蛋清卵黏蛋白提取工艺优化

卵黏蛋白是鸡蛋清中具有抗菌、降胆固醇及免疫活性的蛋白质。该文以新鲜鸡蛋清为原料,通过盐析沉淀法和等电点法结合提取卵黏蛋白,采用响应面法优化提取工艺。结果表明:蛋清中提取卵黏蛋白的最佳工艺条件为NaCl溶液浓度1.5 mol/L,以4倍蛋清体积的NaCl溶液,调节蛋清pH值至5.5,离心40 min,取沉淀重悬,在上述相同离心条件下再次离心并冻干沉淀得到卵黏蛋白,提取率为54.48%,纯度为94.26%。

三种酸性蛋白酶等电点测试方法的比较

采用Zeta电位法、沉淀法和等电聚焦电泳(IEF)法测定了不同来源的四种酸性蛋白酶的等电点(pI),并比较了这三种方法用于测量酸性蛋白酶pI的优缺点。结果表明:Zeta电位法适用于检测各种酸性蛋白酶,但需要指出的是,对于工业级酶制剂,该方法获得的pI值是其各组分pI值的综合结果;沉淀法难以观察到高溶解度蛋白酶的pI沉淀现象,但使用粒径分析仪检测酶溶液的粒径变化情况可以获得准确的pI;IEF法能准确分析pI大于3的酸性蛋白酶,但有些酸性蛋白酶制剂的酶蛋白组分的pI小于3,因此该方法不适用于检测所有的酸性蛋白酶。

鱼糜废水中蛋白质等电沉淀的规律研究

为寻找鱼糜废水中鱼浆蛋白的优化回收方法,实现鱼糜废水净化及蛋白回收再利用的双重目的,对鱼糜废水中蛋白质的等电沉淀规律进行了研究。在初步了解鱼糜废水中蛋白成分性质的前提下,考察了不同pH、酸种类、离子强度下的蛋白质沉淀规律,并尝试采用分级等电沉淀方法提高蛋白总回收率。结果表明,鱼浆蛋白成分的等电点主要密集分布在4.3和5.9两个位置;多元酸的沉淀效果较优,离子强度提高也有促进蛋白沉淀作用;分级等电沉淀可将蛋白总回收率从传统方法60%左右高至74.36%。本研究所做的基础研究及提出的分级等电沉淀技术思路,将为蛋白沉淀回收技术基础理论的丰富和思路的开拓提供有益补充。

酪蛋白质量分数作为乳品掺假检验指标的探讨

论述了我国乳品掺假的原因、方式和危害,以及掺假鉴定的必要性和重要性,分析了酪蛋白是牛乳中的特征性成分,根据乳品中酪蛋白占乳蛋白的质量比例(即酪蛋白质量分数)一般会稳定在77%～78%左右,提出了酪蛋白质量分数≥73%,可以作为乳品掺假检验的定量指标,探讨了国内外酪蛋白定量检测方法的研究现状。结果表明,等电点沉淀法无疑是一种适合我国国情的、操作简单的酪蛋白检验方法,对防治乳品掺假具有重要的现实意义,并通过分析提出了该检验方法所需研究的内容。

米渣酶解工艺及其蛋白等电点测定

以米渣为原料,按照生物酶工程技术,先对米渣进行适度酶解,确定用复合胰蛋白酶进行限制性酶解,其工艺条件为:酶量1%,温度50℃,固液比1∶5(W/V),pH8,酶解时间3h;利用酸碱沉降法对米渣酶解物的等电点进行了连续细化测定,其结果为:米渣蛋白液在不同pH下的沉淀曲线中出现两个明显波峰,说明至少存在两种不同等电点的蛋白质,在等电点为2.8时,其最大沉淀率和提取度分别为31.70%和19.02%;而在等电点为8.6时,其最大沉淀率和提取度则分别为17.78%和10.67%,该结果为进一步研究米渣蛋白的提取和改性工艺提供了重要的参考。

南极磷虾蛋白质提取条件优化

南极磷虾是地球上多细胞生物中生物量最大的单种生物资源之一。南极磷虾因其巨大的生物资源量及潜在的应用价值而受到广泛关注。本文以冷冻南极磷虾为原料,优化了南极磷虾蛋白质的提取条件。在单因素实验的基础上,通过响应面优化实验研究了离心时间、料液比、匀浆时间等对南极磷虾蛋白质得率的影响。结果表明,南极磷虾蛋白质较佳的提取条件为:碱溶阶段p H 11.5,酸沉阶段p H 5.5,离心温度4℃,离心转速10000 rpm,离心时间10 min,料液比1∶3(w/v),匀浆时间3.0 min;在以上提取条件下的南极磷虾蛋白质得率为10.81%。

脱脂麦胚中谷胱甘肽与麦胚蛋白提取

对脱脂麦胚中谷胱甘肽(GSH)和麦胚蛋白的提取进行研究。首先采用低pH值条件从脱脂麦胚中提取谷胱甘肽,并采用超滤将该提取液中的谷胱甘肽与蛋白质进行分离。再对提取过GSH后的麦胚残渣中的蛋白质进行碱提研究。最后合并超滤分离出的蛋白质与碱提蛋白质,采用等电点沉淀法对麦胚蛋白进行纯化制备。采用单因素试验结合正交试验分别对GSH和麦胚蛋白的提取工艺进行优化,并最终确定GSH最佳提取工艺为提取pH6.3、提取时间15min、固液比1:13(g/mL)、提取温度55℃,GSH的得率和提取率分别为0.31%和72.1%。麦胚蛋白的最佳提取工艺为提取pH10.5、提取温度65℃、固液比1:11、提取时间60min。提取蛋白质相对于碱提用沉淀的得率为39.2%,提取率为90.4%。相对于总麦胚得率为20.8%,提取率为58.8%。合并超滤截留液与碱提离心上清液,确定沉淀蛋白质最佳pH4.2,蛋白质沉淀率为97.5%,所得蛋白质含量达85.2%,相对于脱脂麦胚中总蛋白质提取率为81.1%。

不同等电点沉淀法和超速离心法提取牛奶乳清蛋白的双向电泳分析

为探索牛奶乳清蛋白提取的最适方法,以生鲜荷斯坦牛奶为对象,采用不同等电点(pH 4.6和pH 4.8)沉淀法和超速离心法提取牛奶乳清蛋白样品,并对提取效果进行双向凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)图谱分析。依据凝胶图谱上蛋白斑点比较图谱质量,采用PDQuest 8.0凝胶图像分析软件进行凝胶图谱分析。结果显示:2种方法均能有效提取牛奶乳清蛋白,且获得的2-DE凝胶图谱背景清晰、蛋白点个体独立、无明显的拖尾现象,且重复性强,但都存在一定的酪蛋白残留。与超速离心法相比,pH 4.6沉淀法和pH 4.8沉淀法提取乳清蛋白的2-DE凝胶图谱可检测到较多的蛋白质斑点。pH 4.6沉淀法提取乳清蛋白制备的2-DE凝胶图谱中蛋白点的表达丰度略高于pH 4.8沉淀法。研究表明:pH 4.6沉淀法提取乳清蛋白制备2-DE凝胶图谱略优于pH 4.8沉淀法和超速离心法。但2种等电点沉淀法和超速离心法都可有效去除牛奶中的高丰度酪蛋白,提高低丰度蛋白的检出敏感性。

酸/碱溶解-等电点沉淀法回收罗非鱼蛋白的工艺优化及蛋白组成分析

以罗非鱼(Oreochromis niloticus)肉为原料,采用酸/碱溶解-等电点沉淀法回收罗非鱼肌肉蛋白,主要探讨溶解p H值、料液比和溶解时间对可溶性蛋白得率以及沉淀p H值对可溶性蛋白沉淀得率及蛋白亚基组成的影响.结果表明,酸/碱溶解回收罗非鱼肉可溶性蛋白的最佳p H值为p H2.0、3.0、11.0和12.0,料液比1∶9(ω/v),溶解时间10 min,可溶性蛋白种类齐全,包含了典型的鱼蛋白电泳条带;酸/碱可溶性蛋白的最佳沉淀条件为p H 5.5,在此条件下,溶解-沉淀过程的蛋白得率分别为61.59%-64.95%.与鱼肉蛋白相比,四种分离蛋白中盐溶性蛋白的比例均升高,水溶性蛋白的比例均降低(p<0.05).比较而言,碱溶-等电点沉淀过程中鱼蛋白的变性程度较小,其水溶性组分和盐溶性组分所占的比例均较高,组成相对比较齐全,而酸提蛋白中肌球蛋白重链部分降解,少量肌浆蛋白损失.因此,碱溶-等电点沉淀法更有利于回收鱼肉分离蛋白.

小麦胚芽球蛋白的提取及功能性质研究

球蛋白是小麦胚芽蛋白中最主要的两种蛋白组分之一,也是深度开发和利用小麦胚芽蛋白资源深加工产品—分离蛋白的主要组分。主要研究了小麦胚芽球蛋白的提取及其功能性质,结果表明:采用盐提酸沉的方法分离提取小麦胚芽球蛋白是切实可行的,所得产品的纯度可达82%;并且发现使用0.5 mol/L NaCl提取小麦胚芽球蛋白的得率最高。小麦胚芽球蛋白的等电点pH在4.0左右,其溶解度整体偏低。脱脂小麦胚球蛋白的吸油性大大优于大豆分离蛋白;脱脂小麦胚球蛋白的起泡性和泡沫稳定性以及乳化性均劣于大豆分离蛋白,但乳化稳定性略却好于后者。

酸碱处理对鱼肉蛋白凝胶特性影响的研究进展

我国鱼肉产量巨大,消费量也持续快速增长,但目前国内鱼肉精深加工技术落后,资源浪费严重。与传统加工处理相比,酸碱处理作为一种新型的肌肉蛋白提取和加工技术,不仅能提高蛋白回收率,还能改变蛋白构象,改善蛋白加工特性,提高产品附加值。本文概述酸碱处理对热诱导的鱼肉蛋白凝胶的强度、颜色和保水性等加工特性的影响,探讨了经过酸碱处理后肌球蛋白构象的变化,展望了酸碱处理在鱼肉精深加工领域的应用前景,为鱼肉制品品质改善和新产品研发提供科学依据。

采用酸碱提取法对鲢肌肉蛋白分离特性的影响

对酸处理和碱处理过程中鲢肌肉蛋白质的分离特性,包括蛋白质溶解度、回收率和匀浆黏度等进行了比较研究。结果表明:当pH为1.5～12.5时,普通肉溶解蛋白(Solution ordinary muscle protein,SMP-1)与血合肉溶解蛋白(Solution dark muscle protein,SMP-2)溶解度的变化规律无明显差别,酸处理的最大溶解度均在pH为2.5下,碱处理的最大溶解度均在pH为11.5～12.5下,两者等电点均在pH为5.5下;普通肉匀浆(Ordinary muscle homogenate,OMH)和血合肉匀浆(Dark muscle homogenate,DMH)的黏度均随溶解度的增加而增加,但OMH黏度要高于DMH;采用酸碱处理法的蛋白质回收率都非常高,IMP-1最高能达到90.5%,IMP-2也能达到89.5%。

超声波协同等电点沉淀法提取螺旋藻藻胆蛋白工艺的优化

以螺旋藻粉为原料,通过正交试验,对超声波细胞破碎及等电点沉淀提取藻胆蛋白进行研究,并优化其工艺条件。结果表明,在藻液质量分数5%、630W(额定功率为900W)条件下超声20min,效果最佳;而采用冰醋酸作为等电点沉淀介质,在pH4.0的条件下,从提取液中低温沉淀藻蛋白,其操作较为简便。由于冰醋酸溶液易挥发分离,简化了生产工艺。最后通过冷冻干燥,得到粗蛋白粉末。利用本法优化工艺后,提取液中藻蓝蛋白的含量高达4.36%;而经沉淀干燥得到的粗蛋白粉末得率为52.5%,其中藻蓝蛋白含量为7.7%、别藻蓝蛋白含量为7.9%、藻红蛋白含量为0.8%。

饮料中提取酪蛋白的方法选择

目的探索4种沉淀蛋白质的方法在提取饮料酪蛋白过程中对其复溶率的影响,为建立超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法鉴别饮料中酪蛋白亚型及相应含量的测定寻找最佳前处理方法。方法选取乳粉、以乳粉或牛乳为原料的饮料、添加酪蛋白或酪蛋白酸钠的饮料作为测试样品,用pH 8.5的Tris-HCl溶液溶解,采用等电点沉淀法、乙腈沉淀法、丙酮沉淀法和乙醇沉淀法提取样品中的蛋白质,低温离心后对沉淀的蛋白质进行复溶,用考马斯亮蓝法分别测定沉淀前和复溶后样品溶液中可溶性蛋白质的含量,计算类酪蛋白的复溶率。结果乳粉和3类饮料中的酪蛋白经等电点沉淀法提取后,乳粉的类酪蛋白复溶率在64.95%~66.20%之间,3种饮料中的类酪蛋白复溶率在69.73%~84.95%之间,等电点沉淀法优于其他3种沉淀方法。αs-酪蛋白标准物质和β-酪蛋白标准物质的复溶率分别为70.16%和87.17%,且经高分辨质谱确证其复溶后的主成分为酪蛋白。另外对45种含酪蛋白饮料中的类酪蛋白含量进行了测定,其含量在0.10~42.36 mg/g(mg/mL)之间。结论等电点沉淀法提取类酪蛋白的复溶率较其他3种沉淀方法相对稳定,为饮料中酪蛋白的亚型鉴别及相应含量测定提供了回收率较高的前处理方法,为今后测定酪蛋白含量的液相质谱法的研究奠定了较好基础。

壳聚糖絮凝回收分级等电沉淀后鱼糜漂洗水中蛋白质

为实现鱼糜漂洗水中蛋白质的洁净回收,同时达到净化鱼糜漂洗水及提高资源利用率的目的,该文针对分级等电沉淀回收蛋白质之后的低蛋白浓度废水,研究了蛋白-壳聚糖絮凝过程,探索了主要动力学和热力学因素对絮凝过程的影响;并根据Box-Benhnken设计进行了优化试验。结果表明,狭鳕鱼鱼糜漂洗水中蛋白质等电点主要集中在4.30和5.50,分级回收后蛋白质的回收率达到77.7%。其中絮凝时间、壳聚糖用量和脱乙酰度、絮凝温度和p H值对壳聚糖絮凝蛋白质均有影响,而絮凝温度的影响更多体现在50℃以上的较高温度区域。根据响应面分析结果,在脱乙酰度95%,反应时间90 min,p H值8.04,壳聚糖用量369 mg/L,温度19.6℃的条件下,可获得94.75%的蛋白总回收率,废水中蛋白质量浓度降至0.37 mg/m L以下。研究结果为富蛋白生产废水处理提供了技术参考。

玉米秸秆木质素的提取工艺优化及表征

应用碱溶-醇沉-酸析方法提取玉米秸秆木质素,Box-Behnken试验优化工艺条件为Na OH溶液浓度2.40 mol/L、反应时间3.10 h、提取温度74℃,木质素的提取率达到69.71%。经热重、傅里叶变换红外光谱和紫外-可见吸收光谱结构分析表明,木质素在130~500℃内发生热分解反应,部分官能团发生交联后具有很高的热稳定性,最大紫外吸收峰位于282 nm波长处,存在较多的化学活性基团。所得木质素因其化学活性高,可通过分子设计改性形成高分子材料,从而为玉米秸秆的资源化利用提供新途径。

酸沉淀法回收木薯黄浆废水中蛋白质及其影响因素的研究

以木薯黄浆废水为研究对象,分析木薯黄浆废水主要组成成分,并对其中的蛋白质组分进行有效地沉淀。通过实验测定木薯黄浆废水蛋白质的等电点在3.5-4.5之间。通过单因素实验条件,选择pH、沉淀时间、温度和黄浆废水蛋白质浓度为变量,利用正交实验分析影响木薯黄浆废水蛋白质沉淀因素主次和优化木薯黄浆废水蛋白质酸沉淀工艺,结果表明在pH为4.0、温度为35℃、提取时间为3.0h及蛋白质浓度为1400mg/L的条件下,木薯黄浆废水中蛋白质沉淀率达到最高为98.3%。木薯黄浆废水沉淀蛋白质富含15种氨基酸,可以作为动物饲料添加剂使用。

不同提油方法的油茶粕蛋白制备工艺研究

测定热榨、冷榨、有机溶剂萃取、水酶法浸提等不同提油方法所得的5种油茶粕的基本成分，采用碱提酸沉法提取油茶粕蛋白。结果表明，5种油茶粕样品的等电点pH值存在差异，范围为3．5～4．5，而冷榨、有机溶剂萃取、水酶浸提后的油茶粕蛋白酸沉时出现类似两个等电点现象。采用分段酸沉可提高蛋白质沉降率。在经正交试验优化碱提工艺奈件下，水酶法浸提茶油后的油茶粕蛋白的提取率达到66．8％。

鮰鱼下脚料蛋白质的回收及其凝胶特性研究

通过回收并制备鮰鱼下脚料的蛋白质凝胶,考察溶解pH、离心力、离子强度对鱼下脚料中蛋白质的溶解性及凝胶理化性质的影响。结果表明,溶解pH、离心力、离子强度对鱼下脚料中的蛋白质的溶解性能均有显著影响(P<0.05)。pH=2.5或pH=11.5,离心力为5 500r/min,离子强度为0.6M时,蛋白质溶解性能较好,pH=5.5时蛋白质溶解性最差。溶解pH=11.5时,制备的鱼肉凝胶蛋白质、灰分含量较高,脂类含量较低,并且凝胶的破断强度值、凹陷度以及凝胶强度值较高,但凝胶色泽较差。

高效液相色谱-质谱法同时测定婴幼儿配方奶粉中叶酸、VB_(12)和生物素

建立高效液相色谱．质谱法对婴幼儿配方奶粉中叶酸、VB12和生物素同时定性和定量分析方法。采用等电点沉淀（pH1．90／4．70）法提取样品，SB．Aq（2．1mm×100mm，1．8μm）色谱柱分离，0．1％（V／n甲酸溶液和乙腈作流动相，等度（16．5：83．5，V/V）洗脱，质谱MRM检测。结果表明：叶酸、VB12和生物素在5min内得到很好的分离。线性范围分别为3．5-250ng／mL、0．8～5．0ng／mL、0．7-50ng／mL，加样回收率平均值分别为97．8％、102．3％、96．9％，RSD分别为1．33％、0．9％、1．37％。该方法具有较好的精密度和准确性、灵敏度高、操作简单快速，可以应用于婴幼儿配方奶粉中叶酸、VB12和生物素的含量同时测定。