土茯苓二氢黄酮醇类成分研究

目的 :研究土茯苓的化学成分。方法 :用硅胶、大孔树脂、ODS柱色谱及HPLC方法进行分离纯化 ,根据理化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果 :分离鉴定了 5个二氢黄酮醇苷类化合物 ,分别为落新妇苷 (1) ,新落新妇苷 (2 ) ,异落新妇苷 (3) ,新异落新妇苷 (4 ) ,(2R ,3R) 花旗松素 3′ O β D 吡喃葡萄糖苷 (5 )。 结论 :化合物 2 ,4 。

土茯苓中二氢黄酮醇甙的研究

从土茯苓根茎中分出３个二氢黄酮醇甙，经理化常数和波谱分析，鉴定为异黄杞甙，异落新妇甙，落新妇甙。利用二维核磁共振相关谱对其信号进行了全面归属，并首次确定了甙键构型。

异落新妇甙的结构研究

从百合科菝葵属植物土茯苓（ＳｍｉｌａｘｇｌａｂｒａＲｏｘｂ．）根茎的乙醇提取物中分得一个新的天然化合物（Ｉ），命名为异落新妇甙（ｉｓｏａｓｔｉｌｂｉｎ）。根据元素分析，ＵＶ，ＩＲ，￣１Ｈ－ＮＭＲ，￣（１３）Ｃ－ＮＭＲ，２ＤＮＭＲ及ＦＡＢ－ＭＳ，确定化合物Ｉ的结构为５，７，３＇，５＇－四羟基二氢黄酮醇－３－Ｏ－α－Ｌ－鼠李糖甙。

异落新妇苷抗痛风活性研究

目的利用痛风动物模型对异落新妇苷(IA)抗痛风活性及作用机制进行研究。方法关节腔内注射尿酸钠(MSU)建立痛风性关节炎大鼠模型,通过踝关节肿胀变化及炎症相关因子测定,评价异落新妇苷抗痛风性关节炎活性;腹腔注射氧嗪酸钾建立高尿酸血症小鼠模型,通过血尿酸(UA)含量,黄嘌呤氧化酶(XOD)活性测定,评价异落新妇苷抗高尿酸血症活性。结果异落新妇苷治疗显著降低了痛风性关节炎大鼠关节肿胀5.7%以上,同时炎症因子IL-1β、IL-8、MCP-1、IFN-γ显著降低(P <0.05),并能有效的降低炎症细胞浸润;同时异落新妇苷治疗显著降低了高尿酸血症小鼠血清UA 25.8%以上和XOD活性12.9%以上。结论异落新妇苷可以通过降低炎症水平实现对痛风性关节炎的抑制,并通过抑制XOD活性,降低血UA水平实现抗高尿酸血症活性。

高效液相色谱法同时测定利湿通淋颗粒中4种主要成分的含量

目的建立利湿通淋颗粒中4个主要成分（落新妇苷、异落新妇苷、黄杞苷和去乙酰基车叶草苷酸）同时定量测定的高效液相色谱检测方法。方法采用依利特C18柱,流动相为甲醇-乙腈（3：2）（A）和0.1%冰醋酸溶液（B）,梯度洗脱,流速为1.0 m L·min-1;柱温为25℃;检测波长λ1=290 nm（检测落新妇苷、异落新妇苷和黄杞苷）,λ2=230 nm（检测去乙酰基车叶草苷酸）。结果落新妇苷、异落新妇苷、黄杞苷和去乙酰基车叶草苷酸的线性范围分别为7.17-143.40μg·m L-1（r=0.9998）、4.96-99.20μg·m L-1（r=0.9994）、6.05-121.00μg·m L-1（r=0.9997）和5.48-109.60μg·m L-1（r=0.9996）;4种成分的平均加样回收率（n=6）分别为98.7%、99.0%、96.9%、99.3%,RSD分别为1.1%、1.5%、1.3%、1.6%。结论该方法简便、准确、重复性好,可用于利湿通淋颗粒的质量控制。

异落新妇苷通过调节NLRP3炎症小体和NF-κB信号通路减轻尿酸钠诱导的小鼠急性痛风性关节炎机制研究

[目的]基于NOD样受体蛋白3(NOD-like receptor pyrin domain 3,NLRP3)炎症小体和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路,研究异落新妇苷(isoastilbin,IA)对小鼠急性痛风性关节炎模型的抗炎作用及机制。[方法]通过关节腔注射尿酸钠(monosodium urate,MSU)混悬液,建立小鼠急性痛风性关节炎模型,以自制足趾容积测量装置测定踝关节肿胀度;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法观察踝关节炎性浸润情况;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测踝关节中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的水平;免疫印迹法检测踝关节中NLRP3炎症小体和NF-κB信号通路中相关蛋白的表达情况。[结果]踝关节注射MSU混悬液诱导小鼠产生急性痛风性关节炎。与正常组比较,模型组小鼠踝关节肿胀率明显升高(P<0.01),炎性浸润增加,IL-1β、IL-6、TNF-α分泌水平显著增高(P<0.01),NLRP3炎症小体和NF-κB信号通路相关蛋白表达增加(P<0.01)。与模型组比较,IA具有较强的抗炎效果,剂量依赖性地降低小鼠踝关节肿胀率(P<0.05,P<0.01),减轻炎性浸润情况,减少相关炎症因子的分泌(P<0.01),下调NLRP3炎症小体和NF-κB信号通路相关蛋白表达(P<0.01)。[结论] IA对小鼠急性痛风性关节炎模型表现出较强的抗炎效果,其机制与调节NLRP3炎症小体和NF-κB信号通路相关。

一测多评法同时测定土茯苓配方颗粒中5种成分的含量

目的 建立一测多评法同时测定土茯苓配方颗粒中5种化学成分的质量分数。方法 采用UPLC法,以乙腈-0.2%乙酸溶液为流动相进行梯度洗脱;柱温为30℃;检测波长为291 nm;流速为0.4 mL/min。以落新妇苷为内标物,分别建立其与新落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷、黄杞苷的相对校正因子和相对保留值,并计算各成分的质量分数,同时与外标法测定结果对比,验证所建立方法的可行性和准确性。结果 土茯苓配方颗粒中5种成分在各自规定的质量浓度范围内线性关系良好(r^(2)>0.999),平均加样回收率范围为93.44%~106.45%,RSD范围为0.96%~2.00%。新落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷、黄杞苷的相对校正因子分别为0.988、0.869、0.965、0.946,相对保留时间分别为0.92、1.21、1.28、1.37,耐用性较好,4种成分的一测多评法与外标法测定结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论 建立的一测多评法准确稳定,可用于土茯苓配方颗粒中5种成分的含量测定。

基于提取温度控制的土茯苓配方颗粒溶化性改善策略研究

目的通过降低提取温度改善土茯苓Smilacis Glabrae Rhizoma提取物及其配方颗粒的溶化性。方法分别采用回流提取、煮开后80℃水浴浸提、直接80℃水浴浸提、煮开后70℃水浴浸提、直接70℃水浴浸提5种方法制备土茯苓提取物并对各提取物的溶化性进行分析,同时考察5种提取方法对土茯苓提取物的特征图谱、多糖与淀粉含量、出膏率、落新妇苷含量及转移率的影响。结果上述5种方法制备的提取物中不溶物含量分别为34.93%、26.67%、24.48%、29.65%、4.03%,与回流提取相比其余4种提取方法均能改善土茯苓提取物的溶化性,其中直接70℃水浴浸提对溶化性改善最明显。不同提取方法制备的土茯苓提取物的特征图谱无明显差异,表明其质量稳定。相比于回流提取,直接70℃水浴浸提的土茯苓提取物的淀粉含量降低了11.74%;落新妇苷含量(38.6 mg/g)及其转移率最高(60.95%)。结论采用70℃水浴浸提法可显著改善土茯苓配方颗粒的溶化性。

黄杞叶中黄酮类化学成分的研究

目的研究黄杞(Engelhardtia roxburghiana wall.)叶的化学成分。方法黄杞叶经溶剂提取和萃取粗分后,用硅胶柱色谱法分离单体成分,用1H-NMR,13C-NMR,MS等方法鉴定结构。结果从黄杞叶中分离并鉴定了13个化合物:花旗松素(1),5,7,4'-三羟基二氢黄酮(2),山柰酚(3),二氢山柰酚(4),槲皮素(5),异黄杞苷(6),黄杞苷(7),落新妇苷(8),异落新妇苷(9),山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(10),5,7-二羟基色原酮-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(11),5-羟基-3,7,3',4'-四甲氧基黄酮(12),槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(13)。结论化合物2,4,9,11,12为首次从该植物中分离得到。

基于响应面和G1-熵权法优选彝药痛风颗粒提取工艺及其药效评价

目的 优选彝药痛风颗粒(Yi Medicine Tongfeng Granules,YMTG)的提取工艺,并探索其对痛风性肾病的作用,为其新药的开发与利用提供科学依据。方法 采用主客观组合赋权和响应面法设计,以加水倍数、浸泡时间、提取时间、提取次数为考察因素,新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、虎杖苷、新落新妇苷、落新妇苷、异落新妇苷8种指标成分提取率及出膏率为评价指标,优选YMTG的最佳水提工艺,并以痛风性肾病模型进行药效评价。结果 优选YMTG最佳提取工艺为加12倍水、浸泡60 min、煎煮3次,每次煎煮80 min;药效结果表明,YMTG可降低痛风性肾病模型大鼠血液中尿酸质量浓度、增加尿酸排出量和尿酸清除率,降低血液中血清肌酐、尿素氮水平,减轻肾脏损伤。结论 优选的YMTG提取工艺稳定可行,其对痛风性肾病有良好的作用。

土茯苓解重金属铅毒性物质基础的初步研究

目的探究土茯苓解重金属铅毒性的活性物质。方法以"总提取物-有效萃取部位-有效部位及有效成分"顺序逐一追踪解毒活性成分的研究思路,以急/慢性铅致小鼠毒性为动物模型,以铅含量、生化指标及组织形态学检测结果为指标,确认土茯苓解铅毒的活性部位。依据文献及前期化学研究基础,采用高效液相色谱(HPLC)法对活性部位进行主要成分分析。结果急性铅中毒实验结果显示,与模型组相比,土茯苓总提物组和醋酸乙酯组小鼠血液、肝和肾脏中铅含量显著降低(P<0.05);血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量有所降低(P<0.05),谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性有不同程度提高(P<0.05);小鼠肝和肾损伤程度均有改善。慢性铅中毒实验结果显示,与模型组相比,土茯苓总黄酮低、中、高剂量组小鼠血液、肝和肾脏铅含量均有下降(P<0.05),且呈剂量相关性;小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(alanineaminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)活性和肌酐(creatinine,Cr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平均有不同程度地降低(P<0.05),并以土茯苓总黄酮高剂量组最为显著;小鼠肝和肾损伤程度均有所改善,且土茯苓总黄酮高剂量组组织结构趋近正常。新落新妇苷、落新妇苷、花旗松素、新异落新妇苷、异落新妇苷和黄杞苷6个黄酮类化合物为总黄酮部位的主要成分,占总黄酮的58.89%。结论土茯苓醋酸乙酯部位对铅致小鼠急性毒性有显著解毒作用,且醋酸乙酯部位优于总提物,提示醋酸乙酯部位为土茯苓解铅毒的有效萃取部位;土茯苓总黄酮具有较好的排铅作用,对铅诱导的肝、肾功能损伤具有一定的保护作用,且呈剂量相关性,提示总黄酮为土茯苓解重金属铅毒的活性部位。土茯苓总黄酮主要由新落新妇苷、落新妇苷、花旗松素、新异落新妇苷、异落新妇苷和黄杞苷6个黄酮类化合物组成,提示上述化合物可能为土茯苓解铅毒的活性成分。

基于双波长融合HPLC图谱的银屑病外用方中7种活性成分定量分析

目的:测定银屑病外用方中7个主要活性成分(新落新妇苷、落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷、黄杞苷、异黄杞苷、柠檬苦素)含量。方法:采用Waters Xbrige BEH C;色谱柱(150 mm×4.6 mm,3.5μm),以水(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱(0~5 min,17%B;5~10 min,17%B→20%B;10~15 min,20%B;15~25 min,20%B→100%B),流速1.0 mL·min^(-1),柱温30℃,进样量5μL,检测波长为292 nm(0~19 min,新落新妇苷、落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷、黄杞苷、异黄杞苷)、210 nm(19~25 min,柠檬苦素),使用MATLAB软件编程,对CSV格式数据进行双波长融合。结果:新落新妇苷、落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷、黄杞苷、异黄杞苷和柠檬苦素线性范围分别为39.06~1250μg·mL^(-1)(r=0.9999)、26.25~840μg·mL^(-1)(r=0.9997)、18.64~596.4μg·mL^(-1)(r=0.9998)、6.31~202μg·mL^(-1)(r=0.9996)、2.53~80.8μg·mL^(-1)(r=0.9998)、1.33~42.6μg·mL^(-1)(r=0.9997)和5.08~162.4μg·mL^(-1)(r=0.9996),平均加样回收率(n=6)为96.1%~102.2%,RSD为0.48%~1.7%。银屑病外用方自制及医院提供的样品中新落新妇苷、落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷、黄杞苷、异黄杞苷和柠檬苦素的含量分别为1.06、1.21、0.87、0.30、0.09、0.07、0.22 mg·mL^(-1)和0.35、0.32、0.17、0.08、0.04、0.03、0.21 mg·mL^(-1)。结论:该方法能够快速、准确地测定银屑病外用方中7个活性成分含量,可用于银屑病外用方的质量控制。

土茯苓黄酮类成分一测多评方法的建立及含量变化规律研究

目的建立土茯苓Smilax glabra中新落新妇苷、落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷和黄杞苷的一测多评测定方法(QAMS)并研究不同生长年限土茯苓中各成分含量的动态变化规律。方法采用高效液相色谱法,以土茯苓中的落新妇苷为内参物,计算该成分与新落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷和黄杞苷的相对校正因子,用获得的相对校正因子计算各指标成分的含量并与外标法的测定结果进行对比,考察方法的准确性和可行性。采用建立的QAMS法测定不同生长年限土茯苓中各指标成分的含量,研究其动态变化规律。结果共测定不同生长年限样品5批23份,各指标成分一测多评法与外标法计算结果偏差均小于1.0%。各指标成分含量与生长年限具有一定相关性,落新妇苷的含量与生长年限呈负相关,新落新妇苷、新异落新妇苷和异落新妇苷的含量与生长年限呈正相关,两者的变化趋势相反。结论建立的QAMS法准确、可靠,可用于土茯苓中5个成分的定量分析。生长年限对土茯苓中4种落新妇苷类成分含量均具一定影响。