作在体心脏缺血再灌模型,研究了心肌间质缺血再灌损伤和维拉帕米抗缺血再灌损伤的作用.实验分3组:A组(缺血再灌组),B组(维拉帕米组)和C组(假手术组).电镜下见A组胶原纤维明显减少,毛细血管基底膜缺损,内皮细胞吞饮小泡减少,间隙增宽;B组胶原纤维减少和毛细血管损伤不明显.超微结构立体计量显示,A组胶原纤维线密度降低(P<0.05).羟脯氨酸测定发现,A组含量减少(P<0.05).结果表明:心肌缺血再灌可致间质损伤,维拉帕米能减轻间质缺血再灌损伤.

盐酸法舒地尔预防体外循环下二尖瓣置换术心肌缺血再灌注损伤效果分析

目的探讨盐酸法舒地尔预防体外循环下二尖瓣置换术心肌缺血再灌注损伤的效果。方法选择2014年1月~2016年12月在我院行择期二尖瓣置换术的患者60例为研究对象,随机分为研究组与对照组各30例。研究组在体外循环心脏停跳液中加入1 mg/kg盐酸法舒地尔注射液,对照组加入等量生理盐水。麻醉诱导成功后切皮前(t1)、体外循环结束时(t2)、体外循环结束后4 h(t3)、体外循环结束后8 h(t4)以及结束后24 h(t5)检测乳酸脱氢酶(LDH)、血浆肌酸激酶同工酶(CK-MB)、血浆肌钙蛋白I(cTnI)。测定心肌细胞凋亡率。结果研究组自动复跳率显著高于对照组,多巴胺显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组在t4及t5时间点LDH显著高于研究组,在t3、t4、t5时间点CK-MB及cTnI水平显著高于研究组,差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组心肌细胞凋亡率为(7.7±1.3)%,对照组为(13.1±2.0)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论体外循环下二尖瓣置换术中使用盐酸法舒地尔可显著减轻心肌缺血再灌注损伤。

三十烷醇对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响

【目的】观察三十烷醇（triacontanol ，TRIA）对心肌缺血再灌注损伤（IRI）的影响。【方法】采用Langendorff灌流装置建立大鼠离体心脏IRI模型。将大鼠随机分为正常组、缺血再灌注（IR）组、不同剂量T RIA＋IR组及T RIA （2．5μg/mL）组。正常组全心持续灌流90 min；IR组平衡灌注30 min ，缺血30 min后再灌注30 min；TRIA＋IR组在缺血前5 min分别给予（25，15，5，2．5）μg/mL TRIA之后处理同IR组；TRIA组平衡灌注30 min后给药5 min ，之后持续灌流30 min。观测各组心率（HR）、冠脉流量（CF）、左室内压（LVP）和左室内压变化最大速率（± dp/dtmax），测定冠脉流出液中肌酸激酶（CK）释放量。【结果】与正常组比较，IR组引起明显的心功能损伤，表现为再灌注期间 HR、CF、LVP、± dp/dtmax降低以及CK释放量增加；心脏灌注不同剂量TRIA（25，15，5，2．5μg/mL）5 min可加重IRI所致心功能损伤，甚至心脏停跳，表现为LVP、± dp/dtmax进一步降低，CF显著减少，HR减慢以及CK释放量增加；单独灌注TRIA（2．5μg/mL）对大鼠心功能也有明显抑制作用，抑制作用持续30 min不能恢复。【结论】离体大鼠心脏灌流 T RIA可抑制心功能及加重心肌IR后心功能的损伤。