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User Behaviors Analysis in Website Identification Registration 被引量:1
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作者 甘曈 林福宏 +2 位作者 陈常嘉 郭宇春 郑毅 《China Communications》 SCIE CSCD 2013年第3期76-81,共6页
Nowadays, an increasing number of web applications require identification registration. However, the behavior of website registration has not ever been thoroughly studied. We use the database provided by the Chinese S... Nowadays, an increasing number of web applications require identification registration. However, the behavior of website registration has not ever been thoroughly studied. We use the database provided by the Chinese Software Develop Net (CSDN) to provide a complete perspective on this research point. We concentrate on the following three aspects: complexity, correlation, and preference. From these analyses, we draw the following conclusions: firstly, a considerable number of users have not realized the importance of identification and are using very simple identifications that can be attacked very easily. Secondly, there is a strong complexity correlation among the three parts of identification. Thirdly, the top three passwords that users like are 123456789, 12345678 and 11111111, and the top three email providers that they prefer are NETEASE, qq and sina. Further, we provide some suggestions to improve the quality of user passwords. 展开更多
关键词 user behaviors website identifi- cation COMPLEXITY CORRELATION PREFERENCE
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E型牛肠道病毒新疆BL311株的分离鉴定及致病性分析
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作者 陈俊贞 李祯 +4 位作者 张成远 袁圆圆 张乐乐 付强 史慧君 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第5期144-151,共8页
以采集自新疆博乐某牛场腹泻牛的粪便,接种胎牛肾细胞(Madin-Darby bovine kidney,MDBK),盲传15代分离牛肠道病毒(Bovine enterovirus,BEV),使用蚀斑纯化法连续纯化5轮得到纯化病毒,并命名为BL311。使用BL311株感染MDBK细胞后,观察细胞... 以采集自新疆博乐某牛场腹泻牛的粪便,接种胎牛肾细胞(Madin-Darby bovine kidney,MDBK),盲传15代分离牛肠道病毒(Bovine enterovirus,BEV),使用蚀斑纯化法连续纯化5轮得到纯化病毒,并命名为BL311。使用BL311株感染MDBK细胞后,观察细胞病变效应(cytopathic effect,CPE),采用Reed-Muench法计算病毒滴度,利用理化性质检测、透射电镜观察、基因型分析及对小鼠的致病性试验鉴定BL311分离株。结果显示,BL311分离株感染MDBK细胞24 h后细胞出现变圆、破裂和脱落等致细胞病变效应,病毒滴度显著增高(P<0.05);36 h后细胞出现大量CPE,病毒滴度极显著增高(P<0.01)。理化性质鉴定结果显示BL311分离株对有机溶剂具有一定抵抗力,紫外光照射1 h或56℃环境培养1 h可使毒株失活。电镜下观察BL311毒株为直径25~30 nm的球形颗粒,具有典型的小RNA病毒粒子形态。基因测序结果显示BL311毒株的基因全长是7514 nt,与国内报道的HY12分离株(KF748290)的同源性高达99%,属于BEV-E3型。致病性实验结果显示,BALB/c小鼠感染BL311毒株后,器官表现为肿大,且伴有出血;病理组织学观察可见组织器官炎性细胞浸润及出血。本研究分离纯化得到1株具有较强致病性的E种肠道病毒,将为新疆BEV的流行病学调查及致病机制研究提供依据。 展开更多
关键词 牛肠道病毒 分离鉴定 全基因组序列 致病性
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冷藏海鲈鱼优势腐败菌的筛选和鉴定 被引量:25
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作者 唐文静 王楚文 +1 位作者 柳云龙 宁喜斌 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第3期170-174,共5页
分离鉴定4℃冷藏条件下海鲈鱼的优势腐败菌,通过选择性培养基筛选获得单一菌株,对各菌株进行致腐能力的测定,确定冷藏海鲈鱼的优势腐败菌。对冷藏海鲈鱼的优势腐败菌进行菌落形态观察及部分生理生化实验、16S r DNA分子鉴定。结果表明,... 分离鉴定4℃冷藏条件下海鲈鱼的优势腐败菌,通过选择性培养基筛选获得单一菌株,对各菌株进行致腐能力的测定,确定冷藏海鲈鱼的优势腐败菌。对冷藏海鲈鱼的优势腐败菌进行菌落形态观察及部分生理生化实验、16S r DNA分子鉴定。结果表明,有4株冷藏海鲈鱼优势腐败菌,其中1株为草莓假单胞菌(Pseu domonas fragi),1株为腐败希瓦氏菌(Shewanella putrefaciens),其余2株为假单胞菌(Pseudomonas sp.)。在4℃冷藏条件下,草莓假单胞菌的致腐能力最强,其次是腐败希瓦氏菌和假单胞菌。 展开更多
关键词 海鲈鱼 冷藏 优势腐败菌 分离 鉴定
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红豆杉内生放线菌的分离及活性菌株的筛选与鉴定 被引量:5
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作者 张曼 解修超 +3 位作者 陈文强 邓百万 张晓伟 孔亚男 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期549-554,共6页
通过组织匀浆法分离红豆杉(Taxus chinensis)根、茎、叶3个部位的内生放线菌,采用滤纸片法初步研究了内生放线菌发酵液的抑菌活性,并对抑菌活性明显的菌株进行了分子鉴定。结果表明,分离纯化得到内生放线菌55株,抑菌活性试验中共有21株... 通过组织匀浆法分离红豆杉(Taxus chinensis)根、茎、叶3个部位的内生放线菌,采用滤纸片法初步研究了内生放线菌发酵液的抑菌活性,并对抑菌活性明显的菌株进行了分子鉴定。结果表明,分离纯化得到内生放线菌55株,抑菌活性试验中共有21株表现出了不同程度的拮抗作用,占全部分离菌株的38.2%,其中4株具有明显的抑菌活性。经16SrDNA序列分析,初步鉴定3株为链霉菌属(Streptomyces sp.),1株为小单孢菌属(Micromonosporasp.)。 展开更多
关键词 红豆杉 内生放线菌 分离 筛选 鉴定
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国内新型基因2型牛病毒性腹泻病毒研究进展 被引量:15
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作者 张倩 陶洁 +10 位作者 张东 区炳明 林航 杨颖 张信军 朱礼倩 王建业 贺生中 孟婷 谢静 朱国强 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2017年第1期80-86,共7页
牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)有两种基因型:基因1型(BVDV-1)和基因2型(BVDV-2)。以往的流行病学调查显示BVDV-1的分布和流行区域更加广泛,但近年来国内BVDV-2的发病率呈持续升高趋势。BVDV-2通常会引起严重的急... 牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)有两种基因型:基因1型(BVDV-1)和基因2型(BVDV-2)。以往的流行病学调查显示BVDV-1的分布和流行区域更加广泛,但近年来国内BVDV-2的发病率呈持续升高趋势。BVDV-2通常会引起严重的急性感染和出血综合征,给养牛业造成巨大损失。本文就BVDV-2特异性检测方法和基因分型的建立,型特异性BVDV-2毒株的分离与鉴定,BVDV-2优势分离株的全基因组测定与遗传特性分析及BVDV-1和BVDV-2抗原和抗体检测平台的建立等方面展开简要综述。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 分离株 检测 鉴定 全基因组
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猫传染性鼻气管炎病毒的分离与鉴定 被引量:8
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作者 刘健 李鑫 +7 位作者 徐锋 杨显超 邓波 杨德全 鞠厚斌 葛杰 龚国华 周锦萍 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2016年第1期22-26,共5页
采用直接免疫荧光和测序方法对5株病毒分离株进行了病毒的鉴定;并采用免疫学、化学和生物学方法对这5株病毒分离株进行了研究。结果显示,5株病毒分离株被鉴定为猫疱疹病毒I型;g D序列未发生变化;病毒仅在F81细胞中增殖,能引起F81细胞明... 采用直接免疫荧光和测序方法对5株病毒分离株进行了病毒的鉴定;并采用免疫学、化学和生物学方法对这5株病毒分离株进行了研究。结果显示,5株病毒分离株被鉴定为猫疱疹病毒I型;g D序列未发生变化;病毒仅在F81细胞中增殖,能引起F81细胞明显的细胞病变;猫、公鸡、人O型、牛、猪、兔、绵羊的红细胞不具有凝集作用;病毒对pH3.0、有机溶剂和60℃高温敏感;病毒蚀斑形成单位为3×10~6个PFU/m L,纯化株TCID50值为10^(-5.0)TCID_(50)/0.1m L。该研究结果表明,上海地区宠物猫存在猫传染性鼻气管炎流行风险,其病原为猫疱疹病毒I型且部分病原特性未发生变化。 展开更多
关键词 猫疱疹病毒Ⅰ型 分离 鉴定
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海参体壁中α-1,4淀粉酶的分离纯化及性质 被引量:5
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作者 张杰 张永勤 +4 位作者 罗彩华 刘征东 程袁芬 卢菲菲 张童 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第5期137-141,共5页
通过采用匀浆、硫酸铵盐析、透析、DEAE-52阴离子交换层析、Sephacryl S-300凝胶层析等方法从海参体壁中分离纯化并得到了α-1,4淀粉酶。结果表明,该酶具有3条亚基链,分子质量约为420 k D;最适p H值为9.0,最适温度为80℃,90℃条件下保温... 通过采用匀浆、硫酸铵盐析、透析、DEAE-52阴离子交换层析、Sephacryl S-300凝胶层析等方法从海参体壁中分离纯化并得到了α-1,4淀粉酶。结果表明,该酶具有3条亚基链,分子质量约为420 k D;最适p H值为9.0,最适温度为80℃,90℃条件下保温30 min后仍有38%以上的相对酶活性,因此,该酶是一种具有较高热稳定性的碱性高温淀粉酶。K+、Fe3+和Mn2+对其有较强的抑制作用,Cu2+和Ca2+对其有较强的激活作用。 展开更多
关键词 海参 自溶 淀粉酶 分离 纯化 热稳定性
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全蚕粉中1-脱氧野尻霉素的提取分离及分离物对肿瘤细胞的抑制作用 被引量:14
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作者 娄德帅 范涛 +2 位作者 王储炎 颜辉 桂仲争 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期109-114,共6页
利用柱前衍生化反相高效液相色谱法检测不同前处理全蚕粉中1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin,DNJ)的提取分离效果,并研究其分离产物对人宫颈癌HeLa细胞的抗肿瘤作用。结果表明,超低温冷冻干燥、热风烘干和真空浓缩煎煮冷冻干燥所得全... 利用柱前衍生化反相高效液相色谱法检测不同前处理全蚕粉中1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin,DNJ)的提取分离效果,并研究其分离产物对人宫颈癌HeLa细胞的抗肿瘤作用。结果表明,超低温冷冻干燥、热风烘干和真空浓缩煎煮冷冻干燥所得全蚕粉中DNJ的质量分数分别为0.494 9%、0.383 9%和0.607 6%;冷冻干燥全蚕粉粉碎粒度为0.15、0.25和0.425 mm时,DNJ质量分数分别为0.494 9%、0.321 5%和0.089 5%;用稀酸浸渍及阳离子交换树脂提取与分离全蚕粉中的DNJ效果最佳,分离物中DNJ的质量分数达到1.08%。浓度为40 mg/mL的全蚕粉分离物对肿瘤细胞的生长抑制率达92.27%,可使肿瘤细胞增殖能力完全丧失。结果提示:采用真空浓缩煎煮结合超低温冷冻干燥、超细粉碎和稀酸浸渍及阳离子交换树脂分离技术,可有效提高全蚕粉中DNJ的提取、分离效率,含DNJ的全蚕粉分离物对HeLa肿瘤细胞的生长具有显著的抑制作用。 展开更多
关键词 全蚕粉 1-脱氧野尻霉素 低温冻干 阳离子交换树脂分离 抗肿瘤
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一株溶磷真菌的分离鉴定及其溶磷能力的初步研究 被引量:9
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作者 梁艳琼 雷照鸣 +3 位作者 贺春萍 郑肖兰 余树华 郑服丛 《热带作物学报》 CSCD 2011年第6期1116-1121,共6页
利用有机磷液体培养基进行生物富集,无机磷固体培养基平板稀释法进行分离筛选,分离到一株具有溶磷能力的菌株PSFM,经过形态观察和核糖体间隔区ITS扩增序列分析,确定该菌株为黑曲霉(Aspergillus niger)。以Ca3(PO4)2为唯一磷源的液体培... 利用有机磷液体培养基进行生物富集,无机磷固体培养基平板稀释法进行分离筛选,分离到一株具有溶磷能力的菌株PSFM,经过形态观察和核糖体间隔区ITS扩增序列分析,确定该菌株为黑曲霉(Aspergillus niger)。以Ca3(PO4)2为唯一磷源的液体培养基接种参试菌株PSFM,在28℃,180r/min条件下通过不同时间取样测定培养液的pH、速效磷含量,同时研究溶磷真菌PSFM的生长动态及在固体平板上的溶磷能力。结果表明,PSFM菌株具有高效溶磷能力,培养144 h溶磷量达到511.28 mg/L,继续培养菌株溶磷能力降低;溶磷菌株的培养液中pH值随溶磷量的增大而下降,在144 h时该培养液的pH值降到2.03,以后仍继续保持在低pH值水平。对供试菌株PSFM的生长曲线研究发现其在第6天时菌丝体重量达到最大值。 展开更多
关键词 溶磷菌 溶磷能力 分离 鉴定
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不同阳离子皂土对植物RNA提取效果的影响 被引量:4
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作者 邢杰 淳俊 +2 位作者 郑彦峰 王胜华 陈放 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第21期6385-6385,6390,共2页
在提取缓冲液中加入皂土能有效地去除蛋白质并抑制RNAse,以Mg2+、K+和Na+3种阳离子处理的皂土提取缓冲液提取麻疯树叶片总RNA,结果显示,不同的处理对RNA的提取效果明显不同。其中Mg2+-K+-Na+-皂土的提取效果最佳,叶片RNA提取得率为790μ... 在提取缓冲液中加入皂土能有效地去除蛋白质并抑制RNAse,以Mg2+、K+和Na+3种阳离子处理的皂土提取缓冲液提取麻疯树叶片总RNA,结果显示,不同的处理对RNA的提取效果明显不同。其中Mg2+-K+-Na+-皂土的提取效果最佳,叶片RNA提取得率为790μg/g(鲜重),比对照高6倍。用该法提取的RNA能用于分子克隆与基因表达分析等后继分子生物学实验。该方法为一种简便,快速,经济高效的RNA提取方法。 展开更多
关键词 RNA提取 麻疯树 阳离子 皂土
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银杏种仁蛋白分离纯化及其抑菌活性 被引量:6
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作者 吴海霞 吴彩娥 +3 位作者 范龚健 李婷婷 应瑞峰 华菁 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第13期108-113,共6页
从银杏种仁中分离纯化具有抑菌活性的蛋白质,并分析其抑菌活性。结合抑菌活性分析,采用硫酸铵分级盐析、透析、纤维素DE-52阴离子交换柱层析及Sephadex G-75凝胶过滤柱层析对银杏种仁蛋白(Ginkgo bilobaseed protein,GBSP)进行分离纯化... 从银杏种仁中分离纯化具有抑菌活性的蛋白质,并分析其抑菌活性。结合抑菌活性分析,采用硫酸铵分级盐析、透析、纤维素DE-52阴离子交换柱层析及Sephadex G-75凝胶过滤柱层析对银杏种仁蛋白(Ginkgo bilobaseed protein,GBSP)进行分离纯化,得到一种抑菌蛋白GBSPⅠ-A。十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)检测结果显示,该蛋白呈单一条带,其分子质量约为42.80 kD;Superdex G-75柱层析结果显示GBSPⅠ-A呈单一对称峰,高效凝胶渗透色谱测定其分子质量为39.32 kD;该蛋白对肺炎克雷伯氏菌、金黄色葡萄球菌、戴尔有孢圆酵母及黑曲霉的最小抑菌浓度(minimum inhibitory conce ntration,MIC)分别为20、20、20、12 mg/mL。 展开更多
关键词 银杏种仁蛋白 分离纯化 抑菌 分子质量
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冠醚苯酚共缩聚物的合成与性能 被引量:2
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作者 束家有 李彤 +2 位作者 张文明 胡宏纹 王德 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期13-17,共5页
由2,6-二羟甲基-4-甲基(或磺酸基)苯酚分别和芳香族冠醚(B15C5、B18C6、DB18C6、DB24c8等)在强酸催化剂下缩聚,合成了2个系列冠醚共缩聚物。它们的萃取能力和配合作用均优于相应的单冠醚,并可作为... 由2,6-二羟甲基-4-甲基(或磺酸基)苯酚分别和芳香族冠醚(B15C5、B18C6、DB18C6、DB24c8等)在强酸催化剂下缩聚,合成了2个系列冠醚共缩聚物。它们的萃取能力和配合作用均优于相应的单冠醚,并可作为树脂吸附分离多种金属离子,作为配合剂测定钾、钠以及作为气相色谱固定液分离多种有机物。 展开更多
关键词 冠醚 苯酚化合物 共缩聚物
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大鼠精原干细胞的筛选与培养 被引量:3
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作者 王庆忠 王东方 +1 位作者 刘慧莲 冯道俊 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期747-751,共5页
目的:建立大鼠精原干细胞的筛选和培养的方法体系。方法:采用改良的二步酶消化法分离大鼠睾丸细胞,用改进的差异贴壁分选法筛选大鼠精原干细胞,用添加了胶质细胞源神经营养因子(GDNF)、可溶性GFRα1和bFGF的DMEM/F12无血清培养基和大鼠... 目的:建立大鼠精原干细胞的筛选和培养的方法体系。方法:采用改良的二步酶消化法分离大鼠睾丸细胞,用改进的差异贴壁分选法筛选大鼠精原干细胞,用添加了胶质细胞源神经营养因子(GDNF)、可溶性GFRα1和bFGF的DMEM/F12无血清培养基和大鼠胚胎成纤维细胞饲养层培养高度富集的大鼠精原干细胞,通过形态观察、标志基因的RT-PCR检测和免疫细胞化学分析鉴定培养细胞的干细胞活性。结果:我们的改良二步酶消化法和差异贴壁分选法能有效的分离和筛选大鼠精原干细胞,这些高度富集的精原干细胞能够存活20 d以上,形成较大的干细胞克隆,并表达精原干细胞的标志基因和具有干细胞活性。结论:成功建立了大鼠精原干细胞的分离、筛选和培养体系。 展开更多
关键词 精原干细胞 分离纯化 无血清培养 大鼠
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聚乙二醇修饰海葵神经毒素rhk2a的分离与纯化 被引量:2
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作者 黄慧 潘育方 +2 位作者 郭晓娟 舒雅俊 杨帆 《广东药学院学报》 CAS 2009年第6期551-554,共4页
目的对聚乙二醇化海葵神经毒素(mPEG-rhk2a)修饰产物进行分离与纯化。方法将聚乙二醇(PEG)化反应所得混合产物超滤除盐后,采用SP-650S强阳离子交换层析柱和CM-650S弱阳离子交换层析柱进行分离纯化,收集不同NaCl离子浓度下的梯度洗脱... 目的对聚乙二醇化海葵神经毒素(mPEG-rhk2a)修饰产物进行分离与纯化。方法将聚乙二醇(PEG)化反应所得混合产物超滤除盐后,采用SP-650S强阳离子交换层析柱和CM-650S弱阳离子交换层析柱进行分离纯化,收集不同NaCl离子浓度下的梯度洗脱液,经超滤除盐、冷冻干燥、SDS-PAGE电泳检测,确定分离纯化mPEG-rhk2a的色谱条件。结果在保证mPEG-rhk2a稳定性的前提下,随着缓冲液pH值的降低,2种阳离子交换柱与mPEG-rhk2a的结合量均增加;在同一pH值下,强阳离子交换柱的结合情况更好。用SP-650S强阳离子交换层析柱进行分离纯化时,洗脱液中溶液电导率在57 ms/cm时,mPEG-rhk2a能被洗脱下来,而且盐离子浓度梯度变化越缓,mPEG-rhk2a修饰产物各洗脱峰的分离度越高;用CM-650S弱阳离子交换层析柱进行分离纯化时,修饰产物mPEG-rhk2a主要在穿透峰中出现。结论使用SP-650S强阳离子交换层析柱,用pH4.0的0.02 mol/L醋酸盐缓冲液与含0.5 mol/LNaCl的pH4.0的0.02 mol/L醋酸盐缓冲液(后者比例变化为0%→50%)进行梯度洗脱,修饰产物mPEG-rhk2a与未修饰的rhk2a得到了很好的分离。 展开更多
关键词 聚乙二醇化海葵神经毒素 阳离子交换层析 分离 纯化
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一株具抗菌活性的恒山黄芪内生真菌的分离与鉴定 被引量:6
15
作者 周凤 刘瑞 +1 位作者 张弘弛 张睿 《陕西科技大学学报(自然科学版)》 2012年第3期80-82,87,共4页
从药用植物恒山黄芪的根、茎、叶中分离出49株内生真菌,经抗菌活性检测,筛选出1株具有高活性广谱抗菌的菌株AR08,经形态特征和ITS序列鉴定菌株AR08为烟曲霉(As-pergillus fumigatus).其抗菌谱表明,它对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌及测... 从药用植物恒山黄芪的根、茎、叶中分离出49株内生真菌,经抗菌活性检测,筛选出1株具有高活性广谱抗菌的菌株AR08,经形态特征和ITS序列鉴定菌株AR08为烟曲霉(As-pergillus fumigatus).其抗菌谱表明,它对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌及测试的植物病原真菌均具有很强的抗性. 展开更多
关键词 黄芪 内生真菌 生物活性 分类鉴定
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高分散隔离活性位催化剂中过渡金属离子结构对丙烷选择氧化反应性能的影响 被引量:1
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作者 韩丽艳 范晓强 +2 位作者 张哲 王宏宣 刘坚 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期516-522,共7页
考察了碱金属K修饰的SiO2负载极低含量过渡金属的高分散隔离活性位系列催化剂(K-M/SiO2(n(K)∶n(M)∶n(Si)=10∶1∶1000),M=V,Cr,Mn,Fe,Co,Ni,Cu,Zn)的丙烷选择氧化催化性能,并运用UV-Raman和CO2-TPD等方法,对该系列催化剂进行了结构和... 考察了碱金属K修饰的SiO2负载极低含量过渡金属的高分散隔离活性位系列催化剂(K-M/SiO2(n(K)∶n(M)∶n(Si)=10∶1∶1000),M=V,Cr,Mn,Fe,Co,Ni,Cu,Zn)的丙烷选择氧化催化性能,并运用UV-Raman和CO2-TPD等方法,对该系列催化剂进行了结构和物化性能表征,探讨了催化剂的表面离子结构与催化反应性能之间的关系。发现钾修饰的SiO2负载过渡金属高分散隔离活性位催化剂上过渡金属离子的组态结构,对丙烷选择氧化反应性能有重要影响。相对稳定的全充满或无d电子的表面离子结构有利于选择氧化反应进行,而存在多种价态的相对不稳定的离子结构有利于深度氧化的进行。这一离子结构与丙烷选择氧化催化性能的关系与前期乙烷选择氧化规律相似,进一步说明在高分散隔离活性位催化剂中,过渡金属离子的电子组态结构是影响低碳烷烃选择氧化反应性能的最重要因素。 展开更多
关键词 高分散隔离活性位 过渡金属离子 催化剂 金属离子的组态结构 丙烷 选择氧化
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一株猪细小病毒7群的鉴定和分离 被引量:1
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作者 张志 张丽丽 +3 位作者 刘爽 吴发兴 李晓成 王树双 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2019年第4期63-68,共6页
猪细小病毒7群(Porcine parvovirus 7,PPV-7)是2016年首次从美国猪群发现和鉴定的新的猪细小病毒。为弄清我国猪群中是否存在PPV-7,本文用PPV-7特异性的实时荧光定量PCR和常规PCR方法对采集的10份猪流产胎儿和10份保育仔猪病料分别进行... 猪细小病毒7群(Porcine parvovirus 7,PPV-7)是2016年首次从美国猪群发现和鉴定的新的猪细小病毒。为弄清我国猪群中是否存在PPV-7,本文用PPV-7特异性的实时荧光定量PCR和常规PCR方法对采集的10份猪流产胎儿和10份保育仔猪病料分别进行检测,结果发现其中1份保育仔猪样品的常规PCR和实时荧光定量PCR检测结果均为阳性,常规PCR扩增出的246 bp特异性条带测序和分子遗传演化时发现,该序列与PPV-7参考毒株KU5637332和KY996757的同源性分别为99.6%和98.0%,表明该样品中含有PPV-7,进一步用PK-15细胞分离病毒,连续传代5次后PK-15细胞都没有出现典型的细胞病变,但其上清液用实时荧光定量PCR方法都可以检测到该病毒。本研究结果证实我国猪群中存在PPV-7的感染,且检测到的PPV-7毒株能在PK15细胞中增殖。 展开更多
关键词 猪细小病毒7群 实时荧光定量PCR 常规PCR 鉴定 分离
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二年残孔菌子实体化学成分的研究 被引量:1
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作者 刘毅 文春南 +1 位作者 刘元 麻兵继 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期2094-2096,共3页
目的研究二年残孔菌Abortiporus biennis(Bull.)Singer子实体的化学成分。方法二年残孔菌子实体甲醇提取物的乙酸乙酯部位采用硅胶、Sephadex LH-20、RP-18柱进行分离纯化,通过波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离出6个化合物,... 目的研究二年残孔菌Abortiporus biennis(Bull.)Singer子实体的化学成分。方法二年残孔菌子实体甲醇提取物的乙酸乙酯部位采用硅胶、Sephadex LH-20、RP-18柱进行分离纯化,通过波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离出6个化合物,分别鉴定为(22E,24R)-麦角甾-5,7,22-三烯-3β-醇(1)、(22E,24R)-5α,8α-过氧麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(2)、啤酒甾醇(3)、(22E,24R)-麦角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮(4)、1,3-油酸-2-亚油酸革油酯(5)、脑苷脂B(6)。结论所有化合物均为首次从该真菌中分离得到。 展开更多
关键词 二年残孔菌 子实体 化学成分 分离鉴定
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒SHxx13/2013株的分离与鉴定 被引量:1
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作者 程群 姜一峰 +8 位作者 虞凌雪 王康 杨莘 李丽薇 高飞 于海 童武 童光志 周艳君 《中国动物传染病学报》 CAS 2014年第2期32-38,共7页
2013年初上海某猪场保育猪群中出现高热、呼吸障碍等临床表现,导致大部分发病猪死亡,为了确定此次猪群中爆发疫病的病原,本研究从发病猪群中随机采集了15份血液样品,利用RT-PCR方法对本次疫病病原进行了检测。结果显示,有11份临床样品... 2013年初上海某猪场保育猪群中出现高热、呼吸障碍等临床表现,导致大部分发病猪死亡,为了确定此次猪群中爆发疫病的病原,本研究从发病猪群中随机采集了15份血液样品,利用RT-PCR方法对本次疫病病原进行了检测。结果显示,有11份临床样品呈现猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)强阳性,且与高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Highly pathogenic Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,HP-PRRSV)对照大小相一致。随后从阳性样品中选取SHxx13/2013在Marc-145细胞中进行病毒的分离与鉴定,结果显示SHxx13/2013在细胞接种后第1代即出现明显的细胞效应(cytopathic effect,CPE),其病变特征与高致病性PRRSV强毒HuN4株一致。对SHxx13/2013第5代细胞分离毒进行RT-PCR和IFA等特异性鉴定,结果显示该毒株为PRRSV分离株,其蚀斑形态和生长特性与强毒HuN4株相似。分段克隆该毒株全长基因进行测序和序列分析,结果显示,新分离的流行毒SHxx13/2013株全长基因组为15 319 bp,其Nsp2基因特征与HP-PRRSV一致,在第482位和第534~562位发生两处共30个氨基酸的不连续缺失,且该毒株与高致病性PRRSV代表毒株HuN4亲缘关系较近,全长基因的核苷酸同源性为99.6%。本研究结果表明新分离的SHxx13/2013株属于高致病性PRRSV分离株,据此我们推测今年年初上海某猪场爆发的疫情主要是由HP-PRRSV感染所致。 展开更多
关键词 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 PCR 分离 鉴定
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鸡致病性大肠杆菌16SrRNAPCR鉴定方法的建立 被引量:6
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作者 徐睿 季芳 李梦龙 《现代畜牧兽医》 2016年第7期1-5,共5页
为了建立一种鸡致病性大肠杆菌的快速检测方法,本试验通过无菌采集疑似感染致病性大肠杆菌鸡的心、肝、脾、肾作为病料,经过细菌分离培养、生化鉴定和致病力试验,利用大肠杆菌16S rRNA通用引物对3株致病菌进行PCR扩增,均得到了特异性扩... 为了建立一种鸡致病性大肠杆菌的快速检测方法,本试验通过无菌采集疑似感染致病性大肠杆菌鸡的心、肝、脾、肾作为病料,经过细菌分离培养、生化鉴定和致病力试验,利用大肠杆菌16S rRNA通用引物对3株致病菌进行PCR扩增,均得到了特异性扩增产物。并对扩增产物进行核酸测序和BLAST比对。结果显示,分离得到3株鸡致病性大肠杆菌(DZMG、DGCG1、DGCP3),扩增出的16S rRNA基因序列与鸡致病性大肠杆菌基因序列同源性为100%。提示该检测方法具有特异性高和简单快捷的特点。 展开更多
关键词 鸡致病性大肠杆菌 分离培养 16S RRNA PCR鉴定
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