酯酶同工酶IEF电泳及香菇品种鉴别

本研究旨在建立一种鉴别香菇品种的高效、高分辨率方法，即聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦同工酶电泳法，并利用此方法对28个香菇品种进行检测。实验结果表明，不同香菇品种均有基础酶带的存在，但不同品种间在酶带条数，pI值及酶活性上有差异。

A Novel and Optimized Method for Electro-focusing and Moving Neutralization Reaction Boundary Formed by HCl and NaOH

A novel method is developed for electro-focusing and moving neutralization reaction boundary (MNRB) created with HCl and NaOH. The optimized conditions are screened out. By using this method, the experiments are performed on MNRB formed with HCl and NaOH in agarose gel. The experiments are quantitatively in coincidence with the predictions with the theory of moving chemical reaction boundary (MCRB).

聚丙烯酸分离纯化苦瓜种仁碱性蛋白的方法及影响因素

以苦瓜籽为材料，研究了聚丙烯酸分离纯化苦瓜种仁碱性蛋白的方法及影响因素。等电点沉淀试验表明，柠檬酸、盐酸分别调节苦瓜种仁粗提液pH至6．0、4．0时，各有14．62％和32．49％的苦瓜种仁蛋白被沉淀。醋酸的等电点沉淀作用呈现阶段性特点，pH6．0和4．0时分别有26．17％和38．72％的苦瓜种仁蛋白被沉淀。醋酸、盐酸和柠檬酸处理的1mL苦瓜种仁粗提液（pH4．0），1％PAA选择性沉淀碱性蛋白（等电点pI为8，65～9．30）的最佳用量分别为100μL、120μL和100μL。醋酸调节苦瓜种仁粗提液pH分别至5．0、4．0和3．0，等电点沉淀后的上清液用PAA沉淀碱性蛋白，当PAA（1％）用量为160μL/mL提取液时，pH5．0和3．0样液分别有33．77％和43．56％蛋白质被沉淀；当PAA用量为120μL/mL提取液时，pH4．0样液中30.83％蛋白质被沉淀。PAA-蛋白质复合物溶解于碱性溶液（pH〉9．0），当溶液NaCI浓度为3．0％时，溶液蛋白质浓度最高。PAA选择性沉淀的苦瓜种仁碱性蛋白经SephadexG-75柱层析分离，分别在175min和300min出现主峰Ⅰ和Ⅱ。SDS-PAGE和IEF分析表明主峰Ⅰ的分子量约为30kD，pI值约为9.5，主峰Ⅱ的分子量约为10kD,pI值约为9.3。

上海地区胃癌病人运铁蛋白(Tf)、组特异性成分(Gc)、α_1-抗胰蛋白酶(α_1-AT)亚型分布的研究

用薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳分析了上海地区202例汉族胃癌病人及202例正常对照组的运铁聋白(Tf)和α_1-抗胰蛋白酶(α_1-AT)亚型的分布,发现胃癌组Tfc_1c_1纯合子频率(0.3713)和Tfc_1基因频率(0.5718)显著低于对照组(分别为0.5149和0.6782),均为p<0.01,胃癌组Tfc_2c_2纯合子频率(0.2228)和Tfc_2基因频率(0.4019)显著高于对照组(分别为0.1436,p<0.05和0.2970,p<0.01),胃癌组和对照组的α_1-抗胰蛋白酶亚型分布无显著差异。用薄层聚丙烯酰胺等电聚焦结合免疫固定分析了上海地区200例汉族胃癌病人和200例正常对照组的组特异性成分(Gc)亚型分布,发现胃癌组Go1F表型频率(0.22)和Gc1F基因频率(0.4375)均显著高于正常对照组(分别为0.14和0.3600,均为p<0.05)。

由强反应电解质形成的移动化学反应界面:理论(英文)

在“沉淀反应前缘”（precipitatereactionfront）概念和“静止中和反应界面”概念的基础上，提出了由强反应电解质形成的移动化学反应界面的概念，推导出一系列相关的移动和静止化学反应界面方程.理论结果显示：（1）“沉淀反应前缘”的概念在本质上相当于，但不等同于移动化学反应界面的概念；（2）移动化学反应界面的概念在本质上不同于移动界面系统的概念，既使前者的方程在形式上非常相似于和对称于后者的方程（此方程在40－50年代形成，在等速电泳或置换电泳中具有重要的应用）。

红细胞和血痕酸性磷酸酶(EAP)表型及广东人群EAP基因频率的调查

本文采用薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳检测红细胞及血痕酸性磷酸酶表型,并对不同条件下的血痕标本进行检测,发现室温下(15～33℃)保存的110例纱布血痕7周内可全部正确分型,21例磁板血痕9周内均可正确分型;含血量≥5λl 的血痕可被正确检出 EAP 表型;日晒、水洗、发霉等因素可影响血痕 EAP 型的正确检出。同时调查了广东人群的 EAP 表型分布,基因频率为 p^a=0. 2338,p^b=0. 7662,发现 EAP 基因频率分布存在着地区差异。

基于微阵列聚焦电泳的糖尿病血样临床阳离子交换高效液相色谱图中血红蛋白A_(3)峰位置推测

血红蛋白A_(1c)(HbA_(1c))是糖尿病诊断的关键生物标志物,目前其常用的分析方法为阳离子交换高效液相色谱法(CX-HPLC,5/50 mm分离柱),此方法虽然具有稳定、快捷与自动化等众多优点,但临床CX-HPLC(VARIANTⅡsystem)谱图中仍存在未知峰,尤其干扰HbA1c准确测定的谷胱甘肽化血红蛋白A_(3)(HbA_(3))在色谱图中的相对位置仍不清楚。针对这一问题,该文以人新鲜血液为样本,首先利用低分辨CX-HPLC对血样进行分析,提示未知峰P3存在。然后通过微阵列等电聚焦(IEF)电泳和高分辨阳离子交换HPLC(Mono-S 5/50 mm分离柱)对血样的主要血红蛋白(Hb)成分进行分析,提示未知峰P3为HbA3峰。随后,通过血红蛋白谷胱甘肽化实验,利用HbA_(1c)峰降低、HbA_(3)峰明显增强这一信息,进一步推测未知峰P3即是HbA_(3)峰,其在CX-HPLC中的保留时间在1.50 min左右。最后,结合前期研究讨论了体内应激情况下Hb谷胱甘肽化对HbA_(1c)检测的影响。该研究丰富了CX-HPLC的未知峰P3的色谱信息,为更精准诊断糖尿病提供了有价值的参考。

毛细管等电聚焦电泳(cIEF)及其理论模拟计算新进展

等电聚焦电泳(IEF)是一种在一个pH梯度内操作的特殊电泳。IEF是表征蛋白质电荷不均一性的强有力工具。在一个pH梯度内,酸碱两性物(例如蛋白质)在电场的作用下会被分离,并最后在pH梯度内pH值与两性物等电点(pI)值相等的地方被聚焦成很窄的区段。IEF的分辨率在所有基于电荷的分离技术中是最高的。薄层凝胶IEF从它在上世纪70年代初被发明的时间起就成为在生物实验室被广泛应用的分析技术。但薄层凝胶IEF的主要问题是不能做定量分析,全靠手工操作及分析速度低。当毛细管IEF(cIEF)在1985年被报道时,科学家们就都立即认为cIEF能够克服IEF所有的问题。虽然cIEF看起来有很多优势,但是20多年后的今天它并没有被生物实验室广泛接受为薄层凝胶IEF的替代技术。究其原因是使用通用毛细电泳仪器的cIEF在操作上有很多困难。这种技术在IEF过程后还需要一个额外的移动过程来把聚在毛细管分离柱内的蛋白质区段推到检测器的检测点。这是由于这些毛细电泳仪器都是使用单点检测器。检测点都是靠近毛细管的一端。这个移动过程破坏IEF的高分辨率,降低重现性并使得分析速度变慢,造成在方法的优化上耗很多时间。全柱检测cIEF是在1992年提出的。该技术结合了凝胶IEF及毛细管分离的全部优点;如定量和自动化。它的分离速度大大提高。本文简单综述cIEF对不同生物实验室样品的应用。这些样品包括单克隆抗体,重组蛋白质,蛋白质复合物及失活病毒。最后,本文简述cIEF理论模拟计算的新进展。